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小鼠胚胎培养在新建体外受精实验室的质量控制验证被引量：2: 2014年; 目的:通过小鼠胚胎的生长情况,对新建体外受精(IVF)实验室的质量控制进行验证,为人类辅助生殖技术的开展提供理论依据。方法:将体内与IVF方式得到的2细胞期胚胎放入不同培养箱中培养,观察胚胎生长情况。结果:IVF得到的2细胞期胚胎放入1、2、3号培养箱中培养,114h后囊胚形成率分别为85.44%、90.99%和89.93%,3者之间差异均无统计学意义(P>0.05)。体外受精得到的2细胞期胚胎放入2号培养箱中培养,114h后囊胚形成率为93.85%,与体内受精的2号培养箱的囊胚形成率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3种培养箱均可运用于该实验室,该实验为人类辅助生殖技术的开展提供了可靠的基础。; 刘云李峰陈小芳王妍妍胡杰胡嘉波; 关键词：小鼠胚胎培养箱体外受精囊胚率

psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒的构建及在真核细胞中的表达被引量：2: 2013年; 目的:以psiCHECK-2质粒为骨架,构建带有远红外荧光蛋白mLumin和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的双荧光蛋白报告基因质粒psiCHECK-2-eGFP-mLumin。方法:PCR扩增mLumin和eGFP基因片段,分别取代海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶插入psiCHECK-2质粒中,构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因重组质粒mLumin。通过测序验证插入序列,并将此质粒转入HEK293T细胞,分别用PCR和荧光显微镜鉴定eGFP和mLumin在细胞中的表达。结果:DNA测序结果证实连接在psiCHECK-2质粒上的eGFP和mLumin基因序列与基因库中的序列一致。将psiCHECK-2-eGFP-mLumin质粒转染HEK293T细胞,能成功表达eGFP和mLumin蛋白。结论:成功构建psiCHECK-2-eGFP-mLumin双荧光蛋白报告基因质粒,且可在真核细胞中表达。; 潘晓园吴卫疆刘云张苗苗刘霞杜凤移夏圣邵启祥; 关键词：增强型绿色荧光蛋白

不同时期和不同来源鼠胚玻璃化冷冻效果的比较被引量：3: 2013年; 目的:比较不同时期、不同来源的鼠胚玻璃化冷冻的存活率以及发育为囊胚的成功率。方法:采用体外受精和体内受精的方式得到小鼠的2、4、8细胞期胚胎,对其进行玻璃化冷冻、解冻,观察胚胎的存活与囊胚形成,以未冷冻的胚胎作为对照组。结果:由体外受精和体内受精获得的2细胞期胚胎在冷冻复苏后的存活率分别为70.67%、72.06%,囊胚形成率分别为65.33%、67.62%;4细胞期胚胎冷冻复苏后的存活率分别为88%、89.71%,囊胚形成率分别为81.33%、83.82%;8细胞期胚胎冷冻复苏后的存活率分别为93.33%、94.12%,囊胚形成率分别为92%、94.12%。和对照组相比,2细胞和4细胞期胚胎冷冻复苏后囊胚形成率差异有统计学意义(P<0.05),而8细胞期的胚胎差异无统计学意义(P>0.05)。不同时期胚胎冷冻复苏后囊胚形成率间差异有统计学意义(P<0.05),受精方式对处于同一时期的胚胎在冷冻复苏后存活率和囊胚形成率均无明显影响。结论:玻璃化冷冻可以作为小鼠胚胎保存的有效方法,相对2、4细胞期胚胎,冷冻效果最好的是8细胞期胚胎。; 刘云胡杰陈小芳殷朝晖糜戊煊胡嘉波; 关键词：玻璃化冷冻体外受精小鼠胚胎

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刘云