王东星
- 作品数：15 被引量：16H指数：2
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一株产生广谱高效抗菌肽的枯草芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一株产生广谱高效抗菌肽的枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物技术领域，所述菌株具体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BRT39，保藏号为CGMCC NO.5702。所述BRT39菌株其代谢产物中...
- 高兆建樊陈张抗震鞠民友杜永凯孙会刚王东星
- 假单胞菌产弹性蛋白酶基因的克隆与表达
- 2014年
- 从假单胞菌(Pseudomonas sp.)XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌(Escherichia coli)中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生产弹性蛋白酶奠定基础.以假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增弹性蛋白酶基因,并将其开放阅读框(ORF)克隆至融合表达载体pET30a(+)进一步IPTG诱导表达;表达产物经His·Bind亲和层析纯化后对弹性蛋白酶进行酶学性质分析.实验成功克隆了弹性蛋白酶基因,DNA基因片段为1672bp、编码497个氨基酸残基的多肽,与预计长度相符合;实现了其在E.coli中的高效表达,表达量约占菌体总蛋白的20%;经SDS-PAGE分析,相对分子质量为48 000,与预期的一致;提纯后的表达蛋白SDS-PAGE分析可见单一条带,纯度可达92%以上.表达蛋白具有良好活性.
- 高兆建王东星王红建苗倩钦
- 关键词：弹性蛋白酶基因克隆
- 产低温弹性蛋白酶菌株的高效诱变及酶学特性被引量：4
- 2013年
- 以实验室保藏的一株产低温弹性蛋白酶短芽孢杆菌Bacillus brevis XZE116为原始出发菌株，通过紫外线、亚硝基胍（NTG）复合诱变，经弹性蛋白平板水解圈初筛、摇瓶发酵复筛，成功筛选出一株高产突变菌株XZU21，其活力是出发菌株的1.67倍，最大产酶量160.3U/mL。10次传代实验表明遗传稳定性好。突变菌株最佳反应pH值为9.5，温度20℃，比原始菌株低5℃。该菌株所产弹性蛋白酶50℃以下及pH7.0～11.5之间稳定性好；Mg2＋对酶有明显激活作用，Pb2＋、Hg2＋几乎完全抑制酶活性。丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂苯甲基磺酰氟（PSFM）强烈抑制酶活性，表明该突变菌株弹性蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶。紫外线和NTG复合诱变对提高短芽孢杆菌弹性蛋白酶产量及降低最适反应温度效果显著。
- 樊陈王茂广高兆建杜永凯王东星周刚
- 关键词：弹性蛋白酶复合诱变突变株酶学特性
- 一种产阿魏酸酯酶的地衣芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一种产阿魏酸酯酶的地衣芽孢杆菌及其应用，该株地衣芽孢杆菌(<I>Bacillus </I><I>licheniformis</I>)DBM12，保藏编号：CGMCC No.8672。本发明的地衣芽孢杆菌不仅对...
- 高兆建王东星侯进慧唐仕荣孙会刚徐大伟郑义杨宪瑶
- 文献传递
- 一株产生广谱高效抗菌肽的枯草芽孢杆菌及其应用
- 本发明公开了一株产生广谱高效抗菌肽的枯草芽孢杆菌及其应用，属于微生物技术领域，所述菌株具体为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BRT39，保藏号为CGMCC NO.5702。所述BRT39菌株其代谢产物中...
