张德蒙
- 作品数：10 被引量：24H指数：2
- 供职机构：中国科学院大连化学物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 新型水溶性多色荧光碳点的制备及细胞成像研究被引量：10
- 2014年
- 以鸡蛋清和牛奶分别与葡萄糖进行水热反应,制备水溶性多色荧光碳点,通过膜和柱层析分离纯化,利用透射电子显微镜（TEM）、紫外吸收光谱（UV）、荧光光谱（FL）、红外光谱（FTIR）等技术对所制备碳纳米粒子的粒径大小、吸收光谱、发光性质、表面基团进行表征.将所制备的碳点与小鼠黑色素瘤细胞共孵育,进行细胞成像应用评价.结果表明：制备的两种水溶性荧光碳点平均粒径分别为2.5 nm和4.9 nm,可在紫外灯下发出明亮的荧光,紫外最大吸收波长为250 nm.基于鸡蛋清或牛奶与葡萄糖反应制备的多色荧光碳量子点具有良好水溶性,其荧光光谱最大发射波长分别在410 nm和400nm处,同时在660～800 nm激发波长范围内具有上转换性质,且荧光发射光谱随着激发光波长的增加发生红移.红外光谱表明存在—COOH、-NH2和-OH基团.细胞成像结果表明,在405 nm或488 nm激光照射下,所制备的碳点在细胞内的荧光成像清晰可见,而且在碳点浓度小于2.5 mg/mL时,均表现出较低的细胞毒性.
- 李欣彤吴晶张德蒙谭明乾马小军
- 关键词：细胞成像
- 将动态浊度法用于海藻酸盐材料中内毒素的定量检测方法
- 本发明公开了一种将动态浊度法用于海藻酸盐材料中内毒素的定量检测，该方法能提供海藻酸盐材料中内毒素的绝对值。
- 谢红国于炜婷张德蒙马小军
- 文献传递
- 壳聚糖/siRNA纳米粒的制备与性能研究被引量：1
- 2016年
- 利用静电自组装法制备了壳聚糖/siRNA纳米粒,建立了SYBR -old核酸染料法测定siRNA复合率（CR）,并系统性考察了n（N）/n（P）比,壳聚糖分子量（Mw）、脱乙酰度（DD ）及制备环境pH 值、缓冲液浓度（Bc）对纳米粒siRNA 复合率、粒径及表面电位的影响规律. 结果表明,siRNA 复合率由n（N）/n（P）0.5时的（18.6±4.0）%快速增大至n（N）/n（P）为2时的（92.9±2.0）%,但随n（N）/n（P）增大复合率不再升高;n（N）/n（P）〈2时,难以形成稳定纳米粒,复合物表面电位为负,n（N）/n（P）由5升至150时,纳米粒粒径由（179.3±5.7）nm 增大至（235.5±8.3）nm,表面电位由（17.2±1.3）mV 升高至（23.6±0.9）mV.另外,n（N）/n（P）150时,CR 随DD 升高而升高,随Bc升高而降低;纳米粒粒径随Mw 增大而增大,随DD及缓冲液浓度（Bc）升高而减小;纳米粒表面电位随DD 升高而升高,随pH 值及Bc 升高而降低.n（N）/n（P）比对纳米粒特性及siRNA 复合率影响最为显著,调整n（N）/n（P）、Mw、DD 、pH 值及离子强度可得到siRNA 复合率在90% 以上,粒径100-300nm,表面电位15-25mV 的纳米粒.
- 张德蒙娄茹云王雨刘袖洞于炜婷马小军
- 关键词：壳聚糖小干扰RNA
- TurboFect介导骨形态发生蛋白2转染CHO细胞的研究
- 2016年
- 目的:构建真核表达载体p IRES-EGFP-BMP-2,通过Turbo Fect转染得到表达BMP-2蛋白的CHO细胞系。方法:利用逆转录PCR方法扩增获得人的BMP-2基因c DNA,克隆入p MD18-T载体,经PCR、酶切和基因测序分析等方法鉴定重组质粒;将BMP-2连入p IRES-EGFP真核表达载体中,经限制性酶切和PCR扩增鉴定重组质粒。以壳聚糖和Turbo Fect分别作为基因载体转染CHO细胞,荧光显微镜检测分析转染结果;G418筛选富集转染阳性细胞。结果:成功的克隆得到了BMP-2基因,酶切鉴定成功构建了p IRES-EGFP-BMP-2质粒。与壳聚糖组相比,Turbo Fect用量为1:1时,细胞阳性率为(31.92±1.31)%,高于壳聚糖的细胞阳性率(6.33±1.53)%。目的基因与Turbo Fect比例为1:2时转染效率为(42.90±1.10)%高于1:1的(28.59±2.38)%和1:3的(37.52±2.14)%。细胞密度调节到5×103 cells/cm2阳性细胞率可达到(44.43±3.23)%。荧光检测可见荧光阳性细胞得到稳定传代。Western Blot检测可见BMP-2蛋白表达。结论:Turbo Fect成功的介导了p IRES-EGFP-BMP-2载体转染CHO细胞,建立了稳定表达BMP-2和EGFP的CHO细胞株。
