郝建荣
- 作品数：18 被引量：52H指数：3
- 供职机构：山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：山东省卫生厅科技基金山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- tau蛋白与Alzheimer型老年痴呆被引量：7
- 2001年
- 崔行郝建荣张月强张群业
- 关键词：TAU蛋白AO神经元纤维缠结发病机理
- 人参皂苷Rb1对NEP基因启动子活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒,探查神经内肽酶(NEP)基因启动子中与人参皂苷Rb1影响NEP启动子活性有关的位点。方法用NEP基因5'上游启动区2.4 kb片段和荧光素酶报告基因载体pGL3-basic构建NEP启动子-荧光素酶报告基因质粒pGL3-nep2.4;用Erase-a-Base System对pGL3-nep2.4质粒2.4 kb DNA插入片段5'端进行缺失,构建NEP启动子缺失体-荧光素酶报告基因质粒;用Rb1处理NEP启动子缺失体转染的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,检测双荧光素酶活性,观察Rb1对NEP启动子活性的影响。结果成功构建了含NEP启动子DNA序列的重组质粒pGL3-nep2.4。荧光素酶活性检测显示,转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性是转染pGL3-basic的13.1倍(P<0.01)。Rb1处理可使转染pGL3-nep2.4质粒的SH-SY5Y细胞荧光素酶活性增加,其是对照组的2.9倍(P<0.01);细胞荧光素酶活性检测亦显示,NEP基因上游启动区-894^-857 bp(RegionⅠ)及-100^-82 bp(RegionⅣ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的29%(P<0.01)和25%(P<0.01),-559^-534 bp(RegionⅡ)及-223^-179 bp(RegionⅢ)片段缺失后,启动子活性分别是缺失前的5.12倍(P<0.01)及1.81倍(P<0.01)。Rb1处理后,RegionⅠ、Ⅱ和Ⅲ缺失体质粒转染细胞荧光素酶活性均与对照组无统计学差异(P>0.05),RegionⅣ缺失质粒pGL3-226转染细胞荧光素酶活性也与对照组无明显差异(P>0.05),而含RegionⅣ质粒pGL3-244转染细胞荧光素酶活性则是对照组的1.61倍(P<0.01)。结论 NEP基因5'上游2.4 kb DNA片段有较强的启动子活性,Rb1能明显增加其活性。NEP基因2.4 kb DNA片段有2个正调控区(RegionⅠ和RegionⅣ)和2个负调控区(RegionⅡ和RegionⅢ),Rb1通过RegionⅣ发挥正调控作用。
- 张晓金孙高英杨玲玲郭元芳郝秀玉郝建荣毕文祥
- 关键词：人参皂苷RB1启动子
- β-AP脑损伤老化鼠认知能力和脑组化改变研究被引量：2
- 2002年
- 目的 用 β-淀粉样肽 (β- AP)损伤鼠脑胆碱能神经元 ,了解 β- AP对动物认知能力和神经元的损害及 NO在其中的作用。方法 将 β-AP2 5- 3 5定位注射至老化 1 8月龄大鼠脑右侧 Meynert核 ,观察损伤动物学习能力改变 (Y型迷宫法 )。分光光度法检测脑胆碱酯酶 (Ach E)活性 ,并用免疫组化染色法观察鼠脑一氧化氮合酶 (NOS)及凋亡相关蛋白 Bax、Bcl- 2的表达情况。结果 与对照组比较 ,脑损伤老化鼠表现学习能力及脑胆碱酯酶活性显著降低 (均 P<0 .0 1 ) ;NOS2 和 Bax在额叶皮层和海马的表达均升高 ,而 Bcl- 2表达则显著减少 (P均 <0 .0 1 )。结论 β- AP2 5- 3 5定位损伤脑Meynert核老化大鼠显示胆碱能系统损伤 ,学习能力障碍 ,NOS2 和 Bax表达增加而 Bcl- 2表达降低 ,提示损伤脑有 NO过量生成并诱导发生神经元凋亡损伤。这与 AD病人某些临床和病理特征基本一致。
- 张群业崔行谢书阳郝建荣张月强
- 关键词：ALZHEIMER病中枢胆碱能系统Β-淀粉样肽脑损伤
- Alzheimer病遗传学及转基因动物模型研究进展被引量：1
- 2002年
- 张群业崔行郝建荣张月强
- 关键词：ALZHEIMER病遗传学转基因动物模型
- Aβ和氧自由基诱导的培养神经元凋亡及维生素E的保护作用被引量：8
- 2005年
- 目的研究β淀粉样肽(Aβ)、反应活性氧(ROS)对原代培养鼠脑皮层神经细胞凋亡的诱导及维生素E(VE)可能的保护作用。方法通过形态学观察、MTT法检测、流式细胞技术分析、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫细胞化学技术研究Aβ、ROS对培养皮层神经细胞的损伤。结果经Aβ、活性氧的作用,神经细胞出现明显的凋亡特征,OD值降低,DNA电泳显示出现断裂DNA片段。凋亡细胞数增多。免疫细胞化学显示Bcl2表达下降,Bax表达增加(均P<0.05),而VE组可明显改变上述凋亡特征。结论Aβ、活性氧诱导培养皮层神经元凋亡机制可能与氧化损伤有关,维生素E能减缓这一作用。
- 谢书阳杨玲玲陈浩郝建荣姚俊英崔行
- 关键词：凋亡Β淀粉样肽活性氧维生素E
