李洪敏 作品数:221 被引量:788 H指数:14 供职机构: 解放军第309医院 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家自然科学基金 首都医学发展科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 机械工程 生物学 理学 更多>>
结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒及其制备方法 本发明涉及一种结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒及其制备方法,根据不同分枝杆菌属和结核分枝杆菌复合群16S核糖体核糖核酸(简称rRNA)而设计、合成相应的寡核苷酸探针,通过点样法将寡核苷酸探针按一定的顺序点在经预处理的硝酸纤... 吴国琼 梁建琴 张俊仙 李洪敏文献传递 狼毒大戟中不同组分和成分抗结核杆菌作用的研究 被引量:22 2007年 目的:观察狼毒大戟根中的不同提取物组分和不同化学成分对耐药型和非耐药型强毒人型结核杆菌的体外抑菌效果。方法:采用不同极性的溶剂对狼毒大戟根进行提取,得到6个提取组分,对其中的醋酸乙酯部分进行了柱层析和制备性高效液相层析分离,分离鉴定出狼毒乙素、狼毒乙素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚、没食子酸等4个单体成分。采用改良7H10琼脂培养基动态观察6个组分和4个单体成分对耐药型和非耐药型结核杆菌的抑制作用。结果:4种单体成分对耐药型和非耐药型结核杆菌均有显著的抑制作用。其中,狼毒乙素的作用最显著;6个提取组分中。乙醚、醋酸乙酯提取物时非耐药型和耐药型结核杆菌亦有不同程度的抑制作用,醋酸乙酯提取物作用最强。结论:狼毒大戟根中存在着抗结核杆菌特别是抗耐药型结核杆菌的活性部位及有效成分。 赵奎君 刘锁兰 李洪敏关键词:狼毒大戟 抗结核作用 提取物 活性成分 建立长期保存结核分支杆菌的方法 <正> 结核分支杆菌的生存主要依靠培养基的各种营养物质,培养基质量的优劣直接关系到细菌寿命的长短、生长的状况和是否产生变异。多次转种不同质量的培养基,也可使细菌产生变异。因此,寻找结核分支杆菌长期保存方法是十分重要的课题... 李洪敏 徐明 王涛 安慧茹 刘真 赵玉梅文献传递 小鼠肺、肝、脾组织病理学变化对结核DNA疫苗保护作用的评价 2003年 目的:评价结核分支杆菌MPT64、ESAT6 DNA疫苗的保护效力和细胞因子的增强作用.…… 徐燕杰 吴雪琼 韩永 郑越 张俊仙 张灵霞 史迎昌 李洪敏 曹立雪 李忠明矽肺结核病耐喹诺酮(gyrA)基因情况分析 被引量:4 2006年 目的研究矽肺结核耐喹诺酮药敏试验与gyrA基因突变的关系。方法通过药敏试验和聚合酶链反应—单链构象多态性(PCR-SSCP)技术鉴定31株分枝杆菌临床分离株的菌种,分析gyrA基因突变的情况。结果30株临床分离株的16SrDNASSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同。16株耐喹诺酮类药临床分离株中,11株异常,占68.75%。结论gyrA基因突变与结核分枝杆菌对喹诺酮类药物耐药有关,且gyrA基因突变在药敏实验高、低浓度区均可发生。 李洪敏 姜平 王巍 王国洋 吴雪琼 冯柏 安慧茹关键词:结核菌 喹诺酮 PCR-SSCP GYRA基因 三种结核分枝杆菌重组蛋白抗原血清学诊断价值的研究 被引量:4 2012年 目的研究重组ESTA6(rESTA6)、CFP10(rCFP10)、CFP10-ESTA6(rCFP10-ESTA6)三种结核分枝杆菌重组抗原在结核病血清学诊断中的应用价值。方法检测230例肺结核、70例非结核疾病及200例健康血清标本中抗结核抗体,应用SPSS18.0对检测结果进行方差分析。结果方差分析表明,rCFP10、rESAT6、rCFP10-ESAT6三种抗原对肺结核、非结核疾病及健康人血清标本的检测结果有统计学意义(P<0.05),三种抗原检测肺结核病患者血清标本的敏感性分别为31.3%、25.2%、34.8%,特异性分别为94.8%、97.8%、95.6%。rCFP10和rESAT6联合检测敏感性及特异性分别为40.0%和93.0%;rCFP10和rESAT6联合检测的92例阳性标本中,有23例rCFP10-ESAT6检测呈阴性;rCFP10-ESAT6检测的80例阳性标本中,有26例rCFP10和rESAT6联合检测呈阴性。结论 rCFP10-ESTA6的结构与rCFP10和rESTA6的单体的结构可能不完全相同,rCFP10-ESTA6抗原不能完全代替rESTA6、rCFP10两种抗原进行结核病的血清学实验室诊断。 