周为民
- 作品数：65 被引量：317H指数：9
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 痘病毒科不同病毒属特异的PCR检测方法的建立
- 2010年
- 目的:建立可准确、快速地鉴别诊断可感染人的不同属痘病毒的特异PCR方法。方法:设计针对正痘病毒属、副痘病毒属和传染性软疣病毒属的多对特异引物,并制备相应的DNA模板,针对不同的模板优化引物与反应条件,分别进行检测筛选,建立病毒属特异的单独与多重PCR方法。结果:单一模板的PCR扩增反应中,正痘病毒的检测敏感性可达101拷贝/μL(引物为OPEaL-F1880/OPEaL-R2057),副痘病毒的检测敏感性可达101拷贝/μL(引物为PP2/PP3),传染性软疣病毒的检测敏感性为100 pg/μL体系(引物为MCV1/MCV2);混合模板的PCR扩增反应中,各属特异的引物均可获得预期大小的特异片段。结论:我们建立的PCR诊断方法,可用于痘病毒科不同病毒属感染的实验室特异快速鉴别诊断。
- 周为民王慧娟张陵林谭文杰董小平阮力
- 关键词：PCR检测
- BSL-3实验室医疗废弃物专用包装袋的封口方式及层数对高压灭菌效果的影响被引量：7
- 2019年
- 目的对感染性废物的包装给出一个合理的包装层数和封口方式,在指定的高压灭菌程序下,达到更好的高压灭菌效果。方法在指定的高压程序P4、P9下,针对医疗废弃物专用包装袋采用不同的包装层数和封口方式(包装层数分别为单层、双层、三层;封口方式分别是轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口);通过用生物指示剂对内部感染性废物的上部、中部、底部进行检测,评价不同组合方式下的高压灭菌效果。结果1)在P4高压程序下,三层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、下部的生物指示剂的阴性率分别为上部是100%、0%、0%,中部是45%、0%、0%,底部都是0%。二层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、底部的生物指示剂的阴性率分别为上部是100%、85%、0%,中部是67%、20%、0%,底部是10%、0%、0%。一层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、底部的生物指示剂的阴性率分别为上部是100%、100%、0%,中部是70%、45%、0%,底部是12.5%、0%、0%。(2)在P9高压程序下,三层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、底部的生物指示剂的阴性率分别为上部均是100%,中部是100%、100%、70%,底部是100%、100%、30%。二层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、底部的生物指示剂的阴性率分别为上部均是100%,中部均是100%,底部是100%、100%、60%。一层医疗废弃物专用包装袋包装封口方式按轻微折叠、高压胶带、尼龙扎带封口,内部感染性废物上部、中部、底部的生物指示
- 甄维蔡琨史海月张靖韩卫芳周为民武桂珍
- 关键词：高压灭菌
- Epstein-Barr病毒膜抗原在昆虫细胞中的表达
- 1999年
- 目的 探索影响EpsteinBarr病毒膜抗原(EBVMA)在昆虫细胞中表达的因素。方法 携有截去穿膜区序列的EBVMA基因的重组昆虫杆状病毒感染不同生长阶段及生长条件的昆虫细胞,应用免疫打点法及MasterImagineVDS影像摄录分析系统测定目的蛋白的表达量。结果 重组病毒感染不同生长阶段的细胞,MA表达量不同。处于对数生长早期的细胞表达量明显高于处于对数生长晚期及静止期的细胞。将不同生长阶段的细胞补充新鲜培养液,MA的表达量在原基础上有所提高。进一步研究表明,在感染重组病毒之前,更换新鲜培养液,同时在感染过程中补充葡萄糖,L谷氨酰胺等营养物质,会大大提高MA表达量。结论 细胞培养液中营养物质的消耗和代谢产物的蓄积是影响EBVMA在昆虫细胞中表达的主要因素。
