陈松林 作品数:462 被引量:1,638 H指数:24 供职机构: 中国水产科学研究院黄海水产研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 山东省“泰山学者”建设工程项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 医药卫生 更多>>
巴氏毕赤酵母表达系统的特点及其研究进展 被引量:38 2004年 巴氏毕赤酵母表达系统具有真核生物表达的特点。本文综述了巴氏毕赤酵母菌及其表达载体的特点以及外源基因在该系统中表达存在的一些问题。 隋少飞 陈松林关键词:巴氏毕赤酵母 外源蛋白 半滑舌鳎遗传性别快速鉴定方法 本发明是一种半滑舌鳎遗传性别快速鉴定方法,包括半滑舌鳎DNA快速提取、LAMP特异引物的设计与合成、LAMP反应体系的建立、LAMP反应产物的检测及遗传性别的鉴定。利用半滑舌鳎雌性特异分子标记的序列,设计特异引物,在恒温... 陈松林 徐建勇文献传递 圆斑星鲽染色体核型分析 被引量:10 2007年 以圆斑星鲽(Verasper variegatusTemminck et Schlegel)头肾细胞为材料,采用PHA体内注射,空气干燥法制备了染色体,并对其染色体核型进行了分析。结果表明,圆斑星鲽的染色体为46条,全部为端部染色体,核型公式为:2n=48t,NF=46。在已进行过染色体核型分析的鲽形目鱼类中,只有圆斑星鲽具有该核型。 沙珍霞 陈松林 田永胜关键词:圆斑星鲽 染色体 核型 生长快成活率高牙鲆优良品系的选育方法 一种生长快成活率高牙鲆优良品系的选育方法,其技术方法包括:牙鲆育种群体的培育和生殖调控,精子冷冻技术辅助家系建立,家系的培育和标准化,数量性状的测定和分析,遗传参数估计,优良家系筛选和利用异源冷冻精子诱导牙鲆雌核发育构建... 田永胜 陈松林 邓寒 徐田军 王磊鱼类精液超低温冷冻保存的基本原理、研究现状及应用前景 被引量:14 1991年 利用低温保存生命是一项新兴的科学手段。自1949年英国Polge用甘油冷冻保存动物精液成功以来,这项技术突飞猛进。目前冷冻配子及胚胎已经应用在医学研究和畜牧业生产上。而水产生物配子(主要是精子)的冷冻保存,经过三十年的努力也取得很大成就。从现有资料看,鱼类精液冷冻保存的研究大多集中在冷水性的鲑鳟鱼类以及某些海水鱼类上,结果较为理想。而有关鲤科鱼类精液冷冻保存的研究报道尚不多。冷冻配子具有超越时空的功效,可以使不同生殖期或地理间隔的品系得以交配,性转换的个体得以自交;可以不间断地为水产遗传学及生物技术研究提供配子材料; 陈松林 刘宪亭关键词:鱼类 精液 冷冻保存 大菱鲆免疫球蛋白轻链IgL全长cDNA的分离、鉴定及表达分析 被引量:2 2010年 实验采用末端快速扩增(RACE)技术从大菱鲆脾脏cDNA文库中筛选得到了免疫球蛋白轻链IgL的全长cD-NA片段。该序列包含47 bp的5′末端非编码区(5′UTR),738 bp的开放阅读框(ORF)和202 bp 3′UTR,整个开放阅读框编码246个氨基酸。系统发生分析表明大菱鲆IgL基因与五条鰤的IgL基因起源关系最近。RT-PCR分析表明,大菱鲆IgL基因只在正常脾脏、肾脏和头肾组织中表达;IgL在大菱鲆胚胎发育细胞期就已开始表达,在大菱鲆胚胎尾芽期和体节期表达持续增强;在鳗弧菌感染大菱鲆脾脏和头肾早期均检测到IgL基因强烈表达,后期表达逐渐减弱;大菱鲆胚胎细胞(TEC)在用鳗弧菌感染48h后,IgL开始表达。这些结果均表明IgL基因在大菱鲆免疫应答中起着重要作用。 王贤丽 张玉喜 孟亮 陈松林关键词:大菱鲆 IGL CDNA RT-PCR 鲆鲽鱼类三倍体批量化生产方法 本发明涉及一种鲆鲽鱼类三倍体鱼苗批量化生产方法,包括有三倍体鱼苗的诱导方法,以及本发明方法生产的三倍体的鉴定方法和三倍体成鱼生长性能和性腺发育评价方法。