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李全喜
作品数:
7
被引量:47
H指数:5
供职机构:
中国人民解放军海军总医院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
王琰
北京市肿瘤防治研究所
徐建军
北京市肿瘤防治研究所
王雅明
北京市肿瘤防治研究所
王力民
北京市肿瘤防治研究所
李竞
北京市肿瘤防治研究所
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7篇
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6篇
医药卫生
1篇
生物学
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抗体
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菌体
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单克隆抗体
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噬菌体抗体库
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机构
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中国人民解放...
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中国医学科学...
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中国医学科学...
作者
7篇
李全喜
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王琰
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王力民
5篇
王雅明
5篇
徐建军
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李竞
4篇
董志伟
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陈宇萍
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刘群英
传媒
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中华微生物学...
1篇
中国免疫学杂...
1篇
国外医学(免...
1篇
中华肿瘤杂志
1篇
医学与哲学
年份
2篇
1998
4篇
1997
1篇
1995
共
7
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Phage Display技术在抗体库中的应用现状
被引量:2
1997年
PhageDisplay技术是将外源蛋白通过与丝状噬菌体外壳蛋白融合而将外源蛋白表达于噬菌体颗粒的表面。该技术已被应用于噬菌体抗体库中,为单克隆抗体的制备及鼠单抗的人源化提供了一条有效的途径。它可以使人们在体外模拟体内抗体产生的过程,构建总抗体库,不经细胞融合,甚至不经免疫制备针对任何抗原的单克隆抗体。本文综述了该技术近年来在抗体库中的应用进展。
李全喜
关键词:
PHAGE
DISPLAY
抗体库
识别9E10单抗的噬菌体短肽的免疫学特性分析
被引量:7
1997年
为分析从单价表达短肽库中筛选到的两种克隆的免疫学特性,将单价噬菌体短肽表达载体中的gⅢ片段切除,在大肠杆菌中表达可溶性短肽分子,ELISA竞争抑制实验证实,可溶性短肽分子可竞争抑制9E10单抗与C-myc+肽结合。进一步将噬菌体短肽的单价表达载体改建为多价表达载体,分别免疫兔和小鼠,制备免疫抗血清,ELISA实验和竞争抑制实验结果证实,两种克隆的免疫抗血清均可与9E10单抗所识别的抗原表位结合,表明这两个克隆尽管在序列上与原自然抗原不同,但其在结构上真正模拟了c-myc+肽的抗原表位,在体内可诱发相似的免疫反应。
李全喜
王琰
李竟
王雅明
王雅明
王力民
徐建军
董志伟
关键词:
噬菌体
分子识别
从噬菌体抗体库克隆抗人RBC单链抗体基因
被引量:11
1998年
目的用噬菌体抗体库技术克隆抗人红细胞(RBC)的单链抗体(ScFv)基因。方法以人RBC免疫小鼠,取脾细胞,RT-PCR法扩增VH和Vκ基因,组装到ScFv-噬菌体抗体表达载体中,构建了噬菌体抗体库,以人RBC为固相抗原,对该库进行了四轮“吸附-洗脱-扩增”筛选,获得了抗人RBC的ScFv基因。结果DNA序列分析表明其可变区基因分别属于小鼠VHⅢ亚群和VκⅤ亚群。结论所表达的ScFv可与不同人RBC结合,与ABO血型抗原无关。
王琰
王雅明
刘群英
徐建军
李全喜
陈宇萍
王力民
李竞
关键词:
噬菌体
抗体库
单链抗体基因
人红细胞
从噬菌体短肽库中筛选单克隆抗体识别的抗原表位
被引量:12
1997年
将随机合成的寡聚核苷酸重组到噬菌体表面单价表达载体,构建了噬菌体随机八肽库。以抗原识别性明确的单克隆抗体9E10固相化,对噬菌体短肽库进行了4~5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选,任选多个所获克隆进行ELISA检测。发现第4轮后6/22个克隆可与9E10结合,第5轮后10/10可与9E10结合,此结合反应可被9E10所针对的十肽抗原以及游离的9E10特异性抑制。对所获阳性克隆进行DNA序列测定发现,它们的序列可分为两种,其中一种序列与c-myc十肽具有同源序列ISExxL,而另一种的序列则完全不同。证实噬菌体表面单价表达体系用于构建噬菌体短肽库的有效性,为进一步筛选其它的具有高亲和力的特异性短肽打下了基础。
李全喜
王琰
李竞
李竞
徐建军
王雅明
董志伟
关键词:
噬菌体
单克隆抗体
抗原表位
抗胃癌鼠单抗 3H11V 区基因的克隆及人-鼠嵌合轻链的表达
被引量:12
1997年
利用前导肽序列设计引物,采用RT-PCR技术从分泌抗人胃癌的单抗杂交瘤细胞系3H11分离克隆了抗体的轻重链可变区基因序列。经DNA序列分析表明所获基因含有全部前导序列,其成熟蛋白编码部分与从第一骨架区引物所克隆的序列相符。将轻链基因组建到人-鼠嵌合轻链表达载体中,转染至小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中,可获得人鼠嵌合轻链的表达,证明所克隆的基因具有表达活性,为人-鼠嵌合抗体的构建奠定了基础。
李竞
王琰
李全喜
王雅明
徐建军
王力民
董志伟
关键词:
基因克隆
基因表达
胃肿瘤
抗体
单克隆抗体
噬菌体抗体库技术与功能模拟方法
1995年
功能模拟方法是控制论的最基本出发点,它是以原型和模型之间的功能相似为基础,用模型来再现原型功能和行为的一种研究方法。随着现代医学的不断发展,需要间接研究的对象越来越多,功能模拟方法在医学科学研究中日益显示出它的重要作用。本文通过对噬菌体抗体库技术各个技术环节的分析,来探讨功能模拟方法在噬菌体抗体库技术中的应用和意义。
李全喜
王琰
关键词:
噬菌体抗体库
抗胃癌单抗3H11的单链抗体表达载体的构建和表达
被引量:8
1998年
目的构建抗胃癌鼠单抗3H11的单链抗体(ScFv),以利于临床应用。方法采用噬菌体抗体库技术和PCR介导的定位点突变技术,构建和改造抗胃癌ScFv基因。结果从3H11杂交瘤制备抗体库,以胃癌细胞系(MGC803)进行筛选,未获阳性克隆。再对3H11可变区基因以PCR错配技术进行随机突变,构建次级突变抗体库,仍未筛出阳性克隆。最后用PCR定点突变技术,将ScFv可变区基因氨基端序列恢复成3H11的原始序列,终于得到可与胃癌细胞结合的ScFv克隆。
李竞
王琰
李全喜
王雅明
徐建军
王力民
董志伟
关键词:
胃肿瘤
单克隆抗体
单链抗体
噬菌体抗体库
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