- 卢婧周为民谷淑燕
- 关键词：EB病毒昆虫细胞病毒抗原培养基
- 22例SARS感染愈后连续5年特异性IgG抗体随访分析
- 2010年
- 为分析SARS冠状病毒(SARS-CoV)IgG抗体在SARS感染康复者体内的持久性与变化,本研究自2004年3月开始,每年采集北京地区SARS感染康复者血清标本,采用商品化的冠状病毒(变异株)IgG抗体间接ELISA检测试剂盒,对其中22名SARS康复者中的SARS-CoVIgG抗体进行连续五年随访检测与分析。结果表明:在愈后第1年,所有血清SARS-IgG抗体皆为阳性。第2、3年处于平台期,滴度仍维持较高的水平。第4年抗体滴度有明显下降趋势。第5年IgG抗体基本转阴。研究发现SARS-CoVIgG抗体可维持3年以上,第4年之后明显下降。本研究为SARS感染诊断与防治、免疫应答及疫苗效力评价等提供了重要依据。
- 王慧娟张陵林谭文杰周为民严伟铮彭堃阮力
- 关键词：SARS-COVIGG抗体酶联免疫吸附实验
- 狂犬疫苗与白细胞介素2联合免疫小鼠的实验研究被引量：5
- 1997年
- 组织培养制备的狂犬病毒灭活疫苗与重组白细胞介素２同时免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠和Ｓｗｉｓｓ鼠，检测不同时间的鼠血清中抗病毒ＩｇＧ抗体和中和抗体效价。结果显示：在白细胞介素２的作用下，抗体产生的时间提前，抗体效价提高（Ｐ＜０．０１），ＢＡＬＢ／ｃ鼠和Ｓｗｉｓｓ鼠比较，前者的抗体效价更高（Ｐ＜０．０１）。狂犬疫苗与白细胞介素２联合免疫后ＮＫ细胞杀伤活性显著提高，达５１．３７％（Ｐ＜０．０１），特异性细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）活性的二次反应显著加强（Ｐ＜０．０１）。
- 刘劲松陆虹陆虹李燕邹全明周为民崔景辉伊纯德宋绍勇
- 关键词：狂犬疫苗白细胞介素2细胞免疫
- Epstein-Barr病毒壳抗原的纯化及其在检查血清抗体中的应用
- 1997年
- 为了建立纯化Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ（ＥＢ）病毒壳抗原（ＥＢＶ－ＶＣＡ）的方法，用于酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测人血清中的相关抗体，我们用重组昆虫病毒在感染的ｓｆ９细胞中表达ＥＢＶ－ＶＣＡ。感染的细胞经裂解后，层析纯化表达产物。用纯化的ＶＣＡ作为抗原包被ＥＬＩＳＡ板或硝基纤维膜，检查血清中ＶＣＡ／ＩｇＡ和ＶＣＡ／ＩｇＧ抗体，为ＥＢＶ感染的检测和ＮＰＣ的诊断发展了一个敏感、特异和简便的方法。
- 周为民谷淑燕
- 关键词：血清学诊断EB病毒ELISA
- SARS-CoV N蛋白与人冠状病毒HCoV-OC43和HCoV-229E的交叉反应表位及特异表位的确定被引量：1
- 2006年
- 为确定SARS-CoV N蛋白的特异抗原表位，对3种人冠状病毒SARS-CoV、HCoV-OC43和HCoV-229EN蛋白之间的交叉免疫反应进行了系统研究。构建了分别表达SARS-CoV、HCoV—OC43和HCoV-229EN蛋白的重组痘苗病毒，并制备了相应的小鼠免疫血清。用间接免疫荧光方法，检测了3种N蛋白的表达及其与3种冠状病毒免疫动物血清和SARS病人恢复期血清之间的反应。与此同时，用Western blot方法分析了原核表达的39个不同区段的SARS-CoVN蛋白与3种冠状病毒动物免疫血清和SARS病人恢复期血清之间的交叉反应性。免疫荧光检测结果表明，SARS-CoV、HCov-OC43和HCoV-229E3种病毒的N蛋白在重组痘苗病毒感染的HeLa细胞中均可以特异表达；3种N蛋白之间存在明显交叉免疫反应。