王复甦
- 作品数：31 被引量：63H指数：4
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 人感染猪链球菌II型毒力因子研究
- 杨婷婷朱水荣程苏云王复甦徐宝祥占利罗芸叶菊连
- 简要技术说明：通过人SS2分离株进行分子、细胞、动物等不同水平的生物学实验，分析人SS2分离株毒力作用，进行相关毒力因子研究与鉴定，对SS2某些毒力基因组信息未知的状况进行补充和分析，寻找新的可能毒力因子和基因；最后建立...
- 关键词：
- 关键词：人感染猪链球菌病血清流行病学调查基因诊断
- 婴幼儿腹泻致泻大肠埃希菌PCR毒力基因检测被引量：3
- 2009年
- 目的:了解引起2007年浙江省婴幼儿腹泻的致泻性大肠埃希菌EIEC、EPEC、ETEC血清型分布情况及其毒力基因携带状况。方法:将粪便接种到不加新生霉素的EC肉汤中,增菌后用EMB分离培养,可疑菌经生化鉴定后,进行血清学分型;根据不同血清型,以PCR检测相应的毒力基因。结果:200份腹泻粪便标本中共分离出EIEC 6株、EPEC 25株、ETEC 20株,其检出率分别为3.0%、12.5%、10.0%。其中EIEC侵袭质粒抗原H基因(ipaH)阳性1株,检出率为16.7%(1/6);EPEC束状菌毛A基因(BfpA)阳性9株,检出率为36.0%(9/25),其中携带紧密粘附素(eaeA)的2株,检出率为8.0%(2/25);ETEC耐热肠毒素(ST)阳性1株,检出率为5.0%(1/20),不耐热肠毒素(LT)未检出。结论:我省2007年引起婴幼儿腹泻的主要致泻性大肠埃希菌为携带BfpA毒力基因的O1、O126型EPEC;因此,有必要在传统细菌鉴定的基础上,增加对致泻大肠埃希菌进行PCR毒力基因检测,为进一步确诊和防控致泻大肠埃希菌引起的婴幼儿腹泻提供更有力的实验室依据。
- 叶菊莲占利程苏云罗芸余昭王复甦
- 麻疹血凝抑制试验中猴血球冷冻保存的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:延长新鲜猴血球保存期,解决麻疹血凝抑制试验中猴血球来源紧张问题。方法:猴子静脉无菌采血后置阿氏液中,将阿氏液保存的猴血球经500 r/min离心10 min,弃上清收取浓缩猴血球,与等量血球冷冻保存液混合,室温缓慢搅拌15 min后,分装保存于液氮中。结果:将液氮冷冻保存9个月的猴血球与新鲜猴血球比较,其对麻疹血凝素的敏感性和麻疹血凝抑制抗体的测定结果没有统计学差异(u=0.0123,P>0.5)。结论:用液氮冷冻猴血球获得成功,并能替代新鲜猴血球。
- 徐宝祥卢亦愚朱水荣王复甦杨婷婷
- 关键词：麻疹
- 副溶血性弧菌多重定量PCR检测试剂盒及检测方法
- 本发明提供了一种副溶血性弧菌毒素基因多重定量PCR检测试剂盒及检测方法。所述试剂盒主要包括特异性引物和探针以及PCR反应试剂，所述特异性引物和探针由副溶血性弧菌耐热直接溶血素基因(tdh)、不耐热溶血素基因(tlh)、毒...
