方喜平
- 作品数:9 被引量:18H指数:2
- 供职机构:武汉大学中南医院更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金武汉市科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子抑制肝癌细胞株HepG2体外侵袭转移被引量:2
- 2011年
- 目的观察特异结合唾液酸化LewisX(SLeX)抗原DNA适配子抑制HepG2细胞与E一选择素黏附能力及其体外抑制HepG2细胞浸润转移能力。方法采用黏附实验、Transwell体外侵袭实验,检测该适配子对HepG2细胞与E选择素黏附及对HepG2细胞体外侵袭的影响。结果该DNA适配子可有效抑制HepG2细胞与E-选择素黏附,黏附细胞数随适配子浓度的增加而减少(P〈0.01),20nmol浓度的适配子与单克隆抗体CSLEX-1效果相似;Transwell侵袭实验中,5、10、20nmo]适配子组的侵袭细胞数分别为159.00±3.27、142.00±5.50、115.00±5.07,与对照组(178.00±4.64)比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论特异结合唾液酸化LewisX抗原DNA适配子町以抑制HepG2细胞与E-选择素黏附,阻断Lewis-selectin途径,抑制HepG2细胞体外侵袭转移。
- 彭艳谢伟汪付兵阳芳柳琨方喜平段丽吴红艳冯茂辉
- 食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白表达及其意义被引量:2
- 2010年
- 目的 观察食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白(HSP)27和HSP72的表达,探讨其与临床病理生理特征的关系.方法 采用流式细胞术检测45例食管癌患者外周血淋巴细胞HSP27和HSFP72的表达水平,并以43例健康受试者作为对照.结果 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72的表达量分别为17.32±2.97和19.46±5.91,均低于对照组(P<0.05),两者表达量呈正相关(P<0.01),食管癌外周血淋巴细胞HSP27的表达量与临床病理生理特征无明显相关(P>0.05),而HSP72的表达量与食管癌原发肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05).结论 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72表达下调,HSP72与食管癌的发生发展及淋巴结转移相关.
- 陈家宽吴洲清彭艳方喜平谢伟冯茂辉张京伟李春光
- 关键词:食管癌HSP27外周血淋巴细胞
- 腺瘤性结肠息肉病基因D1822V单核苷酸多态性与结直肠癌风险的关系
- 2013年
- 目的 探讨腺瘤性结肠息肉病(APC)基因D1822V单核苷酸多态性与结肠癌风险的关系.方法 以“APC基因”、“多态性”、“结直肠癌”、“D1822V”、“Asp1822Val”、“APC”、“polymorphism”、“D1822V”、“Asp1822Val”、“colorectal cancer”、“colorectal carcinoma”为主题词联合检索中国期刊全文数据库、重庆维普数据库、Medline、Pubmed等数据库.对所获得文献,按纳入、排除标准进行筛选,并对最终所获文献进行异质性和敏感性分析,并以比值比(OR)值为合并效应指标,利用软件进行综合Meta分析.结果 共纳入9篇文献,累计病例数8143例,对照数8776例.当Picelli的这项研究以普通人群为对照时,DV基因型和VV基因型同DD基因型比较,OR值及其95%可信区间分别为0.97(0.91 ~1.03),0.89(0.77~ 1.03);当以超级对照组为对照,其相应的值为0.96(0.90 ~ 1.03)、0.84(0.72 ~0.98).结论 APC基因D1822V单核苷酸多态性,其VV基因型可能降低结直肠癌的风险.
- 方喜平冯茂辉谢伟陈双倩王国洲阳芳柳琨杨倩陈大平
- 关键词:单核苷酸多态性结直肠癌META分析
- 人白细胞介素-15与18的协同刺激体外活化肿瘤浸润淋巴细胞的作用被引量:2
- 2010年
- 目的 观察白细胞介素(IL)-15与IL-18协同刺激活化肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的作用.方法 用IL-15与IL-18共同刺激从结肠癌患者分离得到的肿瘤浸润淋巴细胞,通过测定其分泌转化生长因子(TGF)-β、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平以及肿瘤浸润淋巴细胞的杀伤功能,观察IL-15与IL-18活化肿瘤浸润的淋巴细胞的功能.结果 IL-15与IL-18共同作用于肿瘤浸润淋巴细胞,能够抑制TGF-β、IL-4的分泌(P<0.05),促进IFN-γ的分泌(P<0.05),同时能提高肿瘤浸润淋巴细胞的杀伤活性.结论 IL-15与IL-18协同刺激能活化肿瘤浸润淋巴细胞.
