张红旭 作品数:11 被引量:28 H指数:4 供职机构: 华中科技大学同济医学院 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
水通道蛋白-1在角膜内皮细胞液体转运中的作用研究 被引量:2 2007年 目的研究水通道蛋白-1在牛角膜内皮细胞中的表达及在角膜内皮液体转运中的作用。方法用免疫组织化学方法,检测水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达,并用水通道蛋白阻滞剂对氯汞苯磺酸酯(pCMBS)处理培养的牛角膜内皮细胞,观察处理前后角膜内皮细胞的渗透性水通透率(Pf)改变。结果培养的牛角膜内皮细胞中有水通道蛋白-1的表达,主要位于细胞膜上。汞剂处理前后的角膜内皮细胞Pf分别为(0.044±0.005)cm/s(n=15)和(0.017±0.003)cm/s(n=15),其差异有统计学意义(P<0.01)。结论水通道蛋白-1在牛角膜内皮细胞液体转运中起着重要作用,其表达的改变能够导致角膜水肿和功能改变。 张红旭 张明昌关键词:角膜内皮细胞 水通道蛋白-1 乙酰唑胺对培养的牛角膜内皮细胞液体转运功能的影响 2007年 目的研究乙酰唑胺对培养的牛角膜内皮细胞液体转运功能的影响。方法观察并记录给予不同浓度乙酰唑胺(0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L,100μmol/L)后角膜内皮细胞在低渗溶液中的体积改变,并计算其渗透水通透性(osmotic water permeability,Pf)的变化。结果培养的正常牛角膜内皮细胞的Pf值为(0.0446±0.0089)cm/s,在0.1~100μmol/L乙酰唑胺孵育72h后,培养的牛角膜内皮细胞的渗透性水通透性逐渐减少,其Pf值分别为(0.0406±0.0014)cm/s,(0.0364±0.0015)cm/s,(0.0300±0.0022)cm/s,(0.0226±0.0019)cm/s。结论乙酰唑胺呈剂量依赖性地减低角膜内皮渗透性水通透性,抑制角膜内皮细胞液体转运功能。 张红旭 张明昌 姜冬玲 张缨 郭张强关键词:角膜 内皮细胞 通透性 乙酰唑胺 水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达研究 被引量:2 2006年 目的研究水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达情况及意义。方法用免疫组织化学方法,检测水通道蛋白-1在培养的牛角膜内皮细胞中的表达。结果培养的牛角膜内皮细胞中有水通道蛋白-1的表达,且主要位于细胞膜上。结论牛角膜内皮细胞中的水通道蛋白-1在角膜内皮液体转运中起着重要作用,其表达改变可能导致角膜水肿和功能改变。 张红旭 张明昌关键词:角膜内皮 水通道蛋白-1 RNA干扰抑制水通道蛋白1对血管内皮细胞迁移影响的研究 被引量:5 2008年 目的探讨RNA干扰抑制水通道蛋白1(AQP-1)对血管内皮细胞迁移的影响以及角膜新生血管的形成机制。方法实验研究。体外培养人血管内皮细胞,设计并合成特异性针对人AQP-1的小RNA干扰片段,用脂质体转染入血管内皮细胞,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测RNA干扰效果,Transwell实验和损伤愈合实验观察血管内皮细胞迁移能力的改变。AQP-1 mRNA表达的组间比较采用单因素方差分析。Transwell细胞迁移实验和损伤愈合实验的结果采用独立样本的t检验。结果转染24、48及72h后AQP-1 mRNA表达下降,分别为正常对照组的11.3%、17.4%及29.7%,与正常对照组相比差异有统计学意义(P值分别为0.004、0.007、0.002)。