王秀伟
- 作品数：40 被引量：55H指数：4
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学环境科学与工程更多>>
- 一种生物抑菌制剂及其应用
- 本发明属于制药领域，提供了一种生物抑菌制剂，所述制剂由蚯蚓提取物、核酸酶激活剂和溶菌酶组成，所述蚯蚓提取物的含量为0.01g/L‑2g/L，所述核酸酶激活剂的含量为1mM‑1000mM，所述溶菌酶的含量为0.1 g/L‑...
- 朱智强孙春荣王秀伟官臻杨爱云
- INPP5E基因在初级纤毛相关儿童疾病中的研究进展
- 2023年
- 肌醇多聚磷酸-5-磷酸酶(INPP5E)基因编码INPP5E,其广泛分布于人类和小鼠的多种组织内,如心脏、大脑和睾丸等,通过调节细胞内磷脂酰肌醇三磷酸含量影响磷酸肌醇代谢通路,从而参与细胞内信号转导、细胞增殖及分化、细胞极性等过程,在初级纤毛的发生过程中发挥重要作用,与儿童纤毛疾病密切相关。现针对INPP5E基因在初级纤毛相关儿童疾病中的研究进展进行综述,结合实验室研究结果,以期为INPP5E基因在初级纤毛的调控及儿童纤毛疾病的防治提供新思路。
- 于佳璐王秀伟王建华
- 关键词：磷酸肌醇儿童发育
- INPP5E基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨肌醇多聚磷酸5-磷酸酶(INPP5E)基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制。方法采用前期复制的神经管缺陷(NTD)小鼠模型,在体视显微镜下观察胚胎表型、苏木精-伊红染色情况,测量胚胎顶臀长、体重等指标;重亚硫酸盐测序法检测NTD组及对照组胚胎发育第11.5天小鼠胚胎神经组织中INPP5E基因启动子区DNA甲基化情况;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting检测胚胎神经组织中INPP5E蛋白和mRNA相对表达量;超高效液相色谱串联质谱法检测胚胎神经组织中叶酸(FA)、5-甲基四氢叶酸(5-MeTHF)、5-甲酰四氢叶酸(5-FoTHF)及同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果NTD组小鼠胚胎神经组织INPP5E基因启动子区甲基化水平、INPP5E蛋白和mRNA相对表达量在胚胎发育第11.5天时较对照组低(P<0.05)。NTD组胚胎神经组织的FA和Hcy水平较对照组升高(P<0.05),而5-MeTHF和5-FoTHF水平较对照组低(P<0.05)。结论INPP5E基因在调节小鼠胚胎神经管闭合中起重要作用。FA代谢紊乱引起的INPP5E基因启动子区甲基化水平降低,可能通过影响其表达水平参与NTD的发生。
- 高婷婷岳慧轩李莘秦佳星王秀伟官臻牛勃郭金王建华钟儒刚
- 关键词：神经管DNA甲基化
- 检测生物标志物在制备神经管畸形疾病的产品的应用
- 本发明属于生物医药技术领域，公开了一种检测生物标志物在制备神经管畸形疾病的产品的应用，生物标志物为纤毛相关异常基因；生物标志物为Ins2、Mapk1、Ptpn5或HSP90ab1；生物标志物的产品为纤毛芯片生物芯片；制备...
- 官臻王建华王秀伟梁颖超李莘朱智强杨爱云于佳璐郭晓兰
- 羟基脲诱导神经管畸形小鼠模型及与其他小鼠模型的比较研究被引量：1
- 2021年
- 目的本研究拟通过干扰新的叶酸相关代谢-核苷三磷酸还原成相应的脱氧核苷三磷酸通路中的关键酶-核苷酸还原酶,诱导构建神经管畸形(NTDs)小鼠模型,并且与前期构建的NTDs小鼠模型进行比较。方法实验小鼠选用C57BL/6J小鼠,购自北京华阜康公司,雌鼠60只,雄鼠30只,小鼠年龄7~8周,体重18~20 g,常规饲养于SPF级动物房。小鼠饲养一周后,晚上18∶00按照雄雌(1∶2)进行合拢,早上分笼将有阴栓的小鼠标记为孕0.5 d(E 0.5)。按照随机分组的方法将小鼠分为6组。其中实验组5组,在神经管闭合前的孕7.5 d(E 7.5),给予5种剂量的羟基脲进行腹腔注射;正常对照组,采用0.9%的氯化钠水溶液注射。采用不同剂量的羟基脲(HU)腹腔注射C57BL/6J孕鼠,诱导构建最佳小鼠NTDs模型,筛选出HU的最佳造模剂量为NTDs组。利用Western blot方法和免疫组化方法观察神经上皮细胞增殖和凋亡的情况,与前期诱导的NTDs小鼠模型中的结果进行对比。结果HU可诱导出NTDs的小鼠模型,免疫组化检测结果显示,畸形胚胎中的PCNA的阳性细胞低于正常胚胎组;Caspase3的阳性细胞高于正常组(P<0.05)。PCNA蛋白在NTDs组中的表达水平明显低于正常对照组(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白在NTDs组中的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),并且与前期诱导模型的结果一致。结论本研究通过干扰核苷酸还原酶,引起了神经管发育过程中细胞增殖和凋亡的失衡,从而诱导构建出NTDs小鼠模型,为进一步研究NTDs的机制提供了新的动物模型。
