李锐
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响
- 2014年
- 目的利用shRNA沉默E3泛素连接酶Iduna基因,观察Iduna对非小细胞肺癌细胞系A549细胞周期及其相关蛋白表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系。构建shRNA-Iduna真核表达载体,瞬时转染A549细胞,蛋白印迹法检测转染效率。流式细胞仪检测细胞周期变化。蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达。结果蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系显示A549和SPC细胞中Iduna mRNA和蛋白水平高于其他细胞系。shRNA-Iduna转染A549细胞系后,流式细胞仪检测细胞周期显示干扰组G0/G1期比例增加,S期比例相对减少(P<0.05)。蛋白印迹法检测与细胞周期相关的G1/S期调控蛋白[细胞周期蛋白(cyclin)A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、P21、P27、P53等]的表达情况,结果显示干扰组cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白表达减少(P<0.05)。结论 Iduna可能通过调控cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白的表达,使细胞阻滞于G0/G1期,从而调节肺癌细胞周期进程。
- 高英李锐徐慧慧王睿惠林萍邱雪杉王恩华
- 关键词：细胞周期细胞周期蛋白类
- 非小细胞肺癌中过表达RNF146对Axin和β-catenin表达和定位的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:观察E3泛素连接酶RNF146表达对Axin和β-catenin蛋白表达的影响,探讨RNF146与Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学EnVision法检测133例NSCLC患者肺癌中RNF146、Axin和β-catenin的表达。构建RNF146过表达质粒,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和细胞免疫荧光方法研究RNF146在肺癌细胞株A549和LTE中过表达对Axin和β-catenin表达及定位的影响。结果:NSCLC患者肺癌组织中RNF146高表达72例(54.1%)中49例(68.1%)显示Axin表达减弱或缺失,19例(26.4%)出现β-catenin细胞核阳性表达;RNF146低表达61例(45.9%)中只有26例(42.6%)显示Axin表达减弱或缺失,7(11.5%)例出现β-catenin细胞核阳性。RNF146与Axin的表达呈明显的负相关(P=0.003),与β-catenin的细胞核表达呈正相关(P=0.047)。肺癌细胞系中过表达RNF146能够下调Axin蛋白的表达,诱导β-catenin蛋白表达和核内分布,但对Axin和β-catenin mRNA水平没有影响。结论:RNF146可能通过Wnt/β-catenin通路参与肺癌的发生发展。
- 高英徐慧慧李锐王睿惠林萍邱雪杉王恩华
- 关键词：非小细胞肺癌E3泛素连接酶AXIN
- shRNA沉默环指蛋白146基因对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及其相关蛋白表达的影响
- 2014年
- 目的:shRNA沉默环指蛋白146(RNF146)基因,观察非小细胞肺癌细胞中RNF146沉默对肺癌细胞迁移和侵袭及其相关蛋白表达的影响。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法用于筛选RNF146高表达肺癌细胞系。构建shRNA-RNF146真核表达载体,瞬时转染A549和H1299肺癌细胞,Western blot检测转染效率。划痕实验评价肺癌细胞体外迁移能力;Buyden小室实验检测肺癌细胞体外侵袭能力。Western blot检测肺癌细胞中迁移和侵袭相关蛋白的表达。结果:RT-PCR和Western blot方法筛选RNF146高表达肺癌细胞系,显示A549和H1299细胞中RNF146蛋白均高于其它细胞系。shRNA-RNF146转染A549和H1299细胞系后,划痕实验显示转染组细胞24小时迁移率明显低于空载体组和未转染组(P<0.01)。Buyden小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少(P<0.05)。Western blot检测与细胞迁移和侵袭相关的调控蛋白(MMP2、MMP7、MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等)的表达情况,结果显示干扰RNF146后A549细胞中MMP2和MMP7表达明显减少,而MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等蛋白的表达变化不明显。结论:RNF146可能通过调控MMP2和MMP7的蛋白水平促进肺癌细胞迁移和侵袭。
- 高英王睿徐慧慧李锐惠林萍邱雪杉王恩华
- 关键词：非小细胞肺癌E3泛素连接酶迁移
- 副乳腺浸润性导管癌1例并文献复习被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨副乳腺癌的诊断、鉴别诊断以及治疗方法。方法:报道腋窝副乳腺浸润性导管癌1例,结合文献对副乳腺癌的特点、临床表现、诊断、鉴别诊断、治疗以及预后进行探讨。结果:副乳腺癌的发病率较低,结合临床表现、镜下观察及免疫组化方法,可以明确诊断。注意与乳腺腋尾部癌、皮肤附件来源的肿瘤、腋下淋巴结转移癌、腋下淋巴结淋巴瘤等疾病进行鉴别诊断;治疗原则基本等同于乳腺癌的治疗。其预后较差,术后积极放化疗,有可能改善预后。结论:副乳腺癌相对少见。有副乳腺症者应加强自检,做到早期发现早期治疗。新辅助化疗联合手术治疗对提高患者的生存率很重要。
- 朱延美徐慧慧王睿李锐李雅浩
- 关键词：副乳腺癌
