鲜思美 作品数:108 被引量:366 H指数:12 供职机构: 贵州大学动物科学学院 更多>> 发文基金: 贵州省科学技术基金 贵州省科技计划项目 贵州省农业攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 医药卫生 更多>>
贵州一起南江黄羊地方性鼻内肿瘤的病理学观察 引言羊地方性鼻内肿瘤(Enzootic nasal tumor,ENT)又称传染性鼻内肿瘤、传染性鼻内腺癌或者传染性乳头状瘤,是由绵羊肿瘤病毒(Enzootic nasal tumor virus of sheep,EN... 包细明 李鹏飞 冯将 张益 李婷 鲜思美番鸭细小病毒、鸭瘟病毒与沙门菌混合感染的诊断 被引量:5 2012年 番鸭细小病毒病(Muscovyducklingparvovi—rosis,MDPVs)又称3周病,是由番鸭细小病毒(Mus—covyDuckparvovirus,MDPV)引起,以1-3周龄雏番鸭为易感的一种急性传染性病毒病。临床以腹泻、呼吸困难、脚软、渗出性肠炎为主要症状,其致死率达50%-80%。 鲜思美 汪德生 王春文关键词:番鸭细小病毒病 鸭瘟病毒 沙门菌 传染性 雏番鸭 辣木叶提取物对蛋鸭抗氧化、脂质代谢及免疫功能的影响 被引量:12 2020年 为研究饲粮中添加不同水平的辣木叶提取物对蛋鸭抗氧化性能、脂质代谢及免疫功能的影响,试验选用25周龄体况健康、体重相近的金定鸭480只,随机分成4组,每组5个重复,每个重复24只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加1、1.5 g/kg和2 g/kg辣木叶提取物的饲粮。试验期63 d。结果显示:(1)与对照组相比,1.5、2 g/kg组血清和蛋黄中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增强,1.5 g/kg组血清和蛋黄SOD活性分别提高了17.3%和30.2%,2 g/kg组血清和蛋黄SOD分别提高了31.1%和43.9%(P <0.05);与对照组相比,2 g/kg组血清和蛋黄中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高,分别提高了14.2%和15.5%(P <0.05),蛋黄中丙二醛(MDA)含量显著降低,降低了16.6%(P <0.05)。(2)与对照组相比,1.5、2 g/kg组血清和蛋黄中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量显著提高,1.5 g/kg组血清和蛋黄HDL-C含量分别提高了17.1%和9.2%,2 g/kg组血清和蛋黄HDL-C含量分别提高了26.1%和20.9%(P <0.05);2 g/kg组蛋黄中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)含量显著降低,分别降低了14.3%和15.9%(P <0.05)。(3)与对照组相比,1.5、2 g/kg组十二指肠s IgA含量分别增加了41.8%和65.6%(P <0.05),2 g/kg组血清IgG、IgA、IgM含量显著增加,分别增加了16.5%、47.5%和35.4%(P <0.05)。综上所述,饲粮中添加辣木叶提取物可以改善血清和蛋黄抗氧化性能、调节脂质代谢和增加蛋鸭免疫球蛋白的分泌量,以添加量为2 g/kg时效果最佳。 饶体宇 吴伯梅 鲜思美 张友 包涛涛 杨倩关键词:蛋鸭 抗氧化性能 脂质代谢 免疫功能 一株鸭源沙门菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性研究 被引量:1 2022年 为了获得鸭源沙门菌噬菌体,本研究以鸭源沙门菌为宿主菌,采用双层琼脂平板法从污水样品中分离纯化得到1株鸭源沙门菌噬菌体,对噬菌体的效价、形态、最佳感染复数(MOI)、酸碱耐受性、热稳定性进行测定,绘制了一步生长曲线,并进行了体外抑菌试验。结果显示,分离到1株鸭源沙门菌噬菌体,将其命名为BpS。该噬菌体能高效裂解鸭源沙门菌菌株,在菌苔表面形成清晰透亮、直径约为1.5 mm的圆形噬菌斑;效价为1.10×10^(10)pfu/mL;电镜观察噬菌体BpS直径约为100 nm,尾部直径约为20 nm,长约125 nm,属于有尾病毒目、肌尾病毒科;最佳感染复数为0.01;在pH为6.0~9.0时具有较高的抵抗力;温度低于50℃时存活率为80%以上;潜伏期和裂解期分别为20 min和70 min;体外抑菌试验表明,BpS可以在3 h内有效抑制沙门菌的生长。