王瑞敏
- 作品数：62 被引量：213H指数：9
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- NMDA受体NR2A亚基在脑缺血后处理中的保护作用被引量：1
- 2013年
- ①目的研究NMDA受体NR2A亚基在脑缺血后处理中的保护作用。②方法采用四动脉阻塞模型((four-vessel occlusion,4-VO)大鼠全脑缺血(global cerebral ischemia,GCI)模型,动物随机分为假手术组(sham),Sh+NVP-A组,缺血再灌注组(I/R),缺血后处理组(Postc,Postc+Veh),NR2A抑制剂组(Postc+NVP),溶剂对照组。采用Western blot法检测大鼠海马CA1区NR2A的表达,采用焦油紫染色观察大鼠海马CA1区神经元的存活情况。③结果焦油紫染色显示:与I/R组相比,Postc组再灌注5d海马CA1区存活的神经元显著增加(P<0.05),而NR2A抑制剂NVPAAM077可显著废除Postc的神经保护作用,海马CA1区存活的神经元显著减少(P<0.05)。与I/R组相同时间点相比,Postc组海马CA1区神经元细胞膜NR2A的蛋白表达于缺血后处理后的3h,6h,24h和72h显著增加,而NR2A抑制剂可显著抑制缺血后处理后24h NR2A的蛋白水平的升高(P<0.05)。④结论 NR2A亚基在脑缺血后处理中具有神经保护作用。
- 张茜涂静宜朱莹唐慧王瑞敏
- 关键词：缺血后处理NMDA受体NR2A
- 人脂肪基质细胞体外分离与培养的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的探讨人脂肪基质细胞体外分离与培养,为其将来应用于组织工程提供基础。方法通过外科手术获得腹部皮下的脂肪组织,进行体外分离培养脂肪基质细胞,并在相差显微镜下每日观察、记录人脂肪基质细胞的生长状况,并用CCK-8测定其生长生活。结果人脂肪基质细胞呈现梭形外观,增殖旺盛,体外容易扩增。结论我们建立了一种自人体脂肪组织分离、培养人脂肪基质细胞简便稳定的方法,为其应用于组织工程提供了基础。
- 叶新春刘斌王瑞敏
- 关键词：人脂肪基质细胞细胞培养
- AcSDKP对矽肺大鼠TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导途径调节与作用被引量：5
- 2014年
- 目的 观察转化生长因子-β （TGF-β）Ⅰ型、Ⅱ型受体、P38丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在矽肺大鼠和肺成纤维细胞的分布与表达,探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸（AcSDKP）对TGF-β受体介导的P38MAPK信号转导通路调节与其抗矽肺纤维化作用的关系.方法 非暴露式支气管内灌注法制作大鼠矽肺模型,分为对照组,矽肺模型组和AcSDKP治疗组（每组10只）.培养新生大鼠肺成纤维细胞,分为对照组、TGF-β1刺激组、受体阻断剂组、P38MAPK特异性抑制剂干预组和AcSDKP干预组.免疫组化法、免疫印迹法（Western-blot）检测TGF-βⅠ型和Ⅱ型受体、P38 MAPK蛋白以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达.用实时定量荧光聚合酶链式反应（real-time PCR）法检测TGF-β Ⅰ型和Ⅱ型受体mRNA的表达.用激光扫描共聚焦显微镜法检测磷酸化P38在肺成纤维细胞内分布与核转位的情况.结果 在动物模型中,AcSDKP治疗组大鼠肺组织内TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是矽肺模型组的86.12％、41.01％和42.63％;AcSDKP治疗组Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达,分别是矽肺模型组的89.05％和52.71％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.在培养的肺成纤维细胞实验中,AcSDKP干预组TGF-β1诱导刺激的TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体mRNA的表达分别是TGF-β1刺激组的42.26％和54.33％;TGF-β Ⅰ型受体、Ⅱ型受体和磷酸化P38 MAPK蛋白的表达分别是TGF-β1刺激组的58.14％、51.40％和45.6％;AcSDKP干预组磷酸化P38MAPK蛋白由胞质向胞核的转位,核浆比值减少,为TGF-[β1刺激组的68.60％;Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达降低,分别是TGF-β刺激组的58.04％和44.74％,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 AcSDKP能够抑制TGF-β受体介导的P38 MAPK信号转导途径,从而抑制胶原蛋白的表达,进而发挥其抗矽肺纤维化的作用.
