张继英 作品数:69 被引量:268 H指数:9 供职机构: 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
T细胞疫苗接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠免疫机制的调节作用 被引量:1 2004年 目的 探讨 T细胞疫苗 ( TCV)接种对实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)免疫机制的调节作用。方法 取正常及 EAE大鼠腹股沟淋巴结细胞 ,经 MBP抗原诱导 ,制备 MBP特异的 TCV用于接种 ,以 HE染色观察髓鞘病变 ,MTT法检测细胞毒反应 ,FACS方法检测 T细胞亚群 ,ELISA方法检测血清中细胞因子含量。结果 接种 TCV后 ,CD8+细胞百分率上升 ,T细胞对脑细胞的杀伤率下降 ,血清中 IFN-γ与 TNF-α含量下降以及脑髓质炎症反应减弱 ,EAE发病率下降。结论 特异性 TCV接种可降低自身免疫反应性。 TCV通过淋巴细胞亚群的变化及细胞因子的调节 ,发挥对 余奇文 沈帆霞 柏峻 马安伦 张继英 王利 沈佰华 陈生弟 张冬青关键词:T细胞疫苗 LEWIS大鼠 实验性自身免疫性脑脊髓炎 转染CD80(B7-1)基因前后人肿瘤细胞系表面标志表达 1997年 动物实验证实协同刺激分子CD80(B7-1)是促进抗肿瘤免疫应答的重要分子.本文应用RT-PCR,FACS技术检测了人肿瘤细胞系及EBV转化的B细胞CD80的表达,结果表明除Raji细胞、EBV转化的B细胞CD80阳性外,3AO、MCF-7、MDA-453、MKN-45、Hela细胞均为阴性.用我室建立的CD80逆转录病毒载体转染包装细胞PA317,筛选高滴度病毒上情感染人肿瘤细胞,得到CD80阳性表达的肿瘤细胞克隆.利用转染前后的人乳腺癌细胞系MDA-453作ICAM-I、HLA class Ⅰ、classⅡ分子表达的分析,结果表明转染有CD80基因的MDA-453细胞ICAM-Ⅰ、HLA classⅠ分子表达上调,class Ⅱ分子的表达未见改变. 严俊 马宝骊 王顺友 孙雨 张继英 张汉明关键词:CD80 逆转录PCR 肿瘤细胞系 基因转染 抗β-干扰素单克隆抗体及其应用 一种抗β-干扰素单克隆抗体,由由保藏号为CCTCC NO:C201121的杂交瘤细胞株产生。与β-干扰素SEQ ID No 1特异结合后,对β-干扰素具有中和作用。该抗β-干扰素单克隆抗体可用于对β-干扰素亲和层析纯化和... 余奇文 张冬青 张继英 李宁丽 马安伦 席波 聂红 沈伯华 沈天伟 柏峻 王利文献传递 IFN-β干预抗胶原Ⅱ功能域抗体诱导的RA样小鼠模型(CAIA)的分子学机制研究 研究背景:新近研究表明B细胞在 RA的发病中起着重要的作用,因此本研究采用CAIA小鼠模型研究 RA这一因免疫功能紊乱并最终引起骨质损伤而致残的自身免疫性疾病。IFN-β不仅具有抗病毒和免疫调节作用,且在维持骨平衡中也有... 赵蓉 周晓薇 苗平 钱柳 余奇文 张继英 许荣 陈雪华 张冬青关键词:IFN-Β C-FOS 口服MBP诱导免疫耐受预防实验性自身免疫病的研究 作者采用Lewis大鼠建立EAE动物模型,并通过口服MBP(髓鞘碱性蛋白)抗原,诱导机体产生针对MBP的免疫耐受,探讨口服耐受对实验性EAE的预防作用,为治疗多发性硬化症提供依据. 余奇文 张冬青 柏峻 马安伦 李宁丽 聂红 张继英关键词:多发性硬化症 髓鞘碱性蛋白 免疫耐受 自身免疫病 文献传递 HBV-前S_2抗原单克隆抗体制备、特性和应用 1993年 用HBsAg制备了一株分泌乙型肝炎病毒前S2抗原单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株(1E2),小鼠腹水中MAb效价达10^7。1E2MAb有很强的抑制多聚人血清白蛋白(pHSA)和HBsAg中前S2抗原结合的能力;与重组痘苗病毒表达的中分子蛋白(含S和前S2抗原)而不与小分子蛋白(含S抗原)反应;与人工合成的前S2肽段(N端120-146氨基酸序列)特异性结合。 陈路根 姚光弼 陈桦 张继英 马宝骊关键词:抗原 酶免疫法 乙型肝炎病毒 人Fas配体蛋白在大肠杆菌中的融合表达与应用 被引量:2 2003年 目的:在大肠杆菌中融合表达人Fas配体蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从激活的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,扩增Fas配体cDNA,克隆人PCR2.1载体。