结果表明,噬菌体BpS裂解效果较好、特异性强,在生产中具有防治耐药鸭源沙门菌的潜力,有望成为防控耐药沙门菌的抗生素替代产品。 顾庆林 包涛涛 鲜思美 包细明 张友 杨倩 梁倩 郑维豪关键词:沙门菌 噬菌体 生物学特性 羊口疮病毒大足株的分离鉴定 被引量:2 2019年 本研究旨在了解重庆地区羊口疮病毒(orf virus,ORFV)流行情况。从重庆大足等地区羊场采集18份临床疑似羊口疮病料,提取病料DNA,经PCR鉴定为ORFV阳性;将阳性病料做常规处理,接种羔羊睾丸细胞(LT),并盲传至5代,观察接毒LT细胞病变,将F5代细胞培养物进行间接免疫荧光试验(IFA)、PCR扩增、测序、同源性比对、遗传进化分析和TCID 50测定。结果显示,经PCR检测,18份疑似羊口疮病料ORFV核酸阳性率为61.1%(11/18);大足株病料接种LT细胞36 h后,长梭型细胞变圆、融合、呈拉网状、皱缩,72 h后大部分细胞脱落;间接免疫荧光试验在显微镜下观察到细胞浆中出现特异性绿色荧光,且荧光绕核分布;F1至F5代细胞培养物经PCR扩增出特异性目的条带,大小为1137 bp;将测序结果与GenBank中19株ORFV B2L基因进行同源性比对,其核苷酸同源性在97.9%~100%之间,与美国SA00分离株同源性达100%,且遗传进化分析显示处于同一进化分支,亲缘关系较近;测定F5代细胞培养物TCID 50值为10-5.68/0.1 mL,在细胞中能稳定增殖。综上所述,本研究成功分离并获得1株ORFV,为后续ORFV研究提供了生物材料,同时为防控重庆地区的羊口疮奠定基础。 李鹏飞 张友 鲜思美 李婷 李婷 张益 张益 吴伯梅关键词:遗传进化分析 市售5种消毒剂对舍饲鸭场的杀菌效果评价 2021年 为了解贵州省某舍饲鸭场环境中菌落分布情况以及市售五种常用消毒剂(苯扎溴铵、月苄三甲氯铵、复方戊二醛、戊二醛癸甲溴铵、聚维酮碘)的灭菌效果,采集鸭场空气、粪便、垫料、饮水样本进行菌落总数测定。分别配制最小杀菌浓度的苯扎溴铵、月卞三甲氯铵、复方戊二醛及戊二醛癸甲溴铵4种消毒剂,采用雾线、喷洒消毒方式对舍饲鸭场空气、漏缝地板、料槽、蛋框及运输车车轮进行现场消毒;配制最小杀菌浓度的聚维酮碘,采用涂抹方式对鸭蹼部皮肤进行涂抹消毒;最后分别测定鸭场空气、漏缝地板、料槽、蛋框、运输车车轮及鸭蹼样本消毒前后的菌落总数并计算5种消毒剂对细菌的杀菌率。结果显示:舍饲鸭场空气菌落总数为3.79×10^(4)CFU/m^(3),超出NY/T 388-1999畜禽场环境质量标准规定数值(25000 CFU/m^(3));粪便菌落总数为2.67×10^(7)CFU/g,超出GB18596-2001畜禽养殖业污染物排放标准规定数值(1.03×10^(6)CFU/g);垫料菌落总数为3.7×10^(6)CFU/g,超出NY/T1167-2006畜禽场环境质量及卫生控制规范规定的清洁土壤数值(5×10^(4)CFU/g);饮水菌落总数为12 CFU/mL,符合GB 5749-2006生活饮用水卫生标准(100 CFU/mL)。5种消毒剂对鸭场进行现场消毒试验,复方戊二醛对漏缝地板、蛋框、运输车车轮的细菌杀菌率最高,分别为96.78%、81.31%、87.5%;戊二醛癸甲溴铵对鸭舍空气、料槽的细菌杀菌率最高,分别为34.85%、74.35%;聚维酮碘对鸭蹼部皮肤细菌杀菌率为72.45%;4种消毒剂对漏缝地板、料槽、蛋框、运输车车轮消毒效果良好,对空气的消毒效果不理想;聚维酮碘对鸭蹼部皮肤消毒效果不理想。结果表明:该舍饲鸭场存在大量超过国标菌落总数的安全隐患,通过对该鸭场微生物菌落计数及现场消杀试验,在一定程度将菌落总数控制在了合理范围。