曾洁 作品数:5 被引量:8 H指数:2 供职机构: 上海交通大学医学院附属瑞金医院 更多>> 发文基金: 上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
MPTP诱导的帕金森病小鼠模型纹状体中Kir2基因的表达 2008年 目的研究1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠模型纹状体中Kir2家族基因各亚型(Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3、Kir2.4)mRNA的表达。方法构建MPTP诱导的5d亚急性PD小鼠模型,按造模病程设定时间点提取小鼠纹状体总RNA,用Kir2家族各亚型基因的特异性引物逆转录为cDNA,以荧光染料SYBR greenⅠ进行荧光实时定量PCR(real-time PCR),检测各特定时间点Kir2.1、Kir2.2、Kir2.3、Kir2.4mRNA表达。结果对不同时间点模型样本的real-timePCR检测发现,Kir2家族4种亚型基因在MPTP诱导的PD模型小鼠纹状体中均有不同程度表达,其中Kir2.3和Kir2.4mRNA随PD病程进展其表达量显著增加(P<0.05)。结论PD发病机制与纹状体Kir2家族Kir2.3、Kir2.4等亚型基因的表达可能有潜在联系。实验提示Kir2具有作为潜在PD研究靶点的可能性。 曾洁 王刚 盛呈雨 周海燕 任汝静 丁健青 陈生弟关键词:帕金森病 实时荧光定量PCR KIR 纹状体 大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达 被引量:1 2008年 目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。 王刚 曾洁 盛呈雨 任汝静 周海燕 陆国强 丁健青 陈生弟关键词:基因表达调节 PC12细胞株 ATP敏感性钾通道亚基Kir6.1、Kir6.2在MPTP诱导帕金森病小鼠纹状体和黑质内的改变 被引量:1 2008年 为探讨ATP敏感性钾通道(KATP)亚基Kir6.1、Kir6.2在帕金森病(PD)病理生理机制中的可能作用。本研究采用蛋白免疫印迹分析(Western blot)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD小鼠模型黑质、纹状体Kir6.1、Kir6.2在不同时间点表达变化进行检测,并与酪氨酸羟化酶(TH)的变化进行比较。结果发现:(1)与正常对照组相比,黑质、纹状体TH蛋白的表达在给药后第1d即开始下降,且呈时间依赖性下降(P<0.01);(2)黑质Kir6.1蛋白的表达在给药后第5d才开始下降(P<0.01);而纹状体Kir6.1蛋白的表达在给药后第5d才开始升高(P<0.01);(3)黑质Kir6.2蛋白的表达在给药后第5d才开始明显升高(P<0.01);而纹状体Kir6.2蛋白的表达在给药后第3d轻度升高(P<0.05),第5d又明显降低(P<0.01)。以上结果提示作为KATP通道亚基的Kir6.1、Kir6.2在MPTP的作用下,可能通过参与星形胶质细胞的活化、胆碱能突触传递的抑制以及