- 转染PHGPx基因对Aβ及H_2O_2诱导PC_(12)细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2004年
- 目的 观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 (PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2 O2 诱导细胞凋亡的保护作用。方法 通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC1 2 细胞 ,加入神经毒物质Aβ及H2 O2 ,采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力。结果 加入神经毒物质Aβ或H2 O2 后 ,未转染PHGPx基因的PC1 2 细胞出现凋亡的特征性形态学改变 ,电泳可见断裂的DNA片段 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降 (均P <0 0 1 )。结论 Aβ及H2 O2 能够诱导神经细胞凋亡。转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2 O2 的神经毒性 ,保护Aβ、H2 O2 所致的神经细胞损伤凋亡 。
- 付振涛杨玲玲郝建荣曾季平孔峰钟华崔行
- 关键词：AΒX基因转染PC12细胞DNA片段
- IBA损伤老化鼠脑Meynert核的AD模型动物研究被引量：3
- 2001年
- 目的 :研究定位损伤脑胆碱能系Alzheimer病 (AD)模型大鼠学习能力及相关脑神经肽免疫组化改变。方法 :用兴奋性毒素鹅膏蕈氨酸 (IBA)定位损伤大鼠脑右侧Meynert核 ,观察模型动物学习能力改变 (Y型迷宫法 ) ,并用分光光度法和免疫组化染色法观察动物脑胆碱酯酶 (AchE)活性和皮层及海马 β 淀粉样肽前体 (β APP)、生长抑素 (SOM )及P物质 (SP)的表达情况。 结果 :模型组老化大鼠经损伤后 ,学习能力及脑AchE活性显著低于对照组 (P均 <0 .0 5 )。β APP在额叶皮层和海马的表达均升高 ,而SOM表达则显著减少 ,用IBA及β AP2 5- 3 5同时损伤鼠脑时 ,可显示脑皮质区SP表达增加 (P均 <0 .0 1) ,单独用IBA注射无效。结论 :IBA损伤老化大鼠脑Meynert核建立的动物模型 ,显示胆碱能系统损伤 ,学习能力障碍 ,β APP过表达而神经肽SOM表达降低 ,一定条件下SP表达增加 ,与AD病人某些临床和病理特征基本一致。
- 王墨林崔行张群业郝建荣张月强
- 关键词：ALZHEIMER病
- Meynert核损伤老化大鼠学习能力及脑神经肽改变研究
- 2002年
- 崔行王墨林郝建荣张月强张群业
- 关键词：ALZHEIMER病
- 神经毒性物质导致的培养神经元凋亡及维生素E的神经保护作用被引量：2
- 2004年
- 目的:研究神经毒性物质β-淀粉样肽(β-AP)?N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对原代培养鼠脑皮层神经细胞的致凋亡损伤和维生素E可能的神经保护作用?方法:通过形态学观察和MTT自动比色法检测存活细胞率;用DNA电泳和流式细胞技术分析细胞凋亡率;用免疫细胞化学技术分析细胞凋亡相关基因表达?结果:经β-AP?NMDA作用后,培养神经细胞出现明显的细胞凋亡特征:存活细胞减少,凋亡细胞数增多及特征性DNA断裂带,神经细胞凋亡相关蛋白Bcl-2表达下降?Bax表达上升(均P<0.05)?加维生素E组细胞则表现以上凋亡特征减弱?结论:神经毒性物质β-AP?NMDA可诱导培养神经细胞凋亡,细胞凋亡机制与氧化损伤相关,维生素E可减缓细胞凋亡?
- 谢书阳崔行陈浩郝建荣杨玲玲付振涛
- 关键词：Β-淀粉样肽N-甲基-D-天冬氨酸维生素E
- 黑曲霉葡萄糖氧化酶在毕赤酵母SMD1168中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:在毕赤酵母SMD1168中用3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子(glyceraldehyde-3-phosphate dehygrogenase gene promoter,pGAP)表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)。方法:将黑曲霉accc30161的GOD基因插入具有pGAP的pGAPZαA质粒中,构建黑曲霉GOD毕赤酵母表达载体,并用菌落PCR、重组质粒琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切分析及测序等方法对其进行验证。然后用重组质粒电转化毕赤酵母SMD1168,并用PCR扩增分析观察转化效果,用SDS-PAGE及酶活检测观察重组酵母黑曲霉GOD的表达和活性。结果:用黑曲霉accc30161的GOD基因成功构建了GOD表达载体pGAPZαA-GOD。转化后,pGAPZαA-GOD相关DNA片段已整合进重组毕赤酵母SMD1168-GOD基因组中。SMD1168-GOD可高表达具有活性的GOD,在30℃、pH 6的条件下,其培养液上清GOD酶活可达107.18 u/mL。结论:重组蛋白缺陷性毕赤酵母SMD1168-GOD可以利用pGAP高效表达黑曲霉GOD。
- 郭元芳孙高英郝建荣彭炳银毕文祥鲍晓明
- 关键词：葡萄糖氧化酶黑曲霉毕赤酵母基因表达启动子