- 叶菊莲金大智罗芸张政王复甦
- 东阳市人群流感嗜血杆菌携带状况及耐药性分析被引量：1
- 2010年
- 李月华王复甦韦俊超
- 关键词：流感嗜血杆菌耐药性分析革兰氏阴性条件致病菌人体抵抗力
- 猪链球菌核酸检测量值溯源研究及方法评估
- 2011年
- 目的针对病原微生物检测中急需解决的计量标准和量值溯源问题，建立猪链球菌核酸量值荧光定量PCR方法，研制猪链核酸检测标准物质，探索等效一致的核酸测量技术。方法根据已报告的DNA序列设计并合成种特异性16SrRNA引物，建立荧光定量WaR方法，摸索最佳上、下游引物配比浓度，利用已知核酸浓度的标准品作标准曲线并获得0值与样本起始拷贝数的关系，对方法的特异性、灵敏度、稳定性和不确定性进行评估，并进行DNA标准品效期实验。结果建立的猪链球菌DNA实时定量PCR方法，最佳引物浓度为上游0．6μmoL／L，下游0．3μmol／L。方法的灵敏度为18．6DNA拷贝数，DNA最佳检出浓度为1．86×102—1．86×104拷贝／10vL反应体系。0值只与模板的DNA起始浓度有关（F：597．60，P〈0．01），与不同的实验时间及实验人员（F=0．60、1．90，P〉0．05）无关。0值的不确定度为0．46％～5．40％。DNA标准品4oC可保存半年以上，而一60℃保存则可达1年以上。结论建立的荧光定量PCR方法特异性及稳定性良好，可用于猪链球菌核酸量值测定；制备的核酸标准物质具备国际计量标准，且稳定性好，可作为猪链球菌核酸检测的量值溯源和传递示范的标准物质。
- 杨婷婷王复甦占利程苏云朱水荣徐宝祥
- 关键词：链球菌荧光定量PCR
- 浙江省非O1、非O139群霍乱弧菌快速检测与毒力基因研究被引量：3
- 2011年
- 目的建立一种快速检测非O1、非O139群霍乱弧菌方法,并对浙江省部分地区海水产品中非O1、非O139群霍乱弧菌及其携带毒力基因开展快速检测。方法采用三糖斜面、氧化酶实验、粘丝实验、无盐胨水等简单生化进行初筛,对全部结果阳性的菌株用聚合酶链反应(PCR)方法检测霍乱弧菌外膜蛋白OmpW以及毒力基因ctxA、hlyA和toxR。结果按照方法用三糖斜面初筛后共有504份样本阳性,其中氧化酶、粘丝和无盐胨水全部为阳性的有434份;有388份样本OmpW PCR结果为阳性,其中ctxA结果均为阴性,toxR阳性hlyA阳性的有225株。结论建立的快速检测方法提高了非O1、非O139群霍乱弧菌的检出率,缩短了检测时间,节约了检测成本。浙江省非O1、非O139群霍乱弧菌在海水产品中广泛存在,应对其致病性提高警惕,加强监测。
- 罗芸叶菊莲金大智张政王复甦徐宝祥
- 关键词：霍乱弧菌毒力基因
- 浙江省丽水地区2株汉坦病毒分离株的型别鉴定和基因差异研究被引量：3
- 2009年
- 目的从浙江省丽水地区肾综合征出血热（HFRS）疫区阳性鼠肺标本中分离汉坦病毒（HV），并对丽水分离株进行分子生物学鉴定，分析M和S片段基因序列以确定毒株的型别和基因差异程度。方法收集宿主动物标本，采用直接免疫荧光检测鼠肺标本HV抗原。将HV抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞，分离HV。提取病毒总RNA，应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）扩增病毒M和S基因全片段，克隆入质粒载体，纯化后测定序列，并同Hv其他病毒株进行比较。结果成功分离到2株HV，扩增出2株病毒的M和S全片段并测定了序列，经对核苷酸序列分析表明，2株病毒与现有的HTNV有最高的同源性，均为HTNV，但与国内外其他的HTNV核苷酸差异高达13.4％-20.7％和10.3％-16.1％。用M和S片段核苷酸序列所构建的系统进化树显示，2毒株分在HTNV发生群，与HTNV的Z10、A9、Z5病毒株亲缘关系最近，但独自构成一进化支。结论浙江丽水分离株可以定型为HTN型病毒，与国内外其他的HTN型病毒基因差异较大。
- 姚苹苹朱函坪徐芳王志刚梅玲玲雷永良谢荣辉王复甦朱智勇邓小昭张云
- 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒基因型系统发生分析
- 浙江省首次间接免疫荧光法证实输入性登革热病例被引量：1
- 2004年
- 姜理平龚震宇陆群英王臻姚阿荣王复甦
- 关键词：输入性登革热间接免疫荧光法登革热病毒输入性病例登革热抗体亚热带
- 恙虫病两例报告
- 2005年
- 王复甦姜理平
- 关键词：虫病流行病学临床诊治抗体检测特异性
