吴喜林
- 作品数：10 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南京大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金江苏省产学研联合创新资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人CCR5基因真核表达质粒的构建及其鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:构建人CCR5基因的真核表达质粒并对其进行功能鉴定。方法:PCR扩增人CCR5基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1内,构建含人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5。使用RT-PCR、流式细胞术和HIV假病毒感染实验的方法,鉴定CCR5在真核细胞中的表达和功能。结果:克隆的人CCR5基因与GenBank中已登记的基因序列100%同源。瞬时转染真核细胞后,RT-PCR在预期的位置检测出目的条带,流式细胞术检测到约25.6%的细胞表达CCR5蛋白,且该蛋白能介导HIV假病毒的感染。结论:成功构建了含人CCR5基因的真核表达质粒。
- 程林宋红勇吴喜林吴稚伟
- 关键词：CCR5基因质粒真核表达人类免疫缺陷病毒
- 用于诱导特异性抗体和细胞免疫的DNA基序化合物和方法
- 本发明涉及应用免疫技术和医药领域。更具体地说，它涉及DNA基序疫苗设计、糖‑DNA基序疫苗设计和免疫原设计，用于产生针对任意序列的表位或多糖表位，特别是否则很难诱导抗体的那些表位，例如HIV‑1的表位的抗体。本发明还涉及...
- 陈志伟吴喜林吴稚伟
- 文献传递
- 抗CD19抗体及其应用
- 本发明涉及一种抗CD19纳米抗体，包括3个互补决定区CDR1‑3，序列分别如SEQ ID NO:1‑3所示本发明针对B细胞恶性肿瘤进行纳米抗体药物开发，通过制备人CD19蛋白、免疫羊驼、利用噬菌体库展示纳米单抗的平台技术...
- 吴喜林吴稚伟王宏伟
- gp120蛋白多肽抗体的设计、制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的:设计多肽免疫原,制备针对中国流行株B'亚型人类免疫缺陷病毒一型(HIV-1)gp120蛋白的抗血清和相应单克隆抗体。方法:通过蛋白抗原设计,设计出免疫原多肽,将多肽欧联载体蛋白免疫小鼠,制备小鼠多克隆抗血清和单克隆抗体;用ELISA实验、蛋白免疫印迹鉴定其活性和表位。结果:成功制备了能结合gp120蛋白的小鼠多克隆抗血清,并且获得4株分泌特异性抗免疫原的IgG1亚型的单克隆细胞株。结论:蛋白抗原设计是成功的,该多肽能诱导结合蛋白的抗体,有可能成为针对艾滋病病毒中国流行株的多肽疫苗。
- 吴喜林刘忠程林吴稚伟
- 关键词：人类免疫缺陷病毒多肽抗体
- 靶向诱导GPG抗体及基序免疫概念论证
- 目前HIV疫苗研发的主要障碍之一是病毒膜蛋白的高度突变。从感染者体内筛选的抗血清和通过免疫诱导的抗血清的表位大多是针对具较高免疫原性的高突变的氨基酸区域,很难获得针对高度保守但弱免疫原性区域的表位抗体。位于HIV-1膜蛋...
- 吴喜林
- 关键词：HIV-1疫苗
- 文献传递
- HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4
- 2017年
- 目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。
- 楚鹰宫祥丹高建伟苏艾荣陈德燕宋红勇吴喜林吴稚伟
- 关键词：单克隆抗体
- 稳定表达人CCR5基因CHO细胞系的建立及鉴定被引量：1
- 2012年
- CC型趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1感染机体所需的最重要的辅助受体和潜在的抗病毒药物靶点之一.将含有人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5稳定转染CHO-K1细胞,G418筛选2周后,在96孔板内通过有限稀释法培养细胞单克隆,最后得到22个细胞克隆,用流式细胞术检测细胞表面CCR5蛋白,发现克隆10能够高表达人CCR5基因.使用RT-PCR鉴定克隆10CCR5基因转录情况,结果在预期的位置检测出目的条带.采用细胞ELISA的方法进一步鉴定克隆10细胞表面CCR5的表达,结果该克隆的405nm光密度值是对照组的13.6倍.结果表明,本研究建立的稳定转染人CCR5的CHO细胞系能够高效表达CCR5基因,为研究HIV-1共受体、筛选病毒中和抗体、以及抗病毒药物奠定了基础.
- 程林吴喜林袁钟平吴稚伟
- 关键词：稳定转染人类免疫缺陷病毒
- 可识别和中和MERS-CoV的多肽NbM14及其应用
- 本发明涉及一种可识别和中和MERS‑CoV的多肽NbM14，包括3个互补决定区CDR1‑3，序列如SEQ ID NO:1‑3所示。本发明针对MERS‑CoV进行纳米抗体药物开发，通过制备MERS‑CoV S蛋白、免疫双峰...
- 吴喜林朱林静吴稚伟
- 抗CD19抗体及其应用
- 本发明涉及一种抗CD19纳米抗体，包括3个互补决定区CDR1‑3，序列分别如SEQ ID NO:1‑3所示本发明针对B细胞恶性肿瘤进行纳米抗体药物开发，通过制备人CD19蛋白、免疫羊驼、利用噬菌体库展示纳米单抗的平台技术...
- 吴喜林吴稚伟王宏伟
- 文献传递
- 具有更长血浆半衰期的抗CD4纳米抗体及其应用
- 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种具有更长血浆半衰期的抗CD4纳米抗体，包括CD4靶向结构域和HSA靶向结构域；所述CD4靶向结构域包括3个互补决定区CDR1‑3，序列依次为SEQ ID NO:1‑3所示；所述HSA...
- 吴喜林吴稚伟朱林静