- 魏中秋孙月程华马文东徐洪李倩张丽娟王瑞敏杨方
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸矽肺受体
- Ac-SDKP对ROCK通路介导矽肺大鼠肌成纤维细胞分化抑制作用被引量：6
- 2013年
- 目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)对Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路介导的肌成纤维细胞分化的抑制作用。方法无特定病原体级建康成年雄性Wistar大鼠120只随机分为对照组(支气管灌注1 ml灭菌生理氯化钠溶液)、矽肺模型组[支气管灌注质量浓度为50 g/L二氧化硅(SiO2)1 ml]、Ac-SDKP前处理组(支气管灌注质量浓度为50 g/L SiO21 ml,灌注前给予Ac-SDKP),分别于染尘后1、2、4、8周处死(每亚组10只)。采用免疫组织化学法检测肺组织内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布与表达,免疫印迹法检测肺组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、ROCK、血清反应因子(SRF)、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果与对照组比较,矽肺模型组大鼠肺组织内TGF-β1、ROCK、SRF、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均增加(P<0.05),并具有一定时间依赖性。与矽肺模型组比较,Ac-SDKP前处理4、8周组,大鼠肺组织内TGF-β1、ROCK、SRF、α-SMA以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均降低(P<0.05)。结论 Ac-SDKP能够通过对TGF-β1介导的ROCK信号转导通路的调控,阻抑矽肺大鼠肌成纤维细胞的分化。
- 李淑钰徐洪孙月袁媛邓海静马文东魏中秋杨奕王瑞敏杨方
- 关键词：N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸矽肺
- 雌激素对慢性低灌注大鼠血脑屏障通透性的影响被引量：2
- 2012年
- 目的检测大鼠永久性双侧颈总动脉结扎（pBCCAO）早期脑组织伊文思蓝（EB）的含量、大鼠海马和脉络丛ZO-1的表达变化，以及17β-雌二醇（E2）对其影响，旨在揭示血管性痴呆（VD）早期血脑屏障通透性的变化，并探索可能的防治措施。方法成年雌性大鼠去双侧卵巢，7d后制备pBCCAO模型，随机分为控制组，pBCCAO后6h、1d．3d、7d实验组，E2处理组和溶剂对照组，采用比色分析法及激光共聚焦显微镜技术检测脑组织EB含量，Western blot技术及共聚焦显微镜技术观察ZO-1蛋白水平。结果大鼠行pBCCAO后1d脑组织EB渗出量较sham组明显升高，于第3天达到高峰，术后7d明显下降，但仍高于sham组；共聚焦结果显示，pBCCAO后3d大鼠海马槽EB红色荧光较sham组和E2组明显增强；Western blot结果显示，pBCCAO后3d大鼠海马中ZO-1较sham组明显降低，但E2处理组与sham组相似，ZO-1水平明显高于溶剂对照组；共聚焦结果显示，pBCCAO后3d脉络丛ZO-1免疫反应较sham组和E2处理组明显降低。结论pBCCAO早期即可造成大鼠血脑屏障损伤，下调ZO-1的表达；E2可有效改善此病理变化。
- 黎洁朱莹杨辉姚雪唐慧张茜张艳淑王瑞敏
- 关键词：血脑屏障伊文思蓝ZO-1
- 人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响被引量：15
- 2010年
- 目的探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型。60只健康雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组(6只),假手术组(6只),缺血对照组(24只)和移植治疗组(24只);后2组又分为再灌注7d、14d、21d、28d组(各6只)。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(细胞浓度为2×106/ml),缺血对照组经尾静脉注射生理盐水,假手术组不做任何处理。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2、Bax表达。结果与缺血对照组比较,移植治疗组各时间点的细胞凋亡数均明显减少(均P<0.01),Bcl-2阳性细胞数明显增高(均P<0.01),Bax阳性细胞数明显减少(P<0.05～0.01)。结论人脂肪组织来源的神经干细胞可能通过上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达,减少局灶性脑缺血细胞凋亡;对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用。
- 刘斌董静李建民刘宁王瑞敏张晋霞李世英陈贵良
- 关键词：脂肪基质细胞神经干细胞脑缺血再灌注细胞凋亡
- 的士宁与MK801共同作用改善大鼠脑缺血再灌注后学习记忆能力缺陷
- 2012年
