王敬强
- 作品数：16 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国科学院北京基因组研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 嗜碱单胞菌N10细胞膜蛋白质组分析
- 嗜碱单胞菌N10(Alkalimonas amylolytica)是我国科学家分离鉴定的一种新的革兰氏阴性专性嗜碱菌。该菌的最适培养pH值为10-10.5,并需要2-3%(w/v)NaCl。嗜碱单胞菌N10在极端碱性条件...
- 王敬强孟博赵彩凤赵康王全会徐宁志马延和刘斯奇
- 文献传递
- 嗜碱菌Alkalimonas amylolytica N10在不同pH条件下的膜蛋白差异表达研究被引量：3
- 2006年
- 为了探讨嗜碱菌的嗜碱机制，对一株新型专性嗜碱菌（Alkalimonas amylolytico N10）在不同pH条件下的差异膜蛋白质组进行了初步的研究。在3种pH条件下（pH值分别为8．4、9．4和10．4）培养的该菌的膜蛋白，通过8％-20％的梯度SDS—PAGE进行分离。经胶图图像和统计计算，7条电泳条带的相对染色强度随培养液的pH值变化而改变，其中仅有一条条带强度随pH值增高而增加。这些条带经胰蛋白酶胶内消化和高效液相色谱-电喷雾离子阱串联质谱（LC—Ms／Ms）分析，共鉴定出了12种蛋白质。其中4种膜蛋白已有报道直接或间接参与细胞pH稳态的保持，其他几种蛋白则是首次发现其表达水平与生活环境的pH变化可能相关。
- 王全会王敬强钱忠刘斯奇马延和
- 关键词：嗜碱菌N10膜蛋白LC-MS/MS
- 腾冲嗜热厌氧菌热休克蛋白60及其基因表达的热激动态变化分析被引量：3
- 2006年
- 热休克蛋白60(HSP60)是细菌体内一种非常重要的分子伴侣,其可以协助蛋白质或肽链的正确折叠和构型,防止变性和降解。基于本实验室的早期观察,腾冲嗜热厌氧菌的HSP60是一个典型的温度相关蛋白质,在80℃的表达水平最高。为了进一步了解嗜热菌应急的分子机制,继续进行了在热激后HSP60基因表达的动态研究。将最适温度(75℃)下培养的腾冲嗜热厌氧菌迅速地转移至80℃继续培养,然后在不同的时间点上分别取样,并通过双向电泳、Western blot和Real_time PCR等方法,分析了HSP60在mRNA和蛋白质水平上的表达量的改变。试验结果表明,在80℃热处理4h内的短期应急过程中,HSP60蛋白水平一直呈上升趋势,而它的mRNA水平则表现为先升高后下降的一个非对称性的峰形变化。HSP60的mRNA和蛋白质的对温度的应答快慢程度是不同的。HSP60的mRNA水平的显著变化在1h内便可观察到,而蛋白质水平的显著改变要延迟3h左右。此外,HSP60的mRNA和蛋白质对温度的应答量变大小也是不同的。
- 孟博王敬强李娜马延和刘斯奇
- 关键词：热休克蛋白60腾冲嗜热厌氧菌嗜热菌
- 一种改良的Anchorchip点样方法
- Anchorchip是Bruker-Dalton公司的样品靶专利技术,它采用了微量滴定板(MTP)的工业化标准,适合大规模的样品自动化处理。在Autoflex MALDI TOF上运用Anchorchip技术,可使得样品...
- 时亮张旭敏赵康李书婷王敬强徐宁志刘斯奇
- 文献传递
- 腾冲嗜热菌蛋白质组数据库(TPB)的开发与利用
- 腾冲嗜热菌是发现于我国云南腾冲地区温泉中的一种杆状、厌氧型革兰氏阴性真细菌。其全基因组测序已经完成,大小为2,689,445bp,理论预测基因数目为2588个。在此基础上,我们开展了该菌的蛋白质组测定,力图通过全面了解高...
