王玉飞 作品数:62 被引量:298 H指数:11 供职机构: 武警总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 经济管理 更多>>
耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌的耐药谱分析 被引量:3 2012年 目的了解耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的抗生素耐药情况,指导临床合理用药。方法选取中国中医研究院望京医院2008-2010年期间临床和门诊患者样本的耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌分离株,通过药敏实验分析这些菌株时15种常见抗生素的耐药性。结果从标本类型分布看,最主要的是痰液标本,共110株(88%),其次是分泌物共9株(7.2%)和2株自导管(1.6%)。从科室统计分析发现,ICU分离到的鲍曼不动杆菌数最多,68株;其次是针灸科,分离的菌株是15株;神经外科、CCU、普通外科、心内科、内分泌科、呼吸科、创伤一科,分别分离到14,11,7,4,3,2和1株。选取的125株鲍曼不动杆菌对哌拉西林、美罗培南、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/三唑巴坦、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星、妥布霉素、头孢曲松和头孢他啶耐药率高达90%以上,依次为100%。99.2%,99.2%,98.4%,96.8%,96%,96%,94.4%,93.6%,92%和91.2%。其次是氨曲南、左氧氟沙星和头孢哌酮/舒巴克坦,耐药率依次是72.8%,64%和30.4%,对多黏菌素B的耐药率最低,仅为0.8%。结论该院耐碳青霉烯抗生素的鲍曼不动杆菌对大多数种类的抗生素均有较高的耐药性,仅对少数几种抗生素表现为敏感,临床上应严格按照科学的用药方案进行抗生素使用,防治耐药性的进一步产生和院内传播。 郭洁 徐杰 王丽丽 王玉飞 苑锡铜 袁静 宋宏彬 黄留玉 张宁 陈泽良 陈永德 刘世巍关键词:鲍曼不动杆菌 耐药谱 临床用药 副溶血弧菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:8 2010年 目的建立一种快速检测副溶血弧菌的实时荧光定量PCR方法。方法根据副溶血弧菌tdh基因设计合成引物及TaqMan探针,利用阳性质粒和模拟标本建立副溶血弧菌实时荧光定量PCR检测方法。结果以副溶血弧菌DNA为模板克隆了tdh基因,得到阳性质粒。利用阳性质粒建立了定量PCR方法 ,得到标准曲线y=-4.9197x+58.72,决定系数(R2)为0.9864。此方法具有很好的特异性,在对15种肠道致病菌的检测中,只有副溶血弧菌基因组DNA的扩增结果为阳性。对粪便和食物模拟标本进行检测,敏感性均为102cfu/μl。此方法重复性较好,对4种浓度(105、104、103、102cfu/μl)的菌液各进行3次检测,结果均为阳性,且Ct值的变异系数<2%。结论建立了一种检测副溶血弧菌的荧光定量PCR方法 ,该法的敏感性和特异均较好,适用于快速、准确地检测食品和粪便中的沙门菌。 孙宏迪 杜昕颖 汪舟佳 王玉飞 宋宏彬 孙岩松 黄留玉 杨振洲 陈泽良关键词:实时定量聚合酶链反应 DNA探针 羊布鲁氏菌外膜蛋白质的组成鉴定 被引量:5 2009年 目的:通过蛋白质组技术阐明羊布鲁氏菌外膜蛋白的主要组成。方法:提取并纯化羊布鲁氏菌的外膜蛋白,应用双向电泳技术进行分离,选取双向电泳图上主要的蛋白点进行质谱分析,同时主要蛋白质点的肽指纹图谱利用Mascot在NCBInr蛋白数据库中进行检索。