祝骥 作品数:9 被引量:41 H指数:3 供职机构: 浙江工业大学 更多>> 发文基金: 浙江省科技攻关计划 浙江省科技厅项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 更多>>
单克隆抗体纯化研究进展 随着哺乳动物细胞大规模培养技术的快速发展,单克隆抗体单批发酵产量已经达到或超过了公斤级水平,这就需要下游纯化过程的规模相应扩大,以适应不断提高的上游生产力。本文对单克隆抗体纯化的技术及过程进行了综述,重点讨论了纯化过程中... 应国清 祝骥 王鸿 易喻 梅建凤 陈建澍关键词:单克隆抗体 纯化过程 双水相萃取 文献传递 金属螯合亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体 被引量:3 2009年 采用金属螯合亲和层析法,纯化了小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原单克隆抗体,对上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液种类和洗脱方式进行优化。结果表明,采用降低pH分步洗脱时,最佳上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+0.5mol/LNaCl,抗体在pH5.0被洗脱下来,抗体回收率80%,纯度85%。采用咪唑浓度梯度洗脱时,最佳的上样缓冲液为pH8.0,20mmol/LPB+5mmol/L咪唑,抗体纯度大于95%,回收率65%;在上样缓冲液中不添加NaCl而添加少量的咪唑,更有利于抗体分离。以上洗脱方式都能较好地保持mAb的生物学活性,为该抗体的应用提供了必要的实验基础。 祝骥 易喻 吴银飞 朱克寅 梅建凤 陈建澍 应国清关键词:金属螯合亲和层析 单克隆抗体 乙肝核心抗原 小鼠腹水 蛋白A亲和层析法纯化抗乙肝核心抗原单克隆抗体 被引量:2 2010年 建立从小鼠腹水中纯化抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体的一步层析法。将含抗HBcAg单克隆抗体的腹水经离心、过滤和缓冲溶液变换预处理后,采用HiTrap rProtein A FF亲和层析柱纯化,并探讨了上样缓冲液的pH值和NaCl浓度,洗脱液的种类、pH值以及体积流量对抗体纯度及回收率的影响,纯化后的单克隆抗体的生物学活性用间接ELISA法测定。结果显示,以pH7.0,20mmol/LPB+3.0mol/LNaCl为上样缓冲液,0.1mol/LGly-HCl为洗脱液,体积流量为5.0ml/min时,抗HBcAg单抗的纯度大于95%,回收率达75%,纯化后的单克隆抗体的生物学活性没有下降。本研究建立了蛋白A亲和层析法纯化抗HBcAg单克隆抗体的方法,其操作简便、快速而且效果良好。 吴淑江 祝骥 李敏 易喻 梅建凤 朱克寅 应国清关键词:单克隆抗体 乙肝核心抗原 纯化 单克隆抗体纯化研究进展 被引量:5 2008年 综述了单克隆抗体的纯化技术,讨论了各单元操作的关键问题和解决方法,并重点介绍了模拟移动床色谱、双水相萃取、膜色谱等操作简单、能连续生产、低成本的纯化技术。 应国清 祝骥 易喻 梅建凤 陈建澍关键词:单克隆抗体 纯化 抗乙肝核心抗原单克隆抗体分离纯化的研究 乙型肝炎是严重危害人类健康的病毒性传染病,也是各种病毒性肝炎中对人类危害最大的疾病。在我国,乙肝表面抗原(HBsAg)阳性者约1.2亿人,慢性乙型肝炎患者达3000多万人,给社会和家庭造成严重负担,已成为当今社会非常突出... 祝骥关键词:单克隆抗体 纯化 层析 乙肝核心抗原 文献传递 单克隆抗体纯化研究进展 随着哺乳动物细胞大规模培养技术的快速发展,单克隆抗体单批发酵产量已经达到或超过了公斤级水平,这就需要下游纯化过程的规模相应扩大,以适应不断提高的上游生产力。本文对单克隆抗体纯化的技术及过程进行了综述,重点讨论了纯化过程中... 应国清 祝骥 王鸿 易喻 梅建凤 陈建澍关键词:发酵工艺 单克隆抗体 纯化技术 细胞培养 抗菌肽的研究进展 被引量:28 2008年 近年来,由于细菌耐药性问题日趋严峻,开发新型抗菌制剂已迫在眉睫。抗菌肽具有相对分子质量小、对热稳定、抗菌谱广及不同于抗生素的抗菌机制,不产生耐药性,因而具有重要的临床应用价值。本文对天然来源、蛋白质酶解、化学合成及基因工程方法产生的抗菌肽及其研究进展进行了综述。 祝骥 高飞 易喻 陈建澍 应国清关键词:基因工程 化学合成 疏水作用层析法纯化抗乙肝病毒核心抗原单克隆抗体 被引量:4 2010年 目的:采用疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体(mAb),并对分离条件进行优化。方法:采用不同疏水层析介质、溶液pH和NaCl浓度,研究其对抗体吸附的影响,以及分析不同的洗脱方式和洗脱体积对抗体洗脱的影响,并用ELISA法检测纯化后抗体的活性。结果:疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗HB-cAgmAb(IgG1)的最适条件是以pH7.0、20mmol/LPB+1.2mol/L(NH4)2SO4为上样缓冲液,采用1.2~0mol/L(NH4)2SO4,12CV梯度进行洗脱,获得的mAb纯度大于75%,回收率达80%,纯化后mAb的活性保持良好。结论:采用疏水作用层析对mAb进行纯化,并优化了各步实验条件,为建立具有抗体纯度高、生物学活性好、易于放大的抗HBcAg的mAb的纯化方法提供了必要的实验基础。 吴银飞 祝骥 李敏 易喻 应国清关键词:层析 疏水作用 单克隆抗体 乙肝核心抗原 诊断用单克隆抗体分离纯化的研究及产业化开发 李敏 梅建凤 朱克寅 易喻 祝骥 沈泓 崔国艳 孙洋 采用重组蛋白A亲和层析法技术,获得乙肝核心抗体(HBcAB)纯度大于95%,抗体回收率达75%;人绒毛膜促性腺激素抗体(HCGAb)的纯度高于95%,抗体回收率可达75%,抗体的生物学活性良好.项目通过在合作企业的实施和...关键词:关键词:单克隆抗体