汤斌
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 转反义sGnRH基因败育鲤鱼的性成熟诱导被引量:3
- 2005年
- 采用反义转基因技术已成功获得整合CAsGnRHpc-antisense基因的转基因鲤鱼,简称AS-sGnRH F0鲤鱼。通过挤压1年龄AS-sGnRH F0鲤鱼的腹部,发现该群体中有精液/无精液个体比例为33/69,与对照组鲤鱼中有精液/无精液个体比例接近1:1相比存在显著差异。通过注射鲤鱼垂体抽提物诱导无精液AS-sGnRH F0鲤鱼恢复繁殖功能,获得3尾育性被恢复的AS-sGnRH F0鲤鱼。进一步的解剖观察发现,在无精液AS-sGnRH F0鲤鱼群体中,完全无性腺的AS-sGnRH F0鲤鱼比例约31.3%。根据直观的挤精液和解剖学观察,推测在AS-sGnRH F0鲤鱼群体中,雄鱼:雌鱼:“脂肪型”性腺个体的比例大约为35:45:20%。受精卵发育12 h后,统计A、B、C系AS-sGnRH F0鲤鱼精子的受精率分别为73.94、59.45和64.05%。从A、B、C系杂交后代F1分别随机取样100尾,PCR检测的阳性率分别为0、78.1和87.8%。研究结果表明通过补充外源激素可以使促性腺激素分泌不足而不育的AS-sGnRH F0鲤鱼恢复具有产生成熟配子的能力。
- 黎双飞胡炜汤斌汪亚平朱作言
- 关键词:反义RNA鲤鱼性腺发育
- 鲤鱼(Cyprinus Carpio)促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备被引量:4
- 2006年
- 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtHβ亚基的cDNA,克隆在pMD18-T载体。经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET-32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IFFG诱导融合蛋白的高效表达。利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Westem-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白。该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单市降抗体奠定了基础。
- 王蕴胡炜汤斌戴军汪亚平朱作言
- 关键词:鲤鱼促性腺激素原核表达多克隆抗体
- 一种雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法
- 本发明公开了一种将雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法,其步骤:A、挤压10-11月龄鲤鱼腹部,将精液流出的雄性鲤鱼与没有精液流出的鲤鱼分开;B、将铜质挖卵器插入不能挤出精液的鲤鱼生殖孔,挑选可以得到卵粒的鲤鱼养殖在水泥池...
- 胡炜汤斌汪亚平朱作言
- 文献传递
- 一种雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法
- 本发明公开了一种将雌性鲤鱼性逆转为雄性鲤鱼的培育方法,其步骤:A、挤压10-11月龄鲤鱼腹部,将精液流出的雄性鲤鱼与没有精液流出的鲤鱼分开;B、将铜质挖卵器插入不能挤出精液的鲤鱼生殖孔,挑选可以得到卵粒的鲤鱼养殖在水泥池...
- 胡炜汤斌汪亚平朱作言