- 汪浩李宇驰陈晔洪星段举李涛王敬强殷剑宁刘斯奇
- 文献传递
- 腾冲嗜热厌氧菌葡萄糖激酶在不同温度下的表达和催化活性被引量：1
- 2006年
- 尽管在腾冲嗜热厌氧菌的基因组注释中缺乏葡萄糖激酶(Glucokinase,GLK)(EC 2.7.1.2),但是该菌的蛋白质表达谱分析表明,TTE0090可能是一种新型的葡萄糖激酶。利用体外克隆表达的方法,表达了重组TTE0090;此蛋白质不仅具备使葡萄糖磷酸化的催化活性,同时在高温下也能参与反应。采用Western blot和阴离子交换层析的方法进一步检验了TTE0090在腾冲嗜热厌氧菌体内的蛋白质表达及其催化活性,发现体内TTE0090蛋白表达量随温度的升高而降低,而酶比活力却与生长温度呈正相关。这可能预示不同温度下腾冲嗜热厌氧菌中的糖酵解途径的催化通量是相对恒定的。实验数据均表明,TTE0090是存在于腾冲嗜热厌氧菌中的一种新型的葡萄糖激酶。TTE0090基因和其蛋白产物的研究工作,将进一步加深人们对嗜热菌的温度适应性以及它们的生存机理的了解。
- 钱忠王敬强周传奇马延和刘斯奇
- 关键词：腾冲嗜热厌氧菌葡萄糖激酶温度糖酵解
- 腾冲嗜热厌氧菌6-磷酸果糖激酶的克隆、表达及其生物活性被引量：1
- 2006年
- 6_磷酸果糖激酶(PFK)是糖酵解途径一个关键酶。基于腾冲嗜热厌氧菌基因组中的注释,基因TTE1816可能是PFK的一种,但是,它是否确有生物活性还必须有实验数据的支持。腾冲嗜热厌氧菌在最适温度培养后,提取细菌全蛋白,并采用双向电泳将可溶性蛋白质分离,然后运用质谱鉴定若干染色斑点。实验表明,TTE1816在高温条件下能够表达蛋白质。将TTE1816基因体外克隆至细菌表达载体,并在BL_21大肠杆菌中表达为可溶性蛋白。酶动力学实验表明,重组蛋白TTE1816具有PFK的催化活性,最适反应温度在60℃。它还能够催化葡萄糖、果糖、甘露糖和6_磷酸葡萄糖的磷酸化反应。另外,在高底物浓度和酶浓度的条件下,TTE1816还表现果糖二磷酸酶的特性。结果证明,TTE1816是腾冲嗜热厌氧菌中PFK家族的一个新成员。
- 周传奇王敬强钱忠马延和刘斯奇
- 关键词：腾冲嗜热厌氧菌嗜热菌糖酵解
- 两种常见蛇毒的蛋白质组特征
- 在热带或亚热带地区,如何抢救被毒蛇咬伤的病患一直是一个棘手的医学课题。同时,蛇毒又是一个富含多种特殊功能性的蛋白质和多肽的物质,它已被若干实验或临床实践证明,是一个极具开发利用价值的生物药品。要研究蛇毒的生物学功能,首先...
- 李书婷任艳王敬强王宁张旭敏殷剑宁刘斯奇
- 文献传递
- HnRNP在多个肿瘤组织中的异常表达
- 在肿瘤生物标记物研究中,有些标记物虽然对某一类肿瘤没有特定的标示意义,但是它们在许多肿瘤中多有发现,所以,对于研究正常细胞如何癌变的机制,特别具有启迪意义。hnRNP正是这样一种标记蛋白质。很多实验都揭示,hnRNP的异...
- 张军李娜娄晓敏汪浩王敬强徐宁志刘斯奇吕有勇
- 文献传递
- 一种从小鼠组织中分离和鉴定亚铁血红素结合蛋白的新方法
- 亚铁血红素是需氧生物的关键辅助因子之一,由于其结构中的铁卟啉环具有高度的反应活性,以之为活性中心的亚铁血红素结合蛋白参与了电子转移、氧转运和代谢、信号传导等广泛的生物过程,因此一直备受关注。但由于传统的方法通常建立在对单...
- 李晓雷王敬强赵康赵彩凤殷剑宁王融刘斯奇
- 文献传递
