程从升
- 作品数:16 被引量:72H指数:5
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 流感病毒的反向遗传学研究进展被引量:8
- 2007年
- 程从升舒跃龙张智清
- 关键词:反向遗传学流感病毒正链RNA病毒遗传学技术CDNA病毒蛋白
- 人H5N1亚型禽流感病毒安徽株NS1基因的克隆及在原核系统的表达被引量:7
- 2007年
- 利用RT-PCR方法,从人H5N1亚型禽流感病毒安徽株扩增到了NS1基因,对其进行了克隆、序列测定和分析,并在原核系统高效表达和纯化了NS1蛋白.进化分析表明,A/Anhui/01/2005毒株与近些年国内分离的水禽H5N1病毒进化关系更为接近.NS1与福建、湖南分离的禽流感病毒同源性最高,分别达到99.1%和98.2%.序列分析表明,与病毒的致病性相关的92位氨基酸为Asp,与病毒的细胞因子抗性相关的80~84位氨基酸发生缺失,与断裂/多聚腺苷酸化特异性因子结合的基序改变为GFEWN,和病毒致死性相关的PL基序为ESEV.随后在大肠杆菌高效表达并纯化了NS1蛋白.Ns1基因及其编码产物的特性分析以及在原核系统的表达,为进一步研究NS1的致病机制和抗病毒药物研制奠定了基础.
- 程从升蓝雨柳燕张智清舒跃龙姚立红温乐英王大燕王伟李希妍王琦赵新生黄晶晶聂凯张晓光
- 关键词:禽流感病毒H5N1NS1
- 抗h5n1亚型流感病毒的寡核苷酸药物筛选及其活性研究
- 本文以中国大陆分离的人h5n1亚型高致病性禽流感病毒作为研究对象,分别筛选出针对该病毒膜蛋白和内部蛋白的寡核苷酸药物,并检测了其抗病毒活性,以期为研制新型抗流感病毒药物提供新的思路。全文包括三个部分: 一、h5n1...
- 程从升
- 关键词:流感病毒H5N1血凝素寡核苷酸药物筛选
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- 质粒DNA拓扑学结构对基因疫苗生物学特性的影响
- 为了探索质粒拓扑学结构对质粒生物学性质的影响,本试验通过不同异构体形式的质粒DNA转化感受态E.coli、转染真核细胞和免疫动物,比较全面地研究了质粒拓扑学结构对质粒生物学特性的影响.
- 李作生余兴龙张茂林乔红伟程从升徐兴然扈荣良涂长春
- 关键词:质粒DNA基因疫苗生物学特性
- 文献传递
- 猪瘟DNA疫苗制备工艺研究被引量:6
- 2004年
- 猪瘟DNA疫苗制备工艺的建立是其走向产业化 ,从而在猪瘟防制中发挥作用所需解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗质粒pVAXE2IL2转化大肠杆菌后 ,转入发酵罐发酵培养。将菌体悬浮裂解和中和后 ,经澄清和浓缩处理 ,上阴离子交换色谱和体积排阻色谱进行纯化 ,首次提纯出符合药学规格的猪瘟DNA疫苗 ,且整个工艺回收率达 64 5 3% 。
- 程从升李作生余兴龙李素扈荣良江禹李尚波涂长春
- 关键词:DNA疫苗大肠阴离子交换色谱猪瘟防制发酵培养
- 质粒DNA拓扑学结构对基因疫苗生物学特性的影响被引量:3
- 2004年
- 利用不同拓扑学结构的质粒 ,分别转化 E.coli感受态细胞、转染 SK6 - 6细胞和免疫小鼠 ,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响。结果显示 ,超螺旋占 5 0 %比例的猪瘟病毒 E2基因表达质粒p CDSW转化 E.coli感受态细胞的效率比开环的 p CDSW高 8倍 ,超螺旋比例占 80 %的 p VAXE2 IL- 2质粒比酶切线性化质粒转化率高 2 2倍 ;以荧光蛋白基因为报告基因 ,超螺旋比例占 80 %的荧光蛋白真核表达质粒转染真核细胞的效率是线性化质粒的 12倍 ;以猪瘟病毒主要保护性抗原 E2基因表达质粒 ,分别制备成超螺旋和开环形式占优势的质粒 ,免疫昆明鼠 ,抗体检测结果显示 。
