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徐茜: 作品数：29 被引量：232H指数：8; 供职机构：天津医科大学总医院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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杂交捕获二代法检测高危型人乳头瘤病毒DNA的意义被引量：15: 2006年; 目的探索杂交捕获二代（HC-Ⅱ）法检测高危型人乳头瘤病毒（HPV）DNA的意义．方法2003年3—6月在武汉同济医院妇产科采用HC-Ⅱ法检测150例门诊忠者的高危型HPVDNA，以阴道镜辅助活检为金标准，比较该方法的特异性、敏感性、准确性、约登指数及Kappa值。结果高危型HPV阳性率为14．67％，HC—Ⅱ法检测高危型HPVDNA的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数及Kappa值依次为：88．89％，91．78％，91．21％，72．73％，97．10％，0．8067，0．7444。假阳性率为6．59％，假阴性率为2．19％。结论HC-Ⅱ法检测高危型HPVDNA阴性预测值高，与金标准有较好的符合率，诊断价值高，为一种很好的早期筛查方法。; 邬素芳易诚青徐茜王薇辜海念卢运萍马丁; 关键词：宫颈肿瘤人乳头瘤病毒

紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及对survivin基因表达的影响被引量：6: 2005年; 目的 :观察紫杉醇对人卵巢癌细胞系A2 780凋亡的作用 ,探讨其对卵巢癌细胞survivin基因表达的影响。方法 :应用MTT、流式细胞仪等方法研究紫杉醇对卵巢癌细胞系A2 780凋亡的诱导作用 ,运用RT- PCR分析紫杉醇对卵巢癌细胞survivin表达的影响。结果 :紫杉醇可诱导卵巢癌细胞系A2 780凋亡 ,不同浓度的紫杉醇引起的凋亡率不同 ,在紫杉醇浓度≥ 10 - 7mol.L- 1时 ,凋亡率显著升高。经紫杉醇作用后的卵巢癌细胞表达sur vivin较用药前明显下降。结论 :紫杉醇可能通过抑制survivin的表达 ,促进肿瘤细胞凋亡。; 马湘一何福仙陈刚徐茜刘玉兰邬素芳李辅军卢运萍马丁; 关键词：紫杉醇卵巢肿瘤 SURVIVIN 细胞凋亡

宫颈癌细胞株和宫颈上皮组织中Pin1和Cyclin D1的表达及临床意义被引量：25: 2006年; 背景与目的:肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强CyclinD1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、CyclinD1的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR、Westernblot法检测HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞中Pin1和CyclinD1基因蛋白表达,免疫组化法检测10例正常宫颈、21例宫颈上皮内瘤样病变、57例浸润癌组织中Pin1和CyclinD1的表达状况,评价其临床意义。结果:HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞存在不同程度Pin1mRNA及蛋白过表达(P<0.05)。正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变、浸润癌组织中Pin1蛋白表达逐渐增强,分别为0%、47.62%、64.91%(P<0.05)。Pin1蛋白过表达与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴结转移无关(P>0.05);但宫颈腺癌组织中Pin1表达明显高于鳞癌(P<0.05)。Pin1过表达与CyclinD1表达呈显著正相关(P<0.05)。结论:Pin1在宫颈癌细胞株及宫颈癌组织中存在mRNA及蛋白水平上的过表达,Pin1过表达与CyclinD1表达密切相关,Pin1和CyclinD1异常表达可能参与宫颈癌的发生发展。; 李红雨徐茜朱涛周金华邓东锐王世宣卢运萍马丁; 关键词：宫颈肿瘤宫颈癌细胞株 CYCLIN D1

卵巢癌患者术后NDV-ATV-ASI与化疗对免疫功能的影响: 2003年; 目的 :评价新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞疫苗特异性主动免疫治疗(NDV ATV ASI)及化疗后患者免疫功能的变化 ,为实施肿瘤生物治疗 +化疗联合方案提供依据。方法 :卵巢癌患者术后 3 4例给予NDV ATV ASI及化疗 ,采用流式细胞术免疫荧光双标记法检测患者治疗后外周血单个核细胞 (PBMC)中CD4+ 、CD8+ 细胞内IFN γ和IL 4的表达 ;体外实验以NDV修饰的自体肿瘤细胞与PBMC共培养 (MLTC) ,观察其早期活化分子CD2 5、CD69的表达。结果 :治疗后CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞内IFN γ的表达明显增高 ,IL 4表达轻度增高 ,且增高的时间较晚。外周血CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞CD2 5、CD69的表达增加。单纯化疗组CD4+ 、CD8+ 细胞内IFN γ表达降低。结论 :NDV ATV ASI可诱导机体产生抗肿瘤免疫应答 ,检测单个T细胞水平的细胞因子可作为一种简单且可靠的免疫治疗效果评价参数 ;而化疗对机体的免疫功能有抑制作用 ,二者联合应用应选择适当的时间。; 李芳朱怀仕贾平高庆蕾徐茜刘德艳王世宣卢运萍马丁; 关键词：卵巢肿瘤细胞因子类免疫疗法流式细胞术

