顾为望
- 作品数:315 被引量:1,170H指数:17
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 西藏小型猪胰岛细胞体外分离和纯化方法
- 2013年
- 的确定成体西藏小型猪胰岛细胞体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛细胞。方法对比不同质量浓度的胶原酶(1mg/ml,2mg/ml,3mg/ml,4mg/m1)和同一质量浓度不同时间点(0min,15min,30min,45min,60min,75min,90min)分离获得胰岛细胞的数量和效果;使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心和静置4种方法纯化胰岛细胞悬液,比较最终收集到的胰岛细胞数量和效果;用DTZ染色计算胰岛细胞的纯度;用AO/PI染色计算胰岛细胞存活率。结果确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛细胞的最佳时间,胶原酶lmg/ml和2mg/ml组为45min,3mg/ml和4mg/ml组为30min,各组在最佳时间点获得胰岛细胞的数量最多的为1mg/ml组,胰岛细胞形态完整;4种纯化方法中,收集的胰岛细胞数量由多到少依次为静置组〉Ficoll400密度梯度离心组〉离心组〉淋巴分离液离心组。经AO/PI染色后检测胰岛细胞的存活率为95.00%以上。结论在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度lmg/ml、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛细胞,Ficoll400密度梯度离心的纯化手段收集到的胰岛细胞效果最好。
- 戚文军汪亦男胡强唐华那顺巴雅尔顾为望
- 关键词:西藏小型猪胰岛细胞纯化
- 西藏小型猪与国内家猪细胞色素b氨基酸序列的比较研究
- 2009年
- 目的西藏小型猪Cyt b氨基酸序列进行分析,研究其遗传分化及其与部分国内家猪的亲缘关系。方法提取西藏小型猪的全基因组DNA,设计引物扩增Cyt b基因,测序后将碱基序列转换为氨基酸序列并进行比对分析。结果Cyt b氨基酸序列分析表明,西藏小型猪与欧洲猪有三个位点氨基酸存在着差异,其中在295位点,大部分A型西藏小型猪与欧洲猪同为缬氨酸(V),而B型和少部分A型为异亮氨酸(I)。结论显示国内家猪与西藏小型猪有很近的亲缘关系。同时西藏小型猪群体内存在分化,mtDNA控制区的结构变化与功能基因的结构变化存在相关性。
- 李洪涛肖东顾为望吴清洪袁进王万山张嘉宁
- 关键词:西藏小型猪细胞色素B氨基酸序列
- 浅谈医学生的实验动物福利教育被引量:5
- 2011年
- 中国的发展日新月异,国际影响力与日俱增,但在实验动物福利教育方面与其他发达国家甚至发展中国家相比却有较大差距,既有损我国的国际形象,又与我国的政治经济和社会文明的进步不相协调。本文针对我国目前医学院校实验动物福利教育缺失的现状,比较系统地阐述了对医学生进行实验动物福利教育的意义,并提出了加强医科学生实验动物福利教育的具体做法。
- 顾东曙汪亦男顾为望
- 关键词:医学生实验动物福利教育
- 比格犬埃立克体病病理学研究被引量:2
- 2007年
- 为了观察比格犬埃立克体病的病理学变化,用常规病理学方法,对6只人工感染埃立克体(Ehrlichia)的比格犬进行病理解剖学和病理组织学观察。结果:眼观所见最显著的病变是主要器官和皮下出血、淤血,脾、肝肿胀;病理组织学变化的主要特征是淋巴结的严重水肿,脾、肝、肺和肾的血管内及肝血管周围存在浆细胞和淋巴细胞灶性增生,皮肤表皮层变薄、皮肤皮脂腺腺泡上皮和毛囊变性坏死。比格犬埃立克体病的眼观和病理组织学变化与国外文献报道的基本吻合,不同之处是眼观病变更为明显,这可能与分离株的致病性不同有关。
- 顾为望刘世忠那顺巴雅尔马玉海曾昭智张建明李金泽
- 关键词:埃立克体病病理学观察比格犬
- 不同光照周期对雄性叙利亚地鼠垂体─性腺轴活性的影响被引量:2
- 1996年
- 两组刚成年雄性叙利亚地鼠(Mesocricetusauratus),分别饲养在人工控制的长光照(16L:8D)和短光照(8L:16D)条件下(22±2℃),处理8周后,观察到短光照组体重明显高于长光照组(P<0.01),而睾丸重量则是长光照组极显著地(P<0.001)高于短光照组。采用放射免疫检测(RIA)法观察到长光照处理组地鼠的血清LH、FSH和睾丸酮水平极显著地(P<0.001)高于短光照处理组,表明短光照条件下雄性叙利亚地鼠的睾丸萎缩和性不活跃与循环中较低的垂体、性腺激素水平有关。