Transwell实验和损伤愈合实验提示转染AQP-1 siRNA后血管内皮细胞的迁移能力有明显下降,与正常对照组相比差异有统计学意义(t=10.813,P=0.016和t=22.431,P=0.027)。结论AQP-1特异性siRNA能有效抑制AQP-1的表达并明显降低血管内皮细胞的迁移能力,从而抑制角膜新生血管的形成。 张红旭 张明昌 陈宏关键词:RNA干扰 水孔蛋白1 细胞运动 角膜新生血管化 细胞周期依赖性激酶抑制剂P27、P21在人角膜上皮的表达研究 被引量:4 2004年 目的 探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂 (CKI) P2 7、P2 1在角膜上皮细胞的表达情况。方法 应用 SP免疫组化法 ,检测 P2 7、P2 1等细胞周期依赖性激酶抑制剂和增殖细胞核抗原 (PCNA)在角膜上皮不同部位的表达情况。结果 角膜缘上皮区 PCNA呈阳性表达 ,主要位于基底细胞层 ,中央区角膜上皮内未见阳性表达 ,差异有显著意义 (P <0 .0 1) ;P2 7、P2 1在中央区角膜上皮内呈阳性表达 ,角膜缘上皮内未见阳性表达 ,差异均有显著意义(P <0 .0 1)。结论 细胞周期依赖性激酶抑制剂 P2 7、P2 1和 PCAN在角膜上皮不同部位的表达差异 ,提示在角膜缘上皮基底层内存在着一群有较高的增殖能力、处于 G1 期的细胞群 。 张红旭 张明昌关键词:细胞周期 角膜上皮 基因表达 上皮干细胞 细胞周期依赖性激酶抑制剂P27,P21在人角膜上皮的表达研究(英文) 被引量:1 2006年 目的:探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂(CKI)P27,P21 在角膜上皮细胞的表达情况。方法:应用 SP 免疫组化法,检测 P21,P27 等细胞周期依赖性激酶抑制剂和增殖细胞核抗原(PCNA)在角膜上皮不同部位的表达情况。结果:角膜缘上皮区 PCNA 呈阳性表达,主要位于基底细胞层,中央区角膜上皮内未见阳性表达,差异有显著意义(P <0.01);P27,P21 在中央区角膜上皮内呈阳性表达,角膜缘上皮内未见阳性表达,差异均有显著意义(P <0.01)。结论:细胞周期依赖性激酶抑制剂 P27,P21 和 PCNA 在角膜上皮不同部位的表达差异,提示在角膜缘上皮基底层内存在着一群有较高的增殖能力,处于 G1 期的细胞群,即干细胞。 张明昌 张红旭关键词:P27 P21 PCNA 角膜上皮干细胞 HIF-1α在大鼠角膜碱烧伤后的作用研究 被引量:5 2007年 目的检测大鼠角膜碱烧伤后缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达变化,探讨其在角膜碱烧伤损伤机制中的作用。方法建立大鼠角膜碱烧伤模型,采用免疫组织化学与原位杂交技术,检测角膜碱烧伤后不同时间HIF-1α在角膜各层中的表达变化。结果在正常角膜组织中,角膜各层均未见HIF-1α免疫染色,碱烧伤后1d时HIF-1α免疫活性增强,且3d时表达最强,15d时明显下降,30d时仍有高于正常水平的弱表达。原位杂交检测中正常角膜组织有极弱的HIF-1α mRNA表达,碱烧伤后HIF-1α mRNA表达增强,在伤后3d、7d时表达最明显,15d后表达强度恢复至正常组织水平。结论HIF-1α参与碱烧伤后角膜的损伤病理机制,其表达变化影响新生血管形成过程,为寻找角膜碱烧伤新的治疗途径提供了理论依据。 易小灵 张明昌 张奕霞 张红旭关键词:缺氧诱导因子-1Α 角膜 碱烧伤 原位杂交 新生血管 纯甘油保存人羊膜治疗翼状胬肉的临床研究 被引量:8 2005年 目的观察纯甘油保存的人羊膜用于原发性及复发性翼状胬肉治疗的临床疗效,并与细胞培养液(DMEM)加二甲亚砜(DMSO)保存的人羊膜进行比较,探讨简便实用的羊膜保存方法。