结果:共鉴定到67个蛋白点,主要外膜蛋白为Omp25和Omp31,其他外膜蛋白如Imp、Frp、GroEL等,功能涉及物质运输、能量代谢、应激等。结论:对主要外膜蛋白Omp25和Omp31的识别与分析不仅有助于对布鲁氏菌致病机制的研究,而且为布鲁氏菌病的疫苗研制提供靶标蛋白。 曲勍 王玉飞 徐杰 钟志军 乔凤 杜昕颖 汪舟佳 黄留玉 于雅琴 陈泽良关键词:布鲁氏菌 细菌外膜蛋白质类 双向电泳 不同种型布鲁菌标准株的比较基因组学研究 被引量:7 2013年 探究不同种型布鲁菌标准株的基因组构成差异。通过布鲁菌全基因组DNA芯片技术对19株不同种型布鲁菌标准株进行比较基因组学研究。结果显示:19株不同种型布鲁菌标准株之间存在大量缺失基因,同时发现一些基因以多拷贝形式存在。缺失基因的功能大致分为4类:信息储存和传递;胞内活动处理;营养代谢、功能未知或仅了解部分功能,共鉴定到这类基因211个。深入认识了19株不同种型布鲁菌标准株基因组组成上的差异,为我们进一步认识不同种以及亚型在毒力以及宿主特殊性提供了依据。大量缺失基因在19株布鲁菌标准株出现,构成了布鲁菌标准株不同种以及亚型之间的遗传学基础。 钟志军 徐杰 于爽 王玉飞 周冬生 黄祥明 乔凤 曲勍 杨洋 罗永久 刘学涵 原慧 陈燕芬 黄克和 陈泽良 彭广能关键词:比较基因组学 细菌RNA结合蛋白Hfq研究进展 被引量:3 2015年 Hfq蛋白是细菌中重要的转录后调控子,参与调节细菌的生长、代谢、压力环境适应能力等多种生命活动,影响细菌的多种生理代谢过程。在致病菌中,Hfq蛋白与细菌的毒力密切相关。Hfq主要通过结合RNA来影响其稳定性,或者是通过辅助非编码小RNA(sRNA)与mRNA结合来调节靶基因的表达。文章对Hfq在致病菌中的作用及寻找Hfq靶标RNA的研究方法进行了综述,以期为Hfq的功能研究奠定基础。 郭英飞 袁玖云 王玉飞 崔明全关键词:HFQ RNA结合蛋白 转录后调控 细菌毒力 急性脑出血患者血清S100B蛋白水平的临床意义 被引量:5 2017年 目的探讨急性脑出血患者血清S100B蛋白浓度及其变化的临床意义。方法选取2015-01至2016-04武警某三甲医院收治的46例急性脑出血患者为研究对象,分别采用磁微粒化学发光法和电化学发光法检测血清S100B蛋白的浓度,分析手术前后该蛋白浓度的变化,同时与30例健康体检者进行对比,评价治疗前S100B蛋白浓度与美国国立卫生研究院的卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)评分、血肿量的关系。结果 (1)磁微粒化学发光法与电化学发光法的检测结果无统计学差异(t=0.716,P=0.079);(2)与对照组相比,脑出血组入院初血清S100B蛋白水平显著升高(t=5.872,P=0.004),22例接受手术治疗患者术后S100B蛋白水平较术前显著下降(t=2.716,P=0.007),且与正常对照组相比无统计学差异(t=0.087,P=0.669);(3)血清S100B水平与患者血肿量(r=0.645,P<0.01)和NIHSS评分(r=0.529,P<0.01)呈正相关。结论 S100B蛋白在急性脑出血患者中高表达,可作为早期判断急性脑出血严重程度和治疗效果的血清标志物,为脑出血的临床诊断和预后治疗提供方向。 王瑞玲 张翠 郭晓今 孙涛 张小丽 王玉飞 杨晓莉关键词:急性脑出血 S100B蛋白 脑损伤 Wnt信号配体种类及其在骨代谢中的作用 被引量:11 2018年 Wnt信号通路是一个复杂的蛋白质作用网络,在骨质代谢病和癌症研究等方面至关重要。目前为止,该信号通路中已发现19种Wnt信号配体,它们在调控骨代谢(破骨细胞的形成和骨吸收)、细胞增殖与分化、肿瘤形成中发挥作用。