- 张玉勋顾为望王红星李建军蒋东萍
- 关键词:睾丸萎缩放射免疫检测睾丸酮光照周期垂体-性腺轴
- 异基因骨髓移植存活小鼠发生“特异性”免疫耐受的研究
- 2000年
- 目的通过对异基因骨髓移植(ALLO-BMT)存活小鼠及其皮片移植的观察,以判断ALLO-BMT小鼠是否建立了特异性的兔疫耐受机制。方法(1)给A组受者CB6F1(H-2bd)小鼠注射生理盐水,给B组受者CB6F1(H-2bd)小鼠移植供者C57BL/6j(H-2b)小鼠的骨髓细胞;(2)将供者C57BL/6j(H-2b)和BALB/c(H-2d)小鼠的尾部皮片原位移植给ALLO—BMT后存活60 d以上的受者CB6F1(H-2bd)小鼠和未经任何处理的CB6F1(H-2bd)小鼠,观察100 d。结果(1)A组受者CB6F1(H-2bd)小鼠平均存活时间(10.6土1.3)d显著短于B组的受者CB6F1(H-2bd)小鼠平均存活时间(36.9±10.8)d(p<0.01)。(2)II组中进行ALLO-BMT后存活60 d以上的受者CB6F1只接受来自C57BL/6j小鼠的皮片而排斥来自BALB/c/小鼠的皮片,而I组中未经任何处理的 CB6F1小鼠排斥来自 C57BL/6j和 BALB/C /c小鼠的皮片。结论经 γ射线照射并移植有C57BL/6j
- 袁进段连宁顾为望林继红邱添武徐名衬
- 关键词:小鼠存活BMT射线照射
- 转基因兔与克隆兔高效胚胎移植体系的建立
- 2011年
- 目的建立高效的转基因兔和克隆兔的胚胎移植实验技术平台。方法通过外科手术移植的方法将受精胚胎、转基因胚胎和体细胞核移植胚胎分别移植到同步发情或异步发情的受体兔输卵管。结果移植受精胚胎、转基因胚胎和体细胞核移植胚胎的受体兔怀孕率分别为100%、66.67%、36.36%,产仔数分别为19、24及17只,仔兔的成活率分别为90.48%、92.31%、17.65%。出生仔兔与移植胚胎数的比率分别为43.75%、21.31%、8.54%。结论成功建立了高效的转基因兔和克隆兔的胚胎移植的实验技术平台。
- 李海滨田江天宋军赖良学顾为望
- 关键词:胚胎移植超数排卵克隆胚胎
- 缺氧条件下FMMU白化豚鼠和杂色豚鼠心肌线粒体形态变化比较研究
- 2002年
- 目的 比较研究在缺氧条件下FMMU白化豚鼠和杂色豚鼠心肌线粒体的形态变化。方法 将FMMU白化豚鼠和杂色豚鼠置于常压缺氧舱内分别缺氧 7d、14d、2 1d ,复制常压缺氧模型 ,分别取FMMU白化豚鼠和杂色豚鼠心肌 ,电镜下观察心肌线粒体形态的变化。结果 在同一缺氧时间 ,二者的超微结构变化程度不同 ;在不同缺氧时间 ,同种豚鼠的变化程度也不同。结论 在缺氧条件下 ,FMMU白化豚鼠心肌线粒体的变化程度较杂色豚鼠轻 。
- 曹宏卿顾为望李文军王万山袁进
- 关键词:缺氧心肌动物模型
- 慢病毒载体法制备遗传工程猴和小型猪的现状及应用前景展望
- 较小鼠等啮齿类动物而言,猴和小型猪等大型实验动物在亲缘关系上与人类更为接近,在解剖、生理生化代谢及疾病发病机制等多方而与人类更接近,使它们在复制人类疾病模型,研究疾病发病机制和新药研发等中有无可替代的应用。而制备遗传工程...
- 刘薇贾俊双唐华林晓琳袁进顾为望肖东
- 关键词:小型猪体细胞核移植
- 西藏小型猪线粒体D-loop区及微卫星多态性的遗传学分析被引量:18
- 2006年
- 目的通过分析西藏小型猪线粒体控制区(D-loop区)及微卫星位点的遗传多态性,检测西藏小型猪的遗传背景,从而为其作为实验动物提供分子生物学方面的可靠依据。方法利用特异性引物对西藏小型猪的线粒体D-loop区及10个具有多态性的微卫星位点进行扩增,割胶纯化并对线粒体D-loop区进行测序,另外采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法分离微卫星位点的等位基因。结果西藏小型猪线粒体D-loop区全序列没有多态性,微卫星位点则具有高度的遗传多态性和杂合度,分别为0.584和0.573。结论西藏小型猪线粒体基因组无多态性,证明其在母系进化和遗传上与其他猪种较为一致,本实验所用的西藏小型猪生长于一个封闭的环境,导致其微卫星位点遗传多态性的中低度水平。
- 付艳艳顾为望刘运忠彭瑾瑜常弘
- 关键词:西藏小型猪线粒体微卫星