- 王淑君张德蒙李娜王贝贝谢红国郭昕白凤武
- 关键词：骨形态发生蛋白2转染阳离子聚合物壳聚糖TURBO
- 自组装水热合成碳点-中空氧化硅纳米粒复合材料被引量：2
- 2016年
- 利用反相微乳液体系制备出粒径均一的中空氧化硅纳米粒（SHN）,以此为基础,再利用水热法通过自组装合成了碳点-中空氧化硅纳米粒复合材料（CD-SHN）。采用高分辨透射电子显微镜（HRTEM）和场发射扫描电子显微镜（FESEM）对其结构进行了表征,结果显示SHN尺寸为30-40 nm,壳厚约为10 nm,在此基础上合成出具有和海葵类似结构的CD-SHN,尺寸约为1μm,并且,在水相中具有良好的分散性。海葵状CD-SHN既具有激发波长依赖的多色荧光发射性能,又具有良好的光稳定性,其最大激发及发射波长分别位于360和435 nm附近,经40 W白炽灯照射60 min,其荧光强度仍可保持97%。该材料的制备过程条件温和,其原材料生物相容性良好,在生物造影方面具有潜在的优势。
- JATUPAIBOON Nirun张德蒙王贝贝谢红国马小军
- 关键词：氧化硅
- PMA及乏氧诱导VEGF上调的细胞模型构建及用于RNAi研究
- 2012年
- 目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦显微镜观察小干扰RNA(siRNA)转染的细胞胞吞及细胞形态。结果:1 M PMA处理细胞2 h能明显上调B16-F10细胞中VEGF蛋白的合成及分泌,与常规培养相比,细胞可增加50%的VEGF水平。再经乏氧诱导48 h,稳定释放到培养液里的VEGF浓度大幅提高200%,范围在55-65 pg/mL/h。结论:经PMA和乏氧诱导后,B16-F10细胞稳定的VEGF分泌量与一定时间内分泌的稳定性均表明其适合作为RNAi的体外细胞模型。初步的RNAi结果表明,TKO/siRNA纳米粒与壳聚糖/siRNA纳米粒对于VEGF的沉默效率达40%。
- 杨艳吕国军郭昕张德蒙于炜婷张英刘袖洞马小军
- 关键词：小鼠黑色素瘤细胞血管内皮细胞生长因子
- 一种测定CS/siRNA复合体系中siRNA复合率的方法
- 本发明公开了一种测定壳聚糖（CS）基载siRNA复合物体系中siRNA复合率的方法。本发明以与双链siRNA特异性结合的核酸染料加入到CS/siRNA复合物溶液中，通过测定溶液荧光强度并结合染料荧光强度-siRNA浓度标...
- 马小军张德蒙刘袖洞于炜婷
- 文献传递
- 测定CP装载siRNA体系中siRNA释放的方法
- 本发明提供一种可测定阳离子聚合物载siRNA体系中siRNA释放曲线的方法。该监测siRNA释放方法需要分别对阳离子聚合物载体及所装载siRNA进行荧光标记，且标记使用的两种荧光物质构成荧光共振能量转移（FRET）荧光供...
- 马小军张德蒙刘袖洞于炜婷
- 文献传递
- 壳聚糖-siRNA纳米粒制备及沉默VEGF表达
- 前言：壳聚糖(CTS)是天然阳离子多糖，具有无毒、生物相容、可生物降解等优异性能，因而常用于药物/基因转运释放领域[1]，尤其是小干扰RNA (siRNA)介导的RNAi技术可以在细胞质内特异性沉默有害基因表达，成为很有...
- 刘袖洞张德蒙于炜婷杨艳马小军
- 关键词：壳聚糖SIRNA基因沉默
- 柠檬酸荧光碳点的合成及其在Fe(Ⅲ)检测和细胞成像中的应用被引量：11
- 2015年
- 以柠檬酸为原料,采用一步水热法合成荧光碳点。所合成的荧光碳点在310nm激发波长下的荧光量子产率为5.3%,发射光谱随着激发波长红移而红移。透射电镜（TEM）表征显示荧光碳点在水溶液中分布均匀,平均粒径为2.9nm。红外（IR）光谱和Zeta电位结果表明碳点表面有羧基和羟基等活性官能团。Fe（Ⅲ）对这些荧光碳点表现出选择性猝灭效果,这种现象可以用于Fe（Ⅲ）检测。在10mmol/L的HEPES缓冲溶液（pH=7.0）中,荧光碳点的荧光强度随着Fe（Ⅲ）浓度的增加逐渐衰减。该方法对Fe（Ⅲ）测定的线性范围为100~500μmol/L,检出限为112.5nmol/L。细胞成像结果表明,柠檬酸的碳点可进入到B16-F10细胞内,并在405nm和488nm激光照射下发出不同颜色的荧光。以上结果表明该碳点在Fe（Ⅲ）检测和细胞成像方面有潜在应用价值。
- 唐荣李琛叶志强张德蒙马小军谭明乾袁景利
- 关键词：细胞成像