本文对Wnt配体的种类以及其在骨代谢方面中的作用进行阐述,为详细了解Wnt信号通路中Wnt信号配体在骨代谢病致病机制中的作用提供参考。 肖启程 严光文 田一男 魏斌 涂蕊 但佳明 彭广能 王玉飞 钟志军关键词:WNT信号通路 骨代谢 骨吸收 骨生成 嗜肺军团菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 被引量:4 2013年 目的:建立针对嗜肺军团菌Mip基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法,并进行自来水和空调冷却水模拟标本的检测评价。方法:根据嗜肺军团菌Mip基因的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立嗜肺军团菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对方法进行灵敏度及特异性评价,并对自来水和空调冷却水模拟标本中的嗜肺军团菌进行检测。结果:建立的方法对嗜肺军团菌的检测具有高度特异性,与3种非嗜肺军团菌和6种其他呼吸道病原均没有交叉反应;基因组DNA的检测灵敏度为1.6 pg/μL,模拟自来水和空调冷却水标本的检测灵敏度为10CFU/mL。结论:建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,适于嗜肺军团菌的日常监测和暴发疫情的应急诊断。 杜昕颖 苏晓 王玉飞 龚春丽 庄妤冰 苑锡铜 陈泽良 袁静 宋宏彬 黄留玉关键词:嗜肺军团菌 荧光定量PCR TAQMAN探针 MIP基因 我国近10年布鲁氏菌病研究文献分析(英文) 被引量:12 2012年 目的分析我国近十年来布鲁氏菌的流行概况和研究水平,为我国布鲁氏菌病防控和研究提供科学依据。方法通过数据库检索近十年(2000~2010)的科技文献和数据资料,对其调研并进行统计分析。结果我国布病疫情防控及研究工作尽管取得了很大的进步,但目前布病疫情出现反弹的趋势,研究水平有待继续提高。结论我国布病疫情依然严峻,防控工作和科研水平总体上仍需加强,进而从根本上提高我国布鲁氏菌病的防治水平。 高光俊 徐杰 柯跃华 陈泽良 王玉飞 徐兴然关键词:布鲁氏菌 疫情分析 布鲁氏菌BP26基因标记疫苗株的构建及鉴别PCR方法的建立 被引量:9 2009年 【目的】由于现有的减毒活疫苗仍存在较强的毒力,因抗原与毒株的差异不大而很难区分疫苗免疫和自然感染等缺点,限制了现有布鲁氏菌减毒活疫苗的广泛应用。本文拟对布鲁氏菌的减毒活疫苗株M5进行遗传改造,克服这些缺点。【方法】本研究利用同源重组的方法,用卡那抗性基因替换了布鲁氏菌减毒疫苗株M5的BP26基因,得到了新的标记疫苗株M5ΔBP26。分别用标记疫苗株和野生株侵染巨噬细胞和感染小鼠,比较分析标记株在细胞内和小鼠体内的存活能力。根据种特异性保守基因dnaK和缺失的BP26基因设计引物,建立双重PCR,用于区分标记株与野生株。【结果】成功构建了BP26基因标记疫苗株,细胞实验和动物实验结果表明,标记株仍能在胞内和小鼠内存活,具备作为减毒活疫苗的特性。小鼠实验结果显示,感染后两周野生株的细菌数为102.9,而突变株为101.1(P<0.01),至第3周野生株的细菌数为102.2,而突变株未能检出,表明与原疫苗株相比,标记株的感染力进一步减弱。根据DNA序列的差异,建立了能够区分标记疫苗株与野生株的双重PCR方法,标记株因只能扩增出一条带而能与野生株和毒株相区分,从而可以区分自然感染和疫苗免疫。【结论】基因标记疫苗株的构建及鉴别PCR方法的建立,为布鲁氏菌疫苗的进一步研发奠定了基础。 汪舟佳 甄清 乔凤 王玉飞 杜昕颖 钟志军 赵瑾 于雅琴 黄留玉 孙岩松 陈泽良关键词:布鲁氏菌