- 陈志芬邓长生汪付兵彭艳方喜平冯茂辉谢伟陈家宽
- 关键词:IL-15IL-18肿瘤淋巴细胞
- 人白细胞介素-15与18协同增强肿瘤浸润淋巴细胞体内对结肠癌细胞的杀伤功能被引量:2
- 2010年
- 目的 观察白细胞介素(IL)-15与IL-18体内增强肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤功能的效果.方法 用IL-15与IL-18共同刺激从结肠癌患者分离得到的TIL,通过测定其分泌转化生长因子(TGF)-β、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平以及TIL的杀伤活性.用IL-15与IL-18共同刺激的TIL与结肠癌细胞SW480共孵育后,接种到SCID鼠皮下,测定肿瘤生长的大小、肝脏转移的肿瘤结节多少、血清中IL-4、IFN-γ水平以及腹腔巨噬细胞的吞噬能力.结果 IL-15与IL-18共同作用于TIL,能够抑制TGF-β、IL-4的分泌(P<0.05),促进IFN-γ的分泌(P<0.05).IL-15与IL-18共同作用于TIL后,能明显提高TIL对结肠癌细胞SW480的杀伤活性(P<0.05).肝脏转移的肿瘤结节明显减少,血清中IFN-γ水平明显升高,腹腔巨噬细胞的吞噬能力增强.结论 IL-15与IL-18协同刺激体内能增强TIL对结肠癌细胞的杀伤功能.
- 陈志芬邓长生冯茂辉彭艳方喜平汪付兵谢伟李春光
- 关键词:结肠癌IL-15IL-18淋巴细胞
- 突变型p53蛋白DNA适配子的体外筛选与鉴定被引量:7
- 2011年
- 目的 建立体外获得突变型p53蛋白DNA适配子(aptamers)的方法,为该适配子在肿瘤早期诊断及靶向治疗运用中奠定基础.方法 构建长度为75 nt的初始随机单链DNA库,其两端为固定序列,中间为35个随机序列,库容量为1 × 1017~1×1018,以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质,运用指数富集的配体系统进化技术(SELEX技术)经逐轮筛选获得突变型p53蛋白的DNA适配子.将适配子库克隆、测序,采用DNAMAN软件对其结构进行分析,通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与突变型p53蛋白的亲和力.结果 经逐轮筛选,所得适配子富集库与突变型p53蛋白的亲和力逐步提高,A450值从0.1357增加到了0.6818,其亲和力至第8轮筛选达最高水平后进入平台期.克隆第8轮筛选适配子库,测定23个克隆子的序列,其中20个克隆子的序列与预期相符.DNAMAN5.29软件分析表明,20个克隆子的一级序列同源率为76.51%,无共同保守序列,适配子的二级结构则以茎环、凸环结构为主.结论 经8轮筛选获得的DNA适配子与突变型p53蛋白的体外结合具有高度的特异性及亲和力,其克隆子无共同保守序列,适配子的高亲和性与其形成的茎环、凸环等空间结构密切相关.