- 官臻王秀伟朱智强岳慧轩李莘秦佳星牛勃王建华
- 关键词：羟基脲神经管畸形细胞增殖凋亡小鼠
- 5-氟尿嘧啶对神经管畸形胎鼠脑组织基因表达的影响被引量：2
- 2020年
- 目的利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导C57BL/6J小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察5-FU对NTDs胎鼠脑组织基因表达的影响。方法采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级C57BL/6J小鼠,孕鼠随机分为实验组和对照组。在孕7.5 d时,实验组孕鼠腹腔注射12.5 mg/kg的5-FU(叶酸相关代谢通路中关键酶胸苷酸合成酶抑制剂);对照组孕鼠腹腔注射等体积的生理盐水。孕13.5 d时通过体视显微镜及HE染色观察胎鼠畸形及神经管发育情况。在此基础上利用表达谱芯片分析NTDs胎鼠脑组织中基因表达的变化,并利用实时荧光定量PCR进行验证。统计学方法采用t检验。结果实验组小鼠NTDs的发生率为42.3%(22/52),主要为露脑畸形;对照组无一例NTDs。HE染色可见NTDs胎鼠的端脑和后脑结构紊乱。表达谱芯片筛选出差异表达基因137个,其中表达上调的基因40个,表达下调的基因97个,这些基因主要参与了多器官发育、细胞增殖及分化等生物过程以及与脑部发育相关的重要通路。选择表达差异明显且与胚胎神经发育相关的基因Avp、Hes3和Wnt1进行实时荧光定量PCR验证,结果发现所验证的基因表达情况与表达谱芯片的结果一致。结论5-FU可能通过影响胚胎神经发育过程中与神经发育相关基因Avp、Hes3及Wnt1等的表达,进而导致NTDs的发生。
- 王秀伟官臻朱智强牛勃王建华
- 关键词：神经管畸形胚胎5-氟尿嘧啶基因芯片
- 抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用
- 本发明涉及抗叶酸药物在制备构建神经管畸形小鼠模型中的应用，具体而言，是采用抗叶酸代谢药物干预孕鼠，造成叶酸代谢障碍，引起鼠胚胎发育异常，从而建立起神经管畸形小鼠模型；本发明所采用的方法操作简单，重复性好，致畸率高，效果稳...
- 张霆谢秋牛勃向前王明生关涛王秀伟官臻王建华王国亮朱智强
- 文献传递
- 超高效液相色谱-串联质谱法测定血清中叶酸代谢物被引量：4
- 2015年
- 建立了超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）定量检测人体内叶酸6种主要代谢产物的方法。采用BEH C18色谱柱（2.1×50 mm,1.7μm）,以甲酸-乙腈为流动相,流速为0.4 m L/min,进样体积5μL,梯度洗脱法进行分离,电喷雾正离子模式下以多反应检测（MRM）方式检测,外标法定量。6种叶酸代谢产物检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为0.05～0.20 ng/m L和0.15～0.50 ng/m L,6种代谢产物（叶酸、5-甲基四氢叶酸（5-Me THF）、5-甲酰四氢叶酸（5-Fo THF）、同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷高半胱氨酸（SAH））分别在一定范围内呈线性相关,相关系数R2≥0.998;在血清样品中加标回收率为90.1%～105.3%,日内和日间RSD均小于6%。
- 丁晓琛王秀伟董艳婷牛玉虎牛勃
- 关键词：液相色谱-串联质谱叶酸
- 叶酸缺乏引起的从头合成代谢紊乱诱导小鼠NTDs的发生及其机制初步探讨
- 官臻王秀伟牛勃
- 甲氨蝶呤对早期神经胚基因表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:利用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)干预孕鼠,探讨MTX对早期神经胚基因表达的影响。方法:用MTX(4.5 mg/kg体重)干预孕鼠,通过NimbleGene表达谱芯片、Real time-PCR及免疫组化等方法进行差异表达基因的筛选和验证。结果:MTX处理后神经管畸形(NTDs)发生率为32.1%。表达谱芯片筛选出166个差异表达基因,其中4个凋亡相关基因(Endog,Trp53,Casp3,Bax)均表现为上调(fold change>1.5,P<0.05),3个增殖相关基因(Ptch1,Pla2g4a,Foxg1)均表现为下调(fold change<0.67,P<0.05);NTDs胚胎神经上皮Caspase-3表达显著升高(P<0.05),phospho-histone H3(pH3)表达显著降低(P<0.05)。结论:MTX影响了早期神经胚的基因表达,尤其是引起了凋亡、增殖相关基因表达的异常,这可能在叶酸缺乏引起NTDs发生的相关机制之一。
- 季成王秀伟王建华官臻朱智强谢秋张霆牛勃
- 关键词：神经管畸形甲氨蝶呤凋亡增殖