- 高兆建樊陈张抗震鞠民友杜永凯孙会刚王东星
- 文献传递
- 一株新的短芽孢杆菌低温弹性蛋白酶的发酵优化
- 2013年
- [目的]优化短芽孢杆菌XZE116菌株的培养条件使之产生高活性的胞外弹性蛋白酶。[方法]通过单因子和正交试验对XZE116菌株产胞外弹性蛋白酶的培养基及发酵条件进行优化。[结果]该菌株产酶最佳培养基组成为:葡萄糖0.5%、蔗糖0.1%、干酪素0.5%、酵母膏0.5%,K2HPO40.1%,KH2PO40.5%,MgCl20.01%;最佳发酵条件为:250 ml三角烧瓶中装液量40 ml、接种量5%、摇瓶转速200 r/min、pH 8.4、发酵温度为27℃、发酵时间为72 h。XZE116菌株在最佳培养条件下,该菌株的酶活力提高了1.6倍。[结论]研究可为这株新的短芽孢杆菌进行发酵工业生产提供依据,同时为进一步利用该菌株产生的弹性蛋白酶奠定基础。
- 樊陈高兆建张桂英王东星
- 关键词：短芽孢杆菌发酵优化
- 地衣芽孢杆菌抗菌肽的纯化及抗菌特性分析被引量：12
- 2013年
- 以研究地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)LY12所产抗菌肽特性,从发酵液中分离纯化该抗菌肽。通过超滤、离子交换层析、分子筛凝胶过滤层析、反向高效液相色谱等方法纯化该抗菌肽。结果显示:LC-ESI-MS质谱测得抗菌肽分子量为2750.785 Da,同Tricine SDS-PAGE分析结果基本一致。体外抗菌试验结果显示,抗菌肽LYF12能够抑制丝状真菌、细菌的生长。对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、藤黄微球菌(Micrococcus aureus)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、副溶血性弧菌(Vibrio parachaemolyticus)的最低抑菌浓度分别为9.8、19.8、20.7、7.2、9.6、10.2、15.7μg/mL。从地衣芽孢杆菌LY12分离的抗菌肽显示出对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌及真菌具有较好的抗菌效果,故在食品防腐中具有潜在的应用价值。
- 樊陈高兆建张桂英鞠民友孙会刚杜永凯王东星
- 关键词：抗菌肽地衣芽孢杆菌纯化抑菌特性
- 灰绿青霉阿魏酸酯酶的分离纯化和酶学性质研究
- 2016年
- [目的]研究青霉(Penicillium glaucum)XGY36胞外产阿魏酸酯酶的纯化和酶学性质。[方法]菌株胞外产酶发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose DE52离子交换柱层析、Sephadex-G75分子筛层析进行纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对其酶学性质进行研究。[结果]从菌株发酵液中分离纯化到电泳纯的阿魏酸酯酶,纯化倍数6.54,酶活性回收59.7%。阿魏酸酯酶经SDS-PAGE获得1个条带,其表观分子量为36.5 ku。催化底物阿魏酸乙酯的最适反应温度为50℃,最适p H为5.0。阿魏酸酯酶在60℃以下和p H 3.0~7.0范围内稳定。金属离子Zn^(2+)、Mg^(2+)、Ca^(2+)对酶有明显的激活作用,而Pb^(2+)、Hg^(2+)和Ag+对阿魏酸酯酶有强烈的抑制作用,Na+、K+、Mn^(2+)、Cu^(2+)和Fe^(2+)对酶活的影响不大。[结论]青霉阿魏酸酯酶具有潜在的应用价值,适合应用于食品、医药及生物等领域。
- 徐大伟高兆建张铁柱杨杰王东星杜永凯
- 关键词：阿魏酸酯酶纯化酶学性质
- 一种利用枯草芽孢杆菌生产红色素的方法
- 本发明属于微生物发酵领域，涉及利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备红色素的工艺方法以及红色素粗产品的纯化精制技术。本发明所用菌株为枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis) HJ，保藏编号为CGMCCNo.5701。本发...
- 高兆建杜永凯唐仕荣张建萍陈尚龙王东星张从省周刚
- 文献传递
- 利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法
- 本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌液体发酵制备β-半乳糖苷酶酶制剂的方法，其特征在于选用枯草芽孢杆菌(<i>Bacillus？subtilis</i>)？F69作为β-半乳糖苷酶的生产菌种，先经摇瓶震...
- 高兆建陈宏伟张桂英孙会刚王东星于洋杜永凯
- 文献传递