宫颈癌FHIT蛋白表达及与临床的相关性被引量：2: 2005年; 目的:探讨候选抑癌基因FH IT产物FH IT蛋白在由正常宫颈上皮过渡至子宫颈癌过程中的表达缺失情况及其临床意义。方法:应用SP免疫组化染色法检测65例子宫颈癌,25例宫颈上皮肉瘤样病变(CIN),14例慢性子宫颈炎,5例正常子宫颈组织中FH IT蛋白的表达情况,并与组织学类型、组织学分级、肌层浸润深度和临床分期等生物学行为进行相关分析。结果:FH IT蛋白在子宫颈癌前病变和宫颈癌组织中的表达明显减少,缺失率分别为56.00%和72.31%,表达缺失率与组织学类型和组织学分级有关(P<0.05),与子宫颈癌的肌层浸润深度和临床分期无关(P>0.05)。结论:FH IT表达缺失是子宫颈癌发生的早期分子事件,FH IT蛋白表达缺失是早期诊断子宫颈癌及癌前病变较好的生物学标志。; 吴莺王世宣卢运萍徐茜马丁; 关键词：脆性组氨酸三联体基因子宫颈肿瘤基因表达免疫组织化学

拓扑替康诱导卵巢癌COC1/DDP细胞凋亡的分子机制初步探讨被引量：1: 2005年; 目的探讨拓扑替康(TPT)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的杀伤和诱导凋亡活性及其作用机制。方法MTT比色法与软琼脂克隆形成测定TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的杀伤效应;TUNEL法和流式细胞仪研究TPT对靶细胞的凋亡诱导作用;Westernblot检测TPT对COC1/DDP细胞内bcl-2、bax和caspase-3基因表达的影响以及caspase-3活性的改变。结果TPT对COC1/DDP细胞有明显细胞毒性作用,不仅有剂量依赖性,也存在明显的时间依赖性;COC1/DDP细胞在TPT作用后出现特征性凋亡形态特征,且凋亡率由8.54%上升为23.16%(P<0.05)。TPT不影响COC1/DDP细胞内bcl-2蛋白表达,却明显增加bax蛋白和caspase-3蛋白表达,并提高caspase-3活性。结论TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP有明显的杀伤和促凋亡作用,其机制可能依赖于细胞内bax蛋白表达增高和caspase-3的活化。; 田训王薇邢辉徐茜李辅军卢运萍王世宣马丁; 关键词：拓扑替康卵巢癌凋亡

人乳头状瘤病毒18型阳性肿瘤疫苗的构建及体外活性鉴定: 2007年; 目的:制备人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)18型阳性的肿瘤疫苗,并观察其体外活性。方法:利用昆虫杆状病毒(简称Bac to Bac)表达系统,将HPV18L1基因重组入穿梭质粒pFastBac-Htb,构建HPV18L1-Htb,通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组,分离重组的Bacmid DNA,并转染Sf-9昆虫细胞进行表达;透射电镜观察病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的形成;用Ni-NTA系统纯化表达蛋白;以小鼠红细胞凝集试验鉴定蛋白生物活性。结果:收集被转染的Sf-9细胞,提取细胞蛋白,SDS-PAGE检测在相对分子质量大约63000处可出现一新生蛋白条带,Western blotting证实为HPV18L1蛋白;透射电镜观察证实L1蛋白可自我组装成VLP,且主要定位于细胞核;小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白在0.5～4ng/μl范围可介导小鼠红细胞凝集。结论:Bac to Bac表达系统可高效地制备HPVVLP,并具有体外生物学活性;Ni-NTA系统能高效简便地纯化带有6×His短肽的HPV18L1蛋白。; 廖书杰王世宣马丁邓东锐徐茜王丽王薇程艳香白向阳卢运萍; 关键词：昆虫杆状病毒表达系统肿瘤疫苗

