曾沃坦
- 作品数：6 被引量：21H指数：4
- 供职机构：中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 黑曲霉Aspergillus niger S菌株所产β-葡糖苷酶的纯化和酶学性质被引量：6
- 2009年
- 利用黑曲霉Aspergillus niger S菌株,通过液体发酵的方法,得到了一种可同时高效水解大豆异黄酮糖苷成大豆异黄酮,水解白藜芦醇苷成白藜芦醇的糖基水解酶.该酶经硫酸铵分级沉淀、离子交换层析及分子排阻色谱纯化得单一条带,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的表观分子量约为165ku①,比通常所报道的传统β-葡糖苷酶都大,该酶的最适反应温度为50℃;最适pH值为5～10.
- 王云曾沃坦
- 关键词：大豆异黄酮葡糖苷酶纯化
- 中国人睑裂狭小综合征Ⅰ型患者大家系FOXL2基因突变检测被引量：1
- 2008年
- 目的研究分析中国人睑裂狭小综合征(BPES)Ⅰ型患者的一个大家系共4代19例的FOXL2基因突变,以明确突变位点及突变类型,确定临床表型与基因型之间的对应关系。方法采集一个中国人BPESⅠ型大家系19例样本外周静脉血EDTA抗凝血样5ml,提取基因组DNA,共设计7对引物,应用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序技术对FOXL2基因的外显子和启动子区进行突变筛查。结果该家系中8例患者均检测到FOXL2基因突变,为1002C>G无义突变,11例家系健康人中均无此突变。结论首次在中国人BPESⅠ型大家系患者中发现FOXL2基因1002C>G无义突变,提示该突变可能是BPES综合征Ⅰ型的致病机制之一。
- 曾沃坦梁辰陈小军穆伟华王晓红李冬梅
- 关键词：睑裂狭小综合征突变
- PIK3IP1与其新剪切体PIK3IP1-v1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡被引量：2
- 2008年
- 目的:发现和克隆人类基因PIK3IP1的新变异体并鉴定其功能,研究其对细胞活力的影响和亚细胞定位,分析PIK3IP1在细胞系中的表达情况。方法:利用GenBank中的数据,从人的混合组织cDNA中通过PCR克隆PIK3IP1和它的新剪切体PIK3IP1-v1,运用生物信息学分析其结构特性。经萤光素酶活性检测、细胞形态观察和流式细胞检测研究PIK3IP1和PIK3IP1-v1对细胞存活力的影响,使用荧光显微镜观察其亚细胞定位。最后通过RT-PCR分析PIK3IP1在细胞系中的表达情况。结果:获得PIK3IP1和新剪切体PIK3IP1-v1的真核表达质粒和融合绿色荧光蛋白表达质粒。生物信息学分析显示,PIK3IP1和PIK3IP1-v1均有信号肽并包含跨膜结构域,但后者胞外缺失一个Kringle结构域。功能分析发现,PIK3IP1和PIK3IP1-v1均可诱导细胞凋亡。荧光显微观察证实,PIK3IP1的两种剪切体均定位于细胞膜。RT-PCR证明PIK3IP1在多种细胞中转录水平较低。结论:新剪切体PIK3IP1-v1和PIK3IP1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡,而且在多种细胞中低水平转录。
- 高鹏曾沃坦邓唯唯李娜石太平马大龙
- 关键词：1-磷脂酰肌醇3-激酶膜蛋白质类细胞凋亡
- 黑曲霉Aspergillus niger H菌株所产酸性蛋白酶的质谱法鉴定及酶学特性被引量：4
- 2008年
- 采用质谱指纹（MS mapping）分析方法,直接对黑曲霉Aspergillus niger H菌株发酵液中所产蛋白进行鉴定,通过与质谱数据库比对分析,确定此蛋白为曲霉酸性蛋白酶Aspergillopepsin I（EC.3.4.23.18）。对其酶学性质的研究表明,此蛋白酶分子量约为47kDa,最适温度为50℃,温度稳定性范围为30-50℃,最适pH为3.0,pH稳定性为2-5,其表征与其它已报道的曲霉酸性蛋白酶基本一致,证实此质谱指纹分析方法可快速有效地鉴定混合发酵液中的未知蛋白,并省去中间繁琐的分离纯化步骤。
- 王云曾沃坦钱世凯
- 关键词：黑曲霉酸性蛋白酶酶学特性
- 重组人瘦素融合蛋白在大肠杆菌中的低温自诱导表达、纯化和活性鉴定被引量：4
- 2008年
- 目的:建立低温自诱导表达重组人瘦素(leptin)融合蛋白的系统方法,经体外纯化获得大量具有生物活性的瘦素蛋白。方法:从cDNA文库中扩增瘦素编码区,克隆到pGEM-Teasy载体,测序正确后亚克隆到A1.3表达载体,转入BL21(DE3),低温自诱导表达。用SDS-PAGE及Western印迹分析鉴定表达产物。对低温自诱导表达产物rMBP-10His-Leptin进行纯化和酶切,获得可与瘦素单抗发生特异性反应的瘦素蛋白。用Km小鼠减肥实验检验其生物学活性。结果:在22×103处有明显的新增蛋白带,含量超过总蛋白的40%,Western印迹证实为瘦素蛋白。Km小鼠减肥实验证实其具有生物学活性。结论:成功建立了低温诱导表达rMBP-10His-Leptin的系统方法,获得大量瘦素蛋白,经验证表达产物具有免疫活性和生物学活性,可供进一步基础及临床研究应用。
- 曾沃坦单永强王晓霞黄炜陈小军周骋
- 关键词：瘦素重组融合蛋白质类大肠杆菌免疫活性蛋白纯化
- 抗抑郁药的药理研究进展被引量：4
- 2003年
- 曾沃坦
- 关键词：抗抑郁药药理学脑内神经递质5-HT去甲肾上腺素能