测序验证后,克隆人带有组氨酸盒的表达载体pQE-31,在大肠杆菌中表达,经亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达 产物。结果:表达的融合蛋白为人Fas配体,其相对分子质量(Mr)为40 000。经透析复性后,具有诱导Jurkat细胞凋亡的作用。用该蛋白分子免疫BALB/c小鼠制备抗血清,以间接ELISA检测了部分自身免疫病与肿瘤患者血清中可溶性FasL的含量,结果与进口试剂盒的灵敏性相似。结论:获得人Fas配体蛋白,并制备出抗FasL抗血清,为进一步研制抗FasL单克隆抗体,深入研究FasL的应用提供了材料。 李宁丽 聂红 余奇文 柏峻 马安伦 张继英 沈佰华 王利 张冬青关键词:细胞凋亡 大肠杆菌 医用小型猪骨加工工艺与免疫原性的检测与分析 2013年 目的制备医用小型猪骨的浸出性异种蛋白,检测和分析其皮质和松质混合骨(以下简称混合骨)与单纯皮质骨(以下简称皮质骨)浸出性异种蛋白刺激和诱导人淋巴细胞增殖的应答反应。方法应用化学和物理学方法制备获得医用小型猪混合骨与皮质骨粉,以定量RPMI-1640搅拌和浸泡4℃72h后高速离心获取上清液且进行蛋白定量检测;随即应用CCK-8方法检测和分析混合骨与皮质骨浸出性异种蛋白刺激和诱导人外周血淋巴细胞增殖的差异性;以及人外周血淋巴细胞增殖培养上清中四种细胞因子表达的异同。结果 CCK-8实验结果表明:CCK-8实验未见混合骨与皮质骨浸出性异种蛋白具有刺激和诱导人淋巴细胞增殖的应答反应的统计学差异;而应用ELISA酶联免疫吸附实验对人淋巴细胞培养上清中IFN-r、IL-1、IL-10和TNF-a的检测结果提示:与对照组相比,经工艺处理后小型猪骨组的四种炎症相关因子均较处理前组具有统计学的显著性差异(P<0.05),而皮质骨组较混合骨组其炎症相关因子的表达同样具有统计学差异。结论本实验结果提示,应用已建立的小型猪骨加工工艺可有效处理和抑制异种蛋白对人淋巴细胞增殖的刺激和诱导作用,表明小型猪混合骨与皮质骨其异种蛋白的抗原性存在一定的差异;本小型猪骨加工工艺和免疫原性的检测和分析系统的建立为医用性异种骨的使用提供了理论与实验数据的参考。 周小垚 顾翔风 柳伯安 孔繁平 赵蓉 张继英 余奇文 张冬青关键词:小型猪 异种蛋白 抗原 CCK-8 酶联免疫吸附 髓鞘碱性蛋白(MBP)特异的Wistar大鼠T细胞系的建立 被引量:2 2001年 目的 建立特异的大鼠T细胞系 ,为T细胞疫苗的研制打下基础。方法 采用足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆 (GPSCH) 福氏完全佐剂 (CFA)混合乳剂和百日咳疫苗 ,诱导Wistar大鼠EAE模型。腹股沟淋巴结细胞经豚鼠髓鞘碱性蛋白 (GPMBP)反复刺激 ,3H TdR掺入法筛选针对GPMBP特异增殖的T细胞。FACS检测T细胞表型。RT PCR测定T细胞的细胞因子格局。结果 一次性足垫皮内注射GPSCH CFA混合乳剂可诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)模型 ,并证实了同时注射百日咳疫苗能提高发病率和发病程度。EAE大鼠脑、脊髓组织HE染色见大量淋巴细胞浸润 ,在血管周围形成淋巴鞘 ,但未见脱髓鞘改变。T细胞对GPMBP呈特异性增殖 ,为CD4 +表型。RT PCR结果显示T细胞IL 2和IFN γmRNA表达水平较高 ,TNF α亦低水平表达。结论 Wistar大鼠可用于制备EAE动物模型。GPMBP特异性T细胞系为CD4 +表型 ,呈TH1类细胞因子格局。 周璟 马宝骊 张家胜 王利 张继英 柏峻 韩晓枫关键词:实验性自身免疫性脑脊髓炎 髓鞘碱性蛋白 T细胞系 槲寄生凝集素提取及其增强γδ-T细胞抗瘤作用的实验性研究 被引量:2 2005年 目的:采用硫酸铵沉淀法从中药槲寄生中提取制备分子量约为31ku的槲寄生凝集素有效成分,观察其对诱导正常人外周血γδ-T细胞受体(γδ-TCR)阳性T细胞表达、杀伤Daudi细胞和增强肿瘤组织中浸润的γδ-T细胞特异杀伤肿瘤细胞的能力。方法:饱和硫酸铵沉淀法获得槲寄生凝集素;免疫荧光法检测γδ-TCR阳性细胞表达;乳酸脱氢酶法(LDH)检测γδ-TCR杀伤靶细胞活性。结果:不同浓度槲寄生凝集素均能诱导正常人外周γδ-TCR的表达;提取的槲寄生凝集素具有诱导外周血γδ-TCR阳性细胞杀伤Daudi细胞的能力,且呈剂量依赖;槲寄生凝集素可增强肿瘤组织中γδ-TCR阳性细胞的抗瘤效应。结论:槲寄生凝集素具增强γδ-T细胞杀伤肿瘤靶细胞的生物学作用。 朱吉 乔晓洪 周健 柏峻 张继英 余奇文 李宁丽 张冬青关键词:槲寄生凝集素 流式细胞仪