方法对82例(90眼)翼状胬肉患者行翼状胬肉切除术联合羊膜移植术,随机对61例(65眼)联合使用纯甘油保存的羊膜(甘油组),包括45例(48眼)初发性翼状胬肉及16例(17眼)复发性翼状胬肉。21例(25眼)联合用细胞培养液加二甲亚砜保存的羊膜(DMEM+DMSO组),包括15例(18眼)初发性翼状胬肉及6例(7眼)复发性翼状胬肉。术后定期随访观察。结果术后随访7~29月,平均(16.2±6.3)月。共8眼复发,其中甘油组6眼复发,包括初发性翼状胬肉3眼和复发性翼状胬肉3眼。DMEM+DMSO组2眼复发,均为初发性翼状胬肉。2组复发率经χ2检验(χ2=0.061,P>0.05)差异无显著性,2组初发性翼状胬肉复发率(χ2=0.215,P>0.05)及复发性翼状胬肉复发率(Fisher’stest,P=0.333)均无统计学差异。结论纯甘油羊膜移植治疗初发性翼状胬肉及复发性翼状胬肉均取得满意疗效。纯甘油保存羊膜是一种安全、简便、有效的羊膜保存方法。 张明昌 黄渝侃 姜冬玲 陈宏 黄琼 王勇 张红旭关键词:翼状胬肉 羊膜移植 甘油 细胞培养液 转化生长因子β_2对牛角膜内皮细胞增生的影响 被引量:2 2009年 目的体外培养牛角膜内皮细胞(CECs),观察不同质量浓度的外源性转化生长因子β2(TGF-β2)对牛CECs的增生抑制作用。方法0.1、1、10、100μg/L的TGF-β2作用于体外培养的牛CECs,于24、48、72h观察不同质量浓度的TGF-β2对牛CECs的影响。采用CCK-8检测法测定各孔吸光度(A值),采用流式细胞检测仪对各组细胞周期进行检测。结果0.1、1、10μg/L的TGF-β2作用后各时间点,均能使牛CECs的吸光度发生改变。在同一时间点,0.1μg/L、1μg/L的TGF-β2抑制效果最为显著。各质量浓度的TGF-β2对牛CECs作用48h,其吸光度改变最明显。48h时,0.1μg/L、1μg/L的TGF-β2对牛CECs的增生抑制作用明显。各质量浓度组作用48h后,0.1μg/L、1μg/L组牛CECs的G0周期细胞所占比例与阴性对照组比较,差异均有统计学意义,而10μg/L、100μg/L组的牛CECs的G0期细胞百分比与阴性对照组比较,差异均无统计学意义。结论0.1μg/L、1μg/L的TGF-β2作用24、48、72h对牛CECs均具有明显的增生抑制作用。 刘洋 张明昌 黄渝侃 姜冬玲 张红旭关键词:TGF-Β2 角膜内皮细胞 细胞培养 流式细胞技术 siRNA沉默CTCF基因对牛角膜内皮细胞p27蛋白表达的影响 被引量:2 2010年 目的 探讨RNA干扰技术沉默结缔组织生长因子(CTGF)基因表达对p27蛋白表达的影响.方法 实验研究.设计并合成CTGF特异性小干扰RNA(siRNA),用脂质体转染入培养的牛角膜内皮细胞,正常对照组仅加入培养基而未进行siRNA转染.逆转录聚合酶链反应法观察基因沉默效果,免疫印迹法观察1.00μg/L转化生长因子β2作用下角膜内皮细胞内p27蛋白表达.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 CTGF siRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24、48及72 h CTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%、24.4%及41.7%,与正常对照组比较,差异有统计学意义(F=389.9,P〈0.05).在转染36 h时,p27蛋白表达明显下降(F=299.3,P〈0.05).结论 CTGF特异性siRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达,下调角膜内皮细胞p27蛋白的表达. 陈宏 张明昌 张红旭关键词:结缔组织生长因子 转化生长因子Β2 转化生长因子Β2 周期素依赖激酶抑制剂P27