刘晓东
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫控制重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金南京农业大学SRT基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪瘟病毒E2亚单位蛋白与集落刺激因子的融合表达及其免疫效果分析
- 优化了工程菌BL21-E2 A/D-GM-CSF(含有783 bp的E2 A/D-GM-CSF融合基因)的原核表达条件,结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为4 h和0.8 mmol/L。在此基础上,大量...
- 倪莅文刘珂夏叶罗丽双刘晓东桂红兵庞然周斌陈溥言
- 关键词:猪瘟病毒E2基因集落刺激因子免疫增强弱毒疫苗
- 文献传递
- PK-15细胞膜蛋白提取方法的比较及猪瘟病毒膜表面受体的初步鉴定
- 以猪肾细胞(PK-15)为材料,比较真核细胞膜蛋白提取试剂盒、超声破碎法、反复冻融法、低渗裂解法4种不同方法对PK-15细胞膜蛋白提取的影响,结果表明,通过超声破碎的膜制备方法提取的PK-15细胞膜蛋白较理想。用此方法提...
- 周斌刘晓东王凤鹃刘珂陈溥言
- 关键词:猪瘟病毒膜蛋白表面受体
- PK-15细胞膜蛋白提取方法的比较及猪瘟病毒膜表面受体的初步鉴定被引量:3
- 2011年
- 以猪肾细胞(PK-15)为材料,比较真核细胞膜蛋白提取试剂盒、超声破碎法、反复冻融法、低渗裂解法4种不同方法对PK-15细胞膜蛋白提取的影响,结果表明,通过超声破碎的膜制备方法提取的PK-15细胞膜蛋白较理想。用此方法提取PK-15细胞膜蛋白,经SDS-PAGE后转印NC膜,利用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA)鉴定CSFV病毒的细胞受体。结果发现,PK-15细胞膜上有3种能与CSFV结合的蛋白质,分子量在90~100 ku之间,暗示这些蛋白可能是CSFV受体或者受体复合物。
- 周斌刘晓东王凤鹃刘珂陈溥言
- 关键词:PK-15细胞猪瘟病毒受体
- 猪瘟病毒E2亚单位蛋白与集落刺激因子的融合表达及其免疫效果分析被引量:2
- 2009年
- 优化了工程菌BL21-E2 A/D-GM-CSF(含有783 bp的E2 A/D-GM-CSF融合基因)的原核表达条件,结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为4 h和0.8 mmol/L。在此基础上,大量诱导表达融合蛋白后经Ni-IDA蛋白质层析柱纯化,Western-blot鉴定纯化蛋白具有抗原活性。将融合蛋白与福氏佐剂制成亚单位疫苗后免疫试验小鼠,并与E2 A/D蛋白、猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)进行免疫效果比较,结果显示E2 A/D-GM-CSF亚单位疫苗免疫小鼠后能够产生抗猪瘟抗体,并且抗体水平明显高于E2-A/D免疫组和HCLV免疫组。研究表明GM-CSF经融合表达后对E2-A/D蛋白有显著的免疫增强作用。
- 倪莅文刘珂夏叶罗丽双刘晓东桂红兵庞然周斌陈溥言
- 关键词:猪瘟病毒E2基因粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子免疫增强