两种引物PCR法检测宫颈刮片中HPV DNA的对比及意义被引量：1: 2004年; 目的　探讨聚合酶链式反应检测宫颈刮片中人乳头瘤病毒的意义及可行性。方法　共检测 131例宫颈刮片 ,分为门诊组和宫颈癌组。每例分别使用通用型引物和 16型E7引物进行PCR ,比较两组间及两对引物检测的阳性率。结果　普查组和宫颈癌组阳性率分别为 32 .99%和 73.5 3% ,两组阳性率比较 ,差异有极其显著性 (P <0 .0 0 1)。普查组中 ,通用引物和HPV16E7引物扩增阳性率分别为 2 7.84 %和 16 .4 9% ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。宫颈癌组中 ,通用引物和HPV16E7引物扩增阳性率分别为 38.2 4 %和 6 7.6 5 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　PCR法检测宫颈刮片中的人乳头瘤病毒为一种可行的方法。通用型引物在普通人群中检测的敏感性好 ,可以作为一种筛查的方法。; 邬素芳徐茜陈刚王薇辜海念卢运萍周利平杜娟李辅军廖国宁马丁; 关键词：人乳头瘤病毒聚合酶链反应子宫颈癌

曲古菌素A对视网膜母细胞瘤Hxo-rb44细胞凋亡及Sur-vivin、c-Myc表达的影响: 2006年; 目的探讨曲古菌素A(TSA)对人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株Hxo-rb44细胞凋亡和Survivin、c-Myc表达的影响。方法将人Rb细胞株Hxo-rb44进行培养传代,流式细胞仪检测不同浓度的TSA作用不同时间对Hxo-rb44细胞周期和凋亡的影响,用Westernblot法检测凋亡过程中Survivin和c-Myc蛋白表达的变化。结果TSA可明显诱导细胞发生G2期阻滞及细胞凋亡,而且与药物作用时间呈依赖关系(r=0.97,P=0.02);Westernblot法可以观察到Survivin和c-Myc的表达水平随着TSA作用时间的延长而下降(P均<0.01)。结论TSA可以有效诱导人Rb细胞株Hxo-rb44细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制与抑制Survivin和c-Myc表达有关。; 王国军胡燕华李鹏程徐茜; 关键词：曲古菌素A 细胞周期阻滞

短发夹状RNA干扰对子宫颈癌细胞中Pin1基因表达及细胞增殖和凋亡的影响被引量：14: 2006年; 目的研究短发夹状RNA(shRNA)干扰对宫颈癌细胞中Pin1基因表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法构建靶向Pin1基因的shRNA真核表达质粒pSIREN-Pin1,在脂质体介导下转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞(HeLa/p-shRNA组),同时以对照质粒pSIREN-Con(HeLa/p-Con组)和无血清培养基转染HeLa细胞(HeLa组)作为对照,分别应用RT-PCR技术及蛋白印迹法检测Pin1mRNA及蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和软琼脂细胞克隆实验检测细胞增殖状况,流式细胞仪分析细胞凋亡情况。结果转染后48h,HeLa/p-shRNA组Pin1mRNA及蛋白表达水平分别为0·19±0·05和0·33±0·14,HeLa/p-Con组分别为0·84±0·16和0·79±0·17,HeLa组分别为0·89±0·11和0·81±0·15,前组Pin1mRNA及蛋白表达水平分别与后两组比较,差异均有统计学意义(P<0·05);转染pSIREN-Pin1质粒后HeLa细胞中Pin1mRNA及蛋白表达抑制率分别为77%和58%。MTT比色法检测显示,HeLa/p-shRNA组细胞增殖率明显下降(P<0·05)。软琼脂克隆实验显示,HeLa/p-shRNA组细胞克隆小而稀疏,细胞克隆形成率为(12±3)%,明显低于HeLa/p-Con组的(20±5)%和HeLa组的(24±4)%(P<0·05)。流式细胞仪分析显示,HeLa/p-shRNA组细胞凋亡率为(24·3±5·7)%,明显高于HeLa/p-Con组的(5·0±1·4)%和HeLa组的(1·8±0·4)%(P<0·05)。结论shRNA干扰技术能有效抑制靶基因Pin1的表达,进而可抑制宫颈癌细胞增殖并诱导细胞凋亡增加,为宫颈癌的基因研究及治疗提供新思路。; 李红雨朱涛周金华徐茜王世宣白向阳卢运萍马丁; 关键词：基因表达 RNA干扰宫颈肿瘤

徐茜

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