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中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因全长cDNA克隆和重组表达被引量：8: 2011年; 根据实验室分离自中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的一种蜕皮抑制激素(Molting-inhibiting hormone,MIH)N端氨基酸测序结果设计简并引物,采用RACE方法,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆到蜕皮抑制激素基因全长cDNA(Es-MIH,GenBank登录号:DQ341280),该基因全长为1457 bp,开放阅读框为330 bp,编码110个氨基酸(含有35个氨基酸的信号肽);其成熟肽包含C7-C44、C24-C40和C27-C53三个二硫键,有典型的CHH家族结构域。该cDNA编码的氨基酸序列与地蟹(Gecarcinus lateralis)MIH同源性最高,达到了85%。Northern杂交和半定量RT-PCR显示蜕皮间期成体蟹仅在眼柄中有MIH基因表达,提示该基因的表达具有一定组织特异性。利用pCR T7/NT TOPO TA系统重组表达MIH成熟肽,纯化的重组蛋白得率为0.3 g/L,纯化产物经质谱鉴定为中华绒螯蟹MIH。研究解决了CHH家族神经肽在机体中的表达量少,直接纯化较难的问题,为深入研究MIH的作用机制和在生产上控制中华绒螯蟹蜕皮和生长奠定了基础。; 孙妍张亦陈刘逸尘王雪惠王宇凡耿绪云孙金生杨卫军; 关键词：中华绒螯蟹纯化

Kazal型抑制因子在对虾免疫应答过程中的作用研究: 刘逸尘孙金生高虹王雪惠孙妍段虎杜宏薇; 丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)是重要的非特异性免疫因子,在生物体免疫应答过程(如:凝结作用、酚氧化酶原级联反应、细胞因子活化等)中发挥着重要作用,对它的研究已成为先天免疫学的研究热点.对虾是中国的主要经济甲壳动物,对其SP...; 关键词：; 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂对虾病害防治

中国明对虾C-型凝集素基因(Fclectin)的重组表达及活性分析被引量：7: 2012年; 研究拟通过分析对虾C型凝集素的活性特点,探讨其在对虾先天免疫应答过程中的潜在功能以及在养殖生产实践中的应用。实验利用原核表达系统对中国明对虾C-型凝集素基因的两个串联的糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD)进行了重组表达,并通过纯化复性获得了重组目的蛋白(rFclectin-CRD1和rFclectin-CRD2)。活性分析结果显示,重组目的蛋白对多种病原菌有凝集和抑制生长的作用,并且具有Ca2+依赖活性;其凝集活性可被半乳糖、肽聚糖、脂多糖等多种病原相关分子模式所抑制,研究结果证实,Fclectin是一种典型的C-型凝集素,它可能作为中国明对虾先天免疫中重要的模式识别受体,在一定程度上参与了机体应答病原微生物的防御过程。; 刘逸尘刘丽静张亦陈耿绪云孙妍孙金生; 关键词：中国明对虾先天免疫抑菌活性

中华绒螯蟹高血糖激素基因的克隆和分子结构解析被引量：4: 2013年; 为深入研究中华绒螯蟹高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)基因的结构与功能,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆得到高血糖激素基因的全长cDNA序列(Ers-CHH,GenBank登录号:JX485664)。序列及分子结构分析结果显示:Ers-CHH基因全长585 bp,ORF区为453 bp,编码150个氨基酸,N端30个氨基酸为预测的信号肽区域,其后为42个氨基酸的前体相关肽和78个氨基酸的成熟肽。其成熟肽区具有典型的CHH家族结构域,包括3个二硫键C7-C43、C23-C39、C26-C52和4个α螺旋(alpha-helix),但不具有β折叠结构(beta-sheet)。Ers-CHH成熟肽氨基酸序列与溪蟹相比有92%的相似性;其三维结构与其它物种CHH三维结构比较结果显示,4个α螺旋所处的位置及所含氨基酸的相似性较高。与中华绒螯蟹MIH相比,CHH序列前段缺少一个螺旋,但其4个α螺旋的位置及氨基酸数目与MIH的α2-α5螺旋高度一致,空间结构也基本相同,这可能是两种激素功能部分重叠的分子基础。上述结果为进一步研究CHH在中华绒螯蟹生长发育及能量代谢过程中的调节机制和人工控制甲壳动物生长代谢提供了重要信息。; 王艳华张亦陈孙妍刘逸尘耿绪云孙金生; 关键词：中华绒螯蟹克隆分子结构

中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因全长cDNA克隆、表达及重组蛋白的生物学功能研究: ＜正＞蜕皮抑制激素（Molting inhibiting hormone,MIH）属于甲壳动物CHH家族神经多肽类激素,其抑制Y-器官（Y-organ）合成和分泌蜕皮酮（ecdysteroid）对甲壳动物的蜕皮以及生长发...; 孙妍张亦陈刘逸尘孙金生杨卫军; 文献传递

中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)丝氨酸蛋白酶同源物基因(Fc-SPH)的重组表达及活性分析被引量：1: 2012年; 以实验室前期克隆到的中国明对虾丝氨酸蛋白酶同源物基因(Fc-SPH)(GenBank登录号:DQ318859)为基础,利用原核表达系统对Fc-SPH基因成熟肽区域进行了重组表达和纯化复性分析,并对获得的重组目的蛋白开展了抑菌活性及微生物清除功能研究。结果表明:在体外成功获得了大量有活性的对虾Fc-SPH蛋白(rFc-SPH),活性研究显示rFc-SPH对大多数受试菌种都有明显的抑制效果,并可以加速中国明对虾清除体内外源微生物的速度。作者推断Fc-SPH即可以作为一线防御应答效应物直接参与虾类的先天免疫活动而发挥作用,也可以通过调理作用促进血细胞对病原微生物的吞噬和杀灭。; 杨燚刘逸尘张亦陈孙妍耿绪云孙金生; 关键词：中国明对虾先天免疫

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孙妍