- 李作生余兴龙张茂林乔红伟程从升徐兴然扈荣良涂长春
- 关键词:质粒DNA基因疫苗生物学特性猪瘟病毒
- sTNFR-IgGFc融合基因在内皮细胞中的表达及其对小鼠关节炎模型的基因治疗研究被引量:5
- 2006年
- 可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)可以拮抗肿瘤坏死因子的活性,因此已被用来治疗与TNF相关的炎性疾病。本研究将sTNFR与IgGFc片段的融合蛋白基因克隆到真核表达载体pStar上,转染到人的内皮细胞中,获得了表达。表达的sTNFR-IgGFc能够拮抗TNFα对L929细胞的细胞毒活性。将该质粒DNA与脂质体混合,经尾静脉注射到Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠体内后,应用RT-PCR在鼠的肝脏检测到了sTNFR-IgGFc的表达,并显著地改善了治疗组小鼠关节炎症状和病理反应。这表明抗TNF基因治疗有可能作为治疗类风湿性关节炎的新的途径。
- 何婕姚立红陈爱君喻宏贾润清程从升郇丽芳张智清
- 猪瘟DNA疫苗在猪体及环境的生物安全性研究被引量:7
- 2005年
- DNA疫苗生物安全性是其走向临床所须解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗为研究对象 ,探讨了其两个方面的生物安全性问题。一方面 ,将两种不同的猪瘟DNA疫苗质粒免疫猪后 ,利用PCR技术分析了其与猪细胞基因组整合的可能性 ,结果在灵敏度为 30拷贝的检测条件下 ,未发现猪瘟DNA疫苗整合到细胞基因组 ;另一方面 ,以PCR技术检测了免疫现场环境样品 ,以分析猪瘟DNA疫苗上的E2基因、CMV启动子基因和抗性基因是否在环境细菌中发生转移和扩散。结果未发现DNA疫苗转化环境细菌的直接证据。因此认为DNA疫苗对猪体和环境是安全的。
- 程从升王文成李素扈荣良涂长春刘建文江禹徐兴然
- 关键词:DNA疫苗生物安全性
- 2株柔嫩艾美耳球虫对5种抗球虫药的抗药性被引量:26
- 2003年
- 选择 130只 2 1日龄雏鸡 ,研究了柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella)南京株和凤阳株对地克珠利 (Diclazuril)、马杜霉素(Maduram icin)、氯羟吡啶 (Clopidol)、氯苯胍 (Robenidine)和氨丙啉 (Amprolium)的抗药性。试验鸡随机分成 13组 ,其中每株球虫均设 5个感染用药组、1个感染不用药组 ,另外设 1个不感染不用药组 ,每组 10只鸡。以 POAA、RL S、ROP、ACI作为指标。结果表明 ,2株柔嫩艾美耳球虫均对氨丙啉轻度抗药 ,对地克珠利敏感或轻度抗药 ,对氯羟吡啶中度抗药 ,对马杜霉素和氯苯胍中度抗药或完全抗药。提示 :目前在凤阳地区可合理地使用地克珠利和氨丙啉 ,对氯羟吡啶应慎用 ,对马杜霉素和氯苯胍须减少或暂停使用。
- 金光明程从升顾有方陈会良吴齐鸿
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫抗球虫药抗药性
- 药用质粒DNA下游加工工艺研究进展被引量:2
- 2004年
- 论述了药用质粒DNA的质量要求和其下游加工工艺研究进展,并以色谱制备工艺为例,介绍了下游加工工艺中影响药用质粒DNA质量的因素。
- 程从升涂长春
- 关键词:DNA疫苗基因治疗