- 段丽冯茂辉阳芳谢伟彭艳吴红艳柳琨方喜平汪付兵
- 关键词:适配子P53蛋白SELEX技术
- 流式细胞术检测甲状腺癌患者外周血T细胞亚群及其与临床病理的关系被引量:2
- 2010年
- 目的 探讨应用流式细胞术检测甲状腺癌患者细胞免疫功能的方法及其与临床病理的关系.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定25例甲状腺癌患者及10例甲状腺良性肿瘤对照者外周血T细胞亚群CD4+CD25+Treg/CD4+Treg比值.结果 甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+/CD4+(%)为72.62±3.16,良性肿瘤对照组为43.36±3.04,差异有统计学意义(P<0.01),甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+/CD8+为0.70±0.08,良性肿瘤对照组为0.43±0.05,甲状腺癌中的升高更明显(P<0.05).甲状腺癌外周血中的CD4+CD25+Treg细胞所占比值与甲状腺癌患者的年龄、性别、肿瘤的位置、大小、病理类型、临床分期无明显相关(P>0.05).结论 甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg增多.CD4+CD25+Treg与CD4+T细胞的比例亦升高.甲状腺癌患者外周血中CD4+CD25+Treg在甲状腺癌的早期即已经升高.
- 阮鹏林从尧方喜平彭艳谢伟冯茂辉
- 关键词:甲状腺癌流式细胞术免疫抑制
- 唾液酸化Lewis X抗原DNA适配子体外抑制乳腺癌细胞侵袭转移被引量:3
- 2013年
- 目的 观察特异结合唾液酸化Lewis X抗原(SLeX) DNA适配子抑制MDA-MB-231细胞与E-选择素黏附能力及其体外抑制MDA-MB-231细胞浸润转移能力.方法 采用体外细胞黏附实验、Transwell小室侵袭实验,检测E-选择素及唾液酸化Lewis X的DNA适配子对肿瘤细胞黏附力、侵袭力的影响.结果 该DNA适配子可以有效的抑制MDA-MB-231细胞与E-选择素黏附,对E-选择素处理过的MDA-MB-231,随着适配子浓度的增加,其抑制细胞黏附的作用越强,抑制率(%)分别为15.54 ±6.10、39.69±5.69、62.15±5.44;适配子组(200 μmol/L)吸光度(A)值与SLeX抗体(1∶100)组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明其抑制黏附作用较抗体强.E-选择素预先处理过的Transwell侵袭实验中,各适配子组(50、100、200 μmol/L)穿膜细胞数分别为(199.3±3.2)、(178.7±3.5)、(168.3±4.2)个(F=88.6,P<0.05);两两比较差异有统计学意义(P<0.05),说明随着SLeX适配子浓度的增高,抑制细胞侵袭的作用越强,抑制率依次为(25.13±5.05)%、(57.59±5.52)%、(73.83 ±6.54)%;适配子组(200 μmol/L)较SLeX抗体(1∶ 100)组穿膜细胞数少(P<0.05),说明适配子比抗体抑制侵袭作用强.结论 特异结合SLeX DNA适配子可以抑制MDA-MB-231细胞与E-选择素黏附,阻断Lewis-selectin途径,抑制MDA-MB-231细胞体外侵袭转移.
- 阳芳冯茂辉谢伟陈双倩王国洲陈大平杨倩方喜平柳琨
- 关键词:唾液酸化LEWISX抗原乳腺癌
- Fas相关磷酸酯酶在食管癌中的表达及其临床意义被引量:1
- 2010年
- 目的 观察食管癌患者癌组织中Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)的表达,探讨FAP-1表达在肿瘤发生发展中的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测65例食管癌及16例食管良性病变标本中FAP-1蛋白的表达水平,12例正常食管组织为对照组.结果 FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色.FAP-1蛋白在正常食管组织中未见表达,良性病变中的表达率为12.5%,而在恶性肿瘤中的阳性表达率为76.9%,与前两者比较差异有统计学意义(P<0.01).FAP-1的表达与肿瘤的分化程度和转移呈显著相关(P<0.05),与年龄和肿瘤大小无明显相关(P>0.05).结论 FAP-1在食管癌组织中阳性表达率高达76.9%,在临床有转移、分期晚和病理分级低的组织中表达增高,可能与食管癌的发生发展相关.
- 吴洲清陈家宽方喜平彭艳谢伟冯茂辉张京伟李春光
- 关键词:食管肿瘤FAS相关磷酸酯酶-1免疫组织化学