李兰芬
- 作品数：17 被引量：7H指数：1
- 供职机构：北京大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生化学工程更多>>
- 高通量基因克隆、表达技术平台建立以及对变形链球菌若干蛋白的晶体结构研究
- ＜正＞目的:为搭建适合于国内结构基因组研究的高通量、低成本基因克隆、蛋白表达、纯化、晶体筛选、X-射线晶体衍射技术平台,寻找适合于变形链球菌蛋白高效表达的体系和条件,对变形链球菌ATCC25175国际标准株中27个和全基...
- 李兰芬张晓嫣南洁梁宇和郭丽宏林久祥魏世成苏晓东
- 文献传递
- 植物激素茉莉酸通路中核心转录因子MYC2的结构与功能研究
- 茉莉酸是基本的植物体自身合成激素,在植物抵抗外源环境压力以及调控植物自身的生长发育方面起着至关重要的作用。该信号通路中的核心转录因子是一类属于basic Helix-loop-Helix (bHLH)家族的蛋白,包括MY...
- 廉腾飞徐永萍李兰芬苏晓东
- 关键词：BHLH基因转录调控
- 文献传递
- 蛋白质晶体学技术的发展与展望被引量：7
- 2007年
- 从50年前英国科学家解析出第一个蛋白质晶体结构以来,蛋白质晶体学历经数个里程碑式的发展,已经成为一门成熟的高科技学科,是结构生物学的主要研究手段。近年来结构生物学发展迅速并和其他学科相互渗透交叉,特别是受到结构基因组学等热点学科的极大带动。作为结构生物学的基本手段和技术,蛋白质晶体学从解析简单的蛋白质三维结构延伸到解决各类生物大分子及复合物结构,并更加注重研究结构与功能之间的相互关系,派生出诸如基于结构的药物设计等应用性很强的分支。生物技术及计算机技术的飞速发展,尤其是高通量技术在生物学领域的应用,为蛋白质晶体学带来了全新的概念和更加广阔的前景。文章将主要介绍蛋白质晶体学技术的一些历史发展以及对未来的展望。
- 李兰芬南洁苏晓东
- 关键词：X射线晶体学蛋白质三维结构结构基因组学高通量技术
- 致龋变异链球菌N-乙酰谷氨酸激酶的表达、纯化和生化特性研究
- 2009年
- 探讨了在大肠杆菌中实现致龋变异链球菌N-乙酰谷氨酸激酶基因(argB)的表达、蛋白纯化和生化特性研究。以变异链球菌基因组DNA为模板,设计特异引物,PCR扩增argB基因。经消化和连接构建重组载体pET28a-argB,测序确认后转化表达菌E.coli BL21(DE3)。SDS-PAGE鉴定argB基因能诱导表达,且表达物可溶。通过镍离子螯合层析和分子筛纯化成功获得N-乙酰谷氨酸激酶(NAGK)重组蛋白。NAGK酶促反应分析表明:精氨酸生物合成的乙酰化环式路径关键酶NAGK活性不受精氨酸反馈抑制,提示可能存在其他调节方式有待进一步研究。此外,分析型分子筛结果显示:具有催化活性NAGK以单体形式存在,显然不同于此前氨基酸激酶家族中的相关报道。
- 吴常伟李兰芬高雄卓赵晓军苏晓东
- 关键词：变异链球菌
- 口腔致病菌变形链球菌Smu.776蛋白的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)
- 2007年
- 变形链球菌smu.776基因编码一段含有385个氨基酸的蛋白质,其功能可能为依赖于腺苷甲硫氨酸的甲基转移酶.smu.776的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中过量表达得到很好的产量.产物Smu.776蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛柱层析两步得到纯化.采用悬滴气象扩散法得到了Smu.776蛋白的晶体.X射线衍射分辨率达到2.0!,晶体属单斜空间群C2,晶格参数为a=168.47",b=50.66#,c=53.96$,β=104.22°.每个最小不对称单元内含有一个蛋白质分子,溶剂含量为51.3%.
- 王开拓李兰芬张晓嫣梁宇和魏世成苏晓东
- 关键词：变形链球菌龋齿
- 龋齿致病菌变性链球菌蛋白Smu_195c的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)
- 2007年
- 变性链球菌(Streptococcus mutans)是最主要的龋齿致病菌.其中Smu_195c为一个约10ku(86个氨基酸)的蛋白质,序列比对结果显示,它没有包含保守的结构域,功能也是未知的.为揭示其功能,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了N端结合了6个His的编码Smu_195c的DNA片段.通过悬滴法得到了两种不同晶系的晶体.第一种属于空间群P6122或P6522,晶格参数为a=b=62.93!,c=90.63",γ=120°;第二种属于空间群P41212或P43212,晶格参数为a=b=57.97#,c=103.51$.N端带有His的蛋白质长出的晶体属于第一种,而切掉N端的6个His后的蛋白质长出的晶体两种都有.
- 高增强侯海峰李丽琴许锐梁宇和李兰芬苏晓东董宇辉
- 关键词：X射线衍射
- 变形链球菌色氨酸合成途径相关蛋白酶的结构生物学研究
- 变形链球菌(变链菌)是主要致龋病菌之一,从结构基因组学角度全面研究变链菌蛋白结构与功能的关系将加深对其致龋分子机理的理解。变链菌UA159可在不含氨基酸的基本培养基上生长,推测其具有合成全部氨基酸的能力(Ajdicet ...
- 李兰芬刘聪李丹傅天民苏晓东
- 龋齿致病菌变形链球菌蛋白Smu.260的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)
- 2005年
- 变形链球菌(Streptococcusmutans) 是最主要的龋齿致病菌,其基因Smu.260编码一个约23 ku (200个氨基酸) 的蛋白质. Smu.260的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达得到很好的产量. 产物Smu.260蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛两步法纯化,并发现纯化后的蛋白以两种形式存在,二聚体(约46 ku) 和四聚体,前者呈亮黄色,后者无色。采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体. 晶体的X射线衍射分辨率达到2.3 魡,晶体属正交空间群P212121,晶格参数为a=89.88 魡, b=90.91 魡, c=105.17 魡. 晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体,溶剂含量为53%.
- 张晓嫣米伟周艳峰刘翔宇李兰芬梁宇和魏世成苏晓东
- 关键词：变形链球菌龋齿蛋白质晶体学
- 重组突变体α1-抗胰蛋白酶及其制备和应用
- 本发明提供了一种新型的α1‑抗胰蛋白酶突变体，及生产和纯化这种新型重组突变体的方法。新型突变体是通过以蛋白质结构为依据的蛋白工程改造，设计出更加适合于医药应用的，结构上更稳定，并且能够抗氧化的候选蛋白药。本发明亦提供针对...
- 蔺新力李兰芬
- 文献传递
- 植物激素茉莉酸通路中核心转录因子MYC2的结构与功能研究
- 茉莉酸是基本的植物体自身合成激素,在植物抵抗外源环境压力以及调控植物自身的生长发育方面起着至关重要的作用。该信号通路中的核心转录因子是一类属于basic Helix-loop-Helix(bHLH)家族的蛋白,包括MYC...
- 廉腾飞徐永萍李兰芬苏晓东
- 关键词：BHLH基因转录调控