阳幼荣 吴雪琼 赵卫国 张俊仙 梁艳 张翠英 李洪敏 王兰关键词:抗原 血清学试验 分枝杆菌 结核 应用左旋氧氟沙星介入凝胶进行药效及安全性分析 2007年 目的分析左旋氧氟沙星凝胶联合体的体外抗结核作用和介入治疗的安全性分析。方法利用最小抑菌(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)法测定左旋氧氟沙星单体与左旋氧氟沙星药物凝胶的抗结核效果,同时,用家兔经支气管介入注药的试验。结果左旋氧氟沙星凝胶对H37,Rv标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌MIC值分别为0.5、0.5和1.0mg/L,MBC值分别为1.0、1.0和1.5mg/L;左旋氧佛沙星凝胶与左旋氧氟沙星单体MIC、MBC值无显著差异;家兔动物实验表明该药无任何副作用。结论左旋氧氟沙星凝胶具有与左旋氧氟沙星单体相同的抗结核菌药效,介入用药以1.0-1.5mg/L为宜。 李洪敏 王巍 冯端浩 陈宏兵 张涛 樊博关键词:左旋氧氟沙星 抗结核药 最小抑菌浓度 耐多药结核分支杆菌突变基因检测 2001年 目的研究耐多药结核分支杆菌耐药分子机制 ,建立快速检测耐药基因型的分子药敏试验方法。方法通过 16SrRNA聚合酶链反应 单链构象多态性 (polymerasechainreaction singlestrandconformationpolymorphism ,PCR SSCP)方法对 30株耐多药分离株和 2 0株药物敏感株进行初步分子菌种鉴定 ;通过PCR SSCP分析 30株耐多药结核病临床分离株的rpoB、katG、rpsL基因。 结果经 16SrRNAPCR SSCP菌种鉴定 ,所分析菌株均为结核分支杆菌 ;30株耐多药分离株经SSCP分析 ,5 6 .7%存在rpoB基因突变 ,43 .3 %有katG基因突变 ,91.3 %有rpsL基因突变。 结论rpoB、rpsL、katG基因突变分别是结核分支杆菌耐利福平、链霉素、异烟肼的分子机制 ,耐多药结核病是药物靶基因突变所致。通过PCR SSCP可简便。 梁建琴 李洪敏 张广宇 吴雪琼 王淑华 张俊仙关键词:耐多药结核分支杆菌 突变基因 聚合酶链反应 分枝杆菌菌种鉴定DNA微阵列的初步研究与应用 被引量:4 2004年 目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列。方法根据19种分枝杆菌标准株的16SRNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物。结果该DNA微阵列与9种非分枝杆菌标准株不杂交,具有分枝杆菌特异性;可将19种分枝杆菌标准株鉴定到群或种,具有较高的分枝杆菌种特异性。应用PCR-SSCP分枝杆菌初步菌种鉴定方法对31株分枝杆菌临床分离株进行初步的鉴定,9株为结核分枝杆菌复合群和22株为非结核分枝杆菌。应用DNA微阵列进一步进行菌种鉴定,9株与探针a杂交阳性,为结核分枝杆菌复合群;2株与探针c杂交阳性,为胞内分枝杆菌;8株与探针d杂交阳性,为堪萨斯分枝杆菌或瘰疬分枝杆菌或猿猴分枝杆菌或胃分枝杆菌;1株与探针k杂交阳性,为戈登分枝杆菌;2株与探针p杂交阳性,为龟分枝杆菌脓肿亚种;2株与探针r杂交阳性,为偶然分枝杆菌;1株与探针s杂交阳性,为草分枝杆菌;2株与探针a和p杂交阳性,为结核分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种复合感染株;1株与探针a和r杂交阳性,为结核分枝杆菌和偶然分枝杆菌复合感染株;3株与该芯片杂交阴性。2株临床分离株经基因测序也证实DNA微阵列鉴定的特异性。结论该DNA微阵列有可能简便、快速。 吴雪琼 张俊仙 张琼 庞劲松 梁建琴 张亮 李洪敏 陆阳 雷红 张广宇关键词:DNA微阵列 菌种鉴定 分枝杆菌 聚合酶链反应 总结本地区7个月甲型H1N1流感病毒传播的特点 2010年 目的检测7个月疑是甲型H1N1流感病毒特异片断,分析本地区H1N1流感病毒的流行病学特点。方法采用实时荧光定量(Real Time RT-PCR)法,对2039例可疑病例的咽拭子、鼻拭子进行检测。结果检测出甲流患者791例,检出率为38.79%(791/2039);甲流H1N1157例,检出率为7.7%(157/2039),各月检出率均有不同。结论本地区甲型流感是在8月开始多发,以普通甲流感染为主,甲型H1N1流感混在其中,本地区的传播高峰是在10月。 李洪敏 陈红兵 郭青云 杨楠 张海荣 孔祥瑞 刘银萍 张霞 杨栗坤关键词:流行病学 甲型H1N1 实时荧光定量PCR