本发明建立了采用低温休克批量化生产三倍体鲆鲽鱼类鱼苗的方法,确定了三... 陈松林 王磊 徐田军 刘海金 李文龙 谢明树 杨景峰 季相山 田永胜文献传递 青鳉p53基因克隆、结构分析及同源重组载体构建 被引量:10 2002年 应用“Long PCR”技术 ,用 6对 p5 3引物从青胚胎干细胞基因组DNA中扩增出 6个相互重叠的片段 ,其中最大的片段长达 4 5kb ,这 6个PCR片段覆盖了整个 p5 3基因。序列分析表明青p5 3基因长约 8 7kb ,由 11个外显子和 10个内含子组成。结构比较表明 ,青 p5 3基因在大小上与人和小鼠 p5 3基因存在较大差异。青p5 3基因的内含子 1仅为 0 85kb ,而人和小鼠p5 3基因的内含子 1则分别长达 10kb和 6kb ;青 p5 3基因的外显子 3(86bp)明显大于人和小鼠 p5 3基因的外显子 3(2 2bp) ;外显子 4 (170bp)比人 (2 80bp)和小鼠 (2 6 0bp)的外显子 4小 ;内含子 10 (3 5kb)则比人和小鼠内含子 10 (0 7kb和 0 9kb)大得多。用SVTK neo基因作正选择标记基因 ,用SVTK tk基因作负选择标记基因 ,用青 p5 3基因组片段作同源序列 ,构建了鱼类 p5 3基因同源重组载体。将此载体转染青胚胎干细胞 ,并经G4 18和Ganc药物选择后证明上述正、负选择标记基因在干细胞中能够有效表达 ,并提供对G4 18的抗性和对Ganc的敏感性。 陈松林 HONG Yun-Han Manfred SCHARTL关键词:P53 基因克隆 胚胎干细胞 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis) vasa基因的分子特征、性别二态性表达和调控区功能分析 在鱼类的生殖细胞研究中,vasa基因是一个较为理想的生殖细胞分子标记物,通过vasa基因研究原始生殖细胞(PGCs)的发生发育过程对水产种质资源的保存、濒危物种的保护以及繁殖育种具有重要的意义.本研究克隆分离了我国重要经... 黄进强 陈松林 刘洋 邵长伟 林帆 王娜 胡乔木关键词:半滑舌鳎 调控区 性别分化 VASA 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)双链RNA依赖的蛋白激酶R(PKR)基因克隆和实时定量表达分析 2013年 采用RACE方法克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)PKR基因(CsPKR),获得了CsPKR全长cDNA序列为2907bp,其中包含1959bp的开放阅读框,100bp的5′非编码区和848bp的3′非编码区。保守结构域分析显示推导的CsPKR氨基酸在N端存在两个特异的dsRBD(dsRNA binding domain dsRBD)结构域,在C端具有多个保守的激酶活性位点,包括ATP结合位点和底物配体结合位点,以及活性环结构A-loop。系统进化树分析显示鱼类、两栖类、鸟类及哺乳类的PKR具有共同的进化起源,CsPKR与牙鲆PKR的亲缘关系最为密切。荧光定量PCR结果显示,CsPKR基因在健康鱼多个组织中广泛表达,在脑中的表达最高,头肾中表达最低。经鳗弧菌和淋巴囊肿病毒分别感染后,CsPKR基因在免疫相关组织中呈现上调表达趋势,其中感染鳗弧菌12h后在血液中表达量较对照组上升了9.28倍,在感染淋巴囊肿病毒24h后,在肝脏中的表达达到最大,为对照组的9.97倍。以上结果暗示CsPKR基因在半滑舌鳎响应细菌和病毒免疫应答中起重要作用。 沙珍霞 王启龙 李敏 公光业 梁卓 陈松林关键词:半滑舌鳎 克隆 病原 基因表达分析