Western blot结果显示，SARS-CoV N蛋白的表位主要位于30～60aa、170～184aa、301～320aa和360～422aa；与HCoV-OC43的交叉反应表位主要位于30～60aa、90～120aa、204～214aa和320～360aa；与HCoV-229E的交叉反应表位主要位于30～60aa、150～160aa和301～360aa。含SARS-CoVN蛋白特异表位的重组肽N155b（60～214aa）和N185（30～214aa）只与SARS病人恢复期血清和灭活SARS-CoV免疫小鼠的血清反应，而不与灭活HCoV-OC43和HCoV-229E免疫的山羊血清产生交叉反应。上述结果为使用SARS-CoVN蛋白抗原进行特异诊断试剂的研究，提供了重要的实验依据。
- 闫克夏谭文杰张相民王慧娟张陵林周为民夏宁邵阮力
- 关键词：SARS-COVN蛋白抗原表位
- 人源抗严重急性呼吸综合征(SARS)病毒基因工程抗体的初步研究被引量：9
- 2003年
- 严重急性呼吸道综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)或称传染性非典型肺炎,已严重威胁人民健康和生命安全。快速研制一种可用于紧急预防SARS病毒感染的基因工程抗体预防制剂迫在眉睫。为此,运用噬菌体表面呈现技术,从多个SARS病人恢复期血中获得淋巴细胞,通过基因工程手段,构建了人源抗SARS病毒基因工程抗体文库,并筛选获得37株特异抗SARS病毒基因工程Fab抗体,其中11株人源抗体结合基因工程重组的SARS病毒核(N)蛋白,其中的1株在Westernblot分析中与SARS病毒结合,识别SARS病毒N蛋白线性位点。对所获抗体的功能鉴定及基因分析正在进行中。人源抗SARS病毒基因工程抗体的获得,将对SARS疾病的特异性预防,治疗和诊断提供新的途径。
- 杜润蕾于建石梁米芳刘琴芝李川韩露露段淑敏周为民张全福王涛毕胜利李德新
- 关键词：严重急性呼吸综合征SARS病毒基因工程抗体FAB抗体抗体库
- 中国首例输入性中东呼吸综合征冠状病毒结构基因与附属基因的序列分析被引量：9
- 2015年
- 针对中国首例实验室确诊输入性MERS-CoV感染病例,采用鼻咽拭子样品进行核酸提取、基因扩增与测序,获得MERS-CoV_ChinaGD01结构蛋白与附属蛋白编码基因,包括S基因、E基因、M基因、N基因、ORF3、ORF4a、ORF4b、ORF5和ORF8b基因序列。根据S基因进化分析发现中国输入性病例中MERS-CoV虽有少数位点变异,但仍与近年沙特流行株相近,属于MERS-CoV亚型5,N、E、M等结构基因核苷酸变异较少。附属蛋白进化分析表明:ORF3、ORF4a、ORF4b、ORF5均有一定的核苷酸替换,而ORF8b相对保守。总之,中国首例输入性MERSCoV与已发表序列相比总体表现为保守,但在部分基因序列上有一定的变异。这是中国首例输入性MERS-CoV的第一次基因分析结果报道,可为该MERS-CoV感染特点的进一步研究及相关疾病的防控提供参考。
- 陆柔剑邹丽容王延群赵彦杰周为民武婕王文玲武桂珍柯昌文谭文杰
- 关键词：冠状病毒进化分析
- 表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒的初步应用
- 2012年
- 目的:制备表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒,并初步探讨其应用。方法:构建制备表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒RVJ11LacZ-I1LGFP;分别利用药物昔多福韦与抗痘苗病毒高效价免疫血清,建立基于该病毒的荧光生成抑制实验及荧光减数中和实验。结果:荧光生成抑制实验与传统的噬斑生成抑制实验相比,结果一致,但判读更直接快速;重组痘苗病毒RVJ11LacZ-I1LGFP亦可用于体外快速高通量评价正痘病毒疫苗的中和能力。结论:利用表达绿色荧光蛋白的重组痘苗病毒建立了直接简便快速高通量的抗痘病毒药物筛选及体外中和评价技术。
- 邓瑶孟昕张相民陈红周为民王惠娟阮力谭文杰
- 关键词：重组痘苗病毒绿色荧光蛋白