- ①目的探讨NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂的士宁(strychnine)及其与MK801共同作用在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用。②方法健康成年雄性SD大鼠制作4动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、溶剂对照(Vehicle)组(I/R+Sa-line)、MK801组(I/R+MK801)及strychnine和MK801共同作用组(I/R+Glycine+strychnine+MK801)。观察海马CA1区生存神经元。利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况。③结果与缺血再灌注组相比,strychnine和MK801共同作用组海马CA1区神经元生存数量明显增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善。④结论 NMDA受体甘氨酸位点拮抗剂strychnine和MK801共同作用可有效减轻大鼠缺血再灌注后神经元损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据。
- 朱莹涂静宜张熙周彩凤刘斌王瑞敏
- 关键词：脑缺血再灌注甘氨酸MK801
- 参芎化瘀胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马CA_1区细胞凋亡及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响被引量：17
- 2011年
- 目的:探讨参芎化瘀胶囊对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2),Bax蛋白表达的影响。方法:采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉同时ip硝普钠制备大鼠血管性痴呆模型,应用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学SABC法检测Bcl-2,Bax蛋白表达。结果:①与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区凋亡细胞增多(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区凋亡细胞减少(P<0.01)。②与正常组及假手术组相比,模型组大鼠海马CA1区Bcl-2,Bax阳性细胞均增多(均P<0.01),Bcl-2/Bax降低(P<0.01);与模型组比较,参芎化瘀胶囊治疗组大鼠海马CA1区Bcl-2阳性细胞增多(P<0.01),Bax阳性细胞减少(P<0.01),Bcl-2/Bax增加(P<0.01)。结论:参芎化瘀胶囊可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少细胞凋亡,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。
- 刘斌马原源毛文静李建民张晋霞张爱国王瑞敏
- 关键词：血管性痴呆B细胞淋巴瘤/白血病-2参芎化瘀胶囊
- 人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤被引量：3
- 2011年
- 目的探讨人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的疗效。方法 线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)2 h再灌注模型。体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源的神经干细胞悬液(2×106/mL)。用MNSS量表测定神经功能,TTC、HE染色观察脑梗死体积及脑组织病理变化。结果移植治疗组再灌注14、21和28 d的神经功能评分低于缺血再灌组(P<0.05或P<0.01)。移植治疗组第14天脑梗死体积(40.20±9.52 mm3)小于缺血对照组(66.60±14.24 mm3)(P<0.01)。移植治疗组的神经细胞变性、坏死数量较缺血再灌组明显减少。结论 人脂肪组织来源的神经干细胞移植治疗可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,具有神经保护作用。
- 刘斌董静刘宁王瑞敏张晋霞李世英陈贵良
- 关键词：脂肪基质细胞神经干细胞脑缺血再灌注损伤
- 血小板源性生长因子诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的信号转导途径研究
- 2007年
- ①目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径在血小板源性生长因子(PDGF)刺激大鼠心脏成纤维细胞胶原合成中的作用。②方法分离培养新生大鼠心脏成纤维细胞。免疫细胞化学法、Western blot法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。③结果与对照组相比,在PDGF刺激下,大鼠心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增加,PD98059 25μmol/L预孵育1小时能够抑制PDGF的刺激作用。④结论PDGF能够通过ERK1/2途径调节大鼠心脏成纤维细胞的胶原合成。
- 张丽娟李倩马文东陈萍闫静波王瑞敏杨方
- 关键词：血小板源性生长因子细胞外信号调节激酶1/2心脏成纤维细胞
