王庆
- 作品数：285 被引量：734H指数：15
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、抗体及其应用
- 本发明公开了一种鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白、多克隆抗体及其应用。本发明提供的鲤疱疹病毒3型1301株ORF136基因重组表达蛋白，其全长氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码该蛋白的全长核...
- 王庆郑树城李莹莹曾伟伟王英英刘春任燕石存斌黄琦雯
- 文献传递
- 珠江广州河段微型浮游植物群落结构和水质特征
- 2006～2008年,对珠江广州河段的中山大学码头(S1)和渔珠码头(S2)两个站点的微型浮游植物群落和水质理化因子进行了3周年调查。调查期间共发现浮游植物120种,其中硅藻、绿藻和蓝藻是主要优势类群,占总浮游植物数量的...
- 刘擎杨宇峰王庆
- 关键词：群落结构珠江广州河段
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- II型草鱼呼肠孤病毒冷适应株GCRV-GD108ca及其应用
- 本发明公开了II型草鱼呼肠孤病毒冷适应株GCRV‑GD108ca及其应用，属于鱼类病毒性出血病防治技术领域。本发明冷适应致弱疫苗株GCRV‑GD108ca对草鱼病毒性出血病具有良好的保护效果，可有效抵御同源或异源的II型...
- 赵长臣江小燕陈总会巩华刘春花王庆黄志斌
- 文献传递
- 杂交鱧(乌鳢♂x斑鱧♀)一株弹状病毒病原的分离与鉴定
- 本研究对来自佛山三水的患病杂交鳢分别从细菌学和病毒学两方面进行病原分离和鉴定。排除细菌感染的可能后,本研究通过细胞培养技术、回归感染试验、电镜技术、分子生物学技术等进行病毒学分析,最终分离到一株弹状病毒,命名为HSHRV...
- 曾伟伟王庆王英英谭爱萍刘春石存斌吴淑勤
- 关键词：弹状病毒
- 文献传递
- 编码鳜传染性脾肾坏死病毒结构蛋白新基因ORF90.5L的鉴定分析
- 2010年
- 鳜传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)全基因组序列于2001年完成测定,全基因组为111362bp,含有124个推测的开放阅读框(ORF)。2007年,Eaton等对12株已完成序列测定的虹彩病毒代表株进行分析比较,除了已经推测的ORF外,认为ISKNV基因组中还存在一个的核心基因(Core gene)ORF90.5L。本研究以ISKNV的cDNA为模板,根据Eaton等报道中推测的上下游位点设计引物扩增出一段963bp的PCR产物。该序列编码一个320个氨基酸的蛋白质,推测分子量为35kD,含有预测的跨膜区,与虹彩病毒属(Iridovirus)其他成员编码的肉豆蔻基膜蛋白有较高的同源性。将该片段克隆到原核表达载体pET32a(+)中,纯化表达的重组蛋白pET90.5L免疫昆明鼠获得高效价多克隆抗体。利用抗pET90.5L抗体与纯化病毒进行免疫印迹,结果表明,抗pET90.5L的多抗可以特异性识别病毒粒子中大小约为35kD的蛋白条带,ORF90.5L编码的蛋白应为病毒的结构蛋白。本研究旨在为ISKNV基因工程疫苗的研发和病源侵染机制研究提供基础参考。
- 王庆罗永文刘春曾伟伟张超石存斌吴淑勤
- 关键词：核心基因病毒结构蛋白
- 草鱼呼肠孤病毒三重PCR检测方法的建立及其应用被引量：26
- 2013年
- 针对草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)各类型毒株的保守区域分别设计3对引物,优化反应条件和体系,建立了草鱼呼肠孤病毒三重RT-PCR检测方法,通过PCR扩增分别获得大小约为530 bp、297 bp和196 bp的DNA片段。进一步分析表明,该检测方法具有良好的敏感性、特异性和稳定性,可以检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型核酸最低量分别约为260、190与230拷贝的病毒量,且某一类型的引物只能检测到同一类型的GCRV。用建立的多重RT-PCR方法对2008—2011年采集自江西、广东、湖北、浙江、重庆、四川、福建等地的草鱼(Ctenopharyngodonidellus)主养区的86份草鱼出血病样品进行检测和初步流行病学分析。结果表明,Ⅰ型阳性率为9.3%,Ⅱ型阳性率为45.3%,Ⅲ型阳性率为2.3%,Ⅰ型和Ⅱ型混合感染阳性率为5.8%,Ⅱ和Ⅲ型混合感染阳性率为2.3%,其他类型的混合感染未检测到。表明目前主要流行的草鱼呼肠孤病毒为Ⅱ型。本研究建立的GCRV三重PCR检测方法可以特异性的检测各种类型的草鱼呼肠孤病毒,且具有较高的敏感性;利用该方法进行草鱼出血病初步的流行病学分析表明,目前主要流行的草鱼呼肠孤病毒为Ⅱ型,不同毒株类型混合感染的现象也普遍存在。本方法的建立旨在对草鱼出血病的快速诊断和分子流行病学调查提供实用的可操作手段。
- 曾伟伟王庆王英英张乐生刘宝芹石存斌吴淑勤
- 关键词：草鱼呼肠孤病毒草鱼出血病三重PCR基因型流行病学调查
- 一种融合表达GCRV VP6和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用
- 本发明属于基因工程及分子免疫学技术领域，具体涉及一种融合表达GCRV VP6和LTB的重组乳酸菌及其制备方法与应用。本发明提供了一种融合蛋白，包含GCRV VP6蛋白和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位蛋白；通过大肠杆菌不耐热...
- 尹纪元王庆张德锋吴辉亮姜鹏王英英李莹莹任燕石存斌潘厚军莫绪兵
- 鱼致病性舒伯特气单胞菌双重PCR检测方法的建立被引量：8
- 2014年
- 为快速准确鉴别检测鳢源致病性舒伯特气单胞菌(A.schubertii),本实验根据该菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB)、溶血素基因(hlyA)的保守序列设计引物,建立了检测致病性A.schubertii的双重PCR方法。结果显示gyrB和hlyA基因扩增产物分别为601 bp和375 bp;其最低检出菌体DNA量为2.3×10-2ng,最低检出菌数为3×102cfu。特异性试验结果显示,该方法对温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、无乳链球菌、诺卡氏菌、迟缓爱德华氏菌、荧光假单胞菌、柱状黄杆菌、哈氏弧菌以及类志贺邻单胞菌扩增结果均为阴性。应用该方法对37份临床病料样品的检测结果与传统细菌分离鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于A.schubertii的快速检测和流行病学研究。
- 刘春李凯彬王庆王芳曾伟伟石存斌吴淑勤
- 关键词：双重PCR
- 一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法及其试剂盒
- 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法，该方法可以实现在一个待测样本中同时检测草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的存在，并能对两种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型...
- 曾伟伟王庆吴淑勤王英英刘春梁红茹石存斌李莹莹
- 文献传递
- 一种乌斑鳢肾细胞系及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种乌斑鳢肾细胞系，其分类命名为乌斑鳢肾细胞系CAMK，于2019年5月8日保存在中国典型培养物保藏中心，保藏登记编号为CCTCC NO:C201994，上述乌斑鳢肾细胞系的构建方法为：取乌斑鳢消毒后取肾，于...
- 王英英王庆曾伟伟李莹莹尹纪元刘春常藕琴石存斌
- 文献传递