研究结果为掌握舍饲鸭场微生物菌落分布情况,制定舍饲� 尹锶瑶 吴伯梅 鲜思美 包涛涛 杨倩 张友 顾庆林 梁倩 龙婷婷 周飘 李召仁关键词:微生物菌落 消毒剂 杀菌效果 羊口疮病毒B2L、F1L截短融合基因的构建及生物信息学分析 被引量:1 2022年 为了构建羊口疮病毒(Orf virus,OrfV)B2L-F1L截短融合基因,并对该基因序列进行生物信息学分析,试验采用DNAStar生物信息学软件分别对B2L、F1L基因序列进行分析,截取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,分别设计引物,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术对截取的B2L、F1L基因主要抗原区域进行融合,并与pMD-18T载体连接,构建重组质粒pMD18-T-B2L-F1L,经PCR鉴定、双酶切和测序验证正确后,应用生物信息学在线软件对B2L-F1L截短基因编码的蛋白质进行信号肽、跨膜结构、亲疏水性、柔韧性、抗原指数、抗原决定簇、糖基化结合位点、磷酸化结合位点、二级结构和三级结构进行预测。结果表明:构建的B2L-F1L截短融合基因大小约为1080 bp,与预期目的片段大小相符;该蛋白有信号肽、无跨膜结构域,亲水性、抗原指数及柔韧性较好,有17个抗原决定簇,2个糖基化结合位点和28个磷酸化结合位点,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲占比较大。说明试验成功构建出羊口疮病毒B2L-F1L截短融合基因。 付强 梁倩 鲜思美 包涛涛 杨倩 顾庆林 郑维豪 杜鹏 青成欣关键词:羊口疮病毒 SOE-PCR 生物信息学分析 山羊IL-2基因SYBR GREEN Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:3 2016年 为建立山羊IL-2基因SYBR GREEN I实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中山羊见-2基因(登录号:KT934548),设计1对特异性引物,用于扩增目的基因,并将目的基因克隆于pMD-19-T载体,转化至大肠杆菌DH50L,经质粒PCR及序列测定鉴定后获得阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR GREEN I RTFQ-PCR标准曲线和溶解曲线,进行特异性、重复性和敏感性试验。并应用所建立的方法,检测ConA刺激健康山羊PBMC后0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h、24h和48h不同时间点IL-2基因转录的动态变化。结果表明,当质粒标准品稀释度在7.2×10^9-7.2×10^5copies/μL扩增曲线的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数为一0.996;熔解曲线为特异性单峰,组内变异系数为0.306%~1.458%,组间变异系数为0.514%~1.191%,最低检测限为7.2×10^2copies/μL。山羊IL-2基因的mRNA转录量在0~2h呈现上升趋势,在2h达到峰值,2-6h呈现下降趋势。6~12h未能检测到IL-2基因的mRNA转录;12~48h检测到IL-2基因的mRNA转录量呈逐渐上升趋势。研究结果将为山羊IL-2基因的定量分析提供技术平台。 李婷 丁尊俄 鲜思美 黄佑洪 刘嫒 冯将 李鹏飞关键词:山羊 实时荧光定量RT-PCR SYBR 犬瘟热诊断方法研究进展 被引量:7 2004年 概述了犬瘟热的细胞生物学与分子生物学诊断方法。在细胞生物学方面,对犬瘟热的诊断主要依靠病毒分离培养、动物回归实验、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查、包涵体检查等。随着分子生物学的发展,对犬瘟热的诊断从细胞水平发展到分子水平,国内外相继建立起CDV核酸杂交和RT PCR诊断法,这些方法比传统诊断法具有更高的敏感性和特异性,尤其在犬瘟热的发病早期,机体尚未产生免疫应答时RT-PCR诊断法便能够作出早期诊断。 徐在品 张登祥 鲜思美 陶玉顺 吴彤关键词:犬瘟热 细胞生物学 分子生物学 核酸杂交 RT-PCR 免疫应答 鹅细小病毒与番鸭细小病毒差异分析及鉴别诊断方法研究进展 被引量:2 2013年 鹅细小病毒和番鸭细小病毒在大小、形态、理化特性、核酸类型、基因组结构等方面非常相似,而且两种疫病的流行病学、临床症状、病理变化也非常相似;两者的抗体也有一定的交叉保护性,用常规的血清学检测方法很难将这两种病毒区分。本文对鹅细小病毒和番鸭细小病毒的基因组结构和病毒编码的蛋白进行了比较分析,概述了两种病毒在基因组结构和抗原性上存在的差异,以及已经建立的鉴别诊断方法。 鲜思美关键词:鹅细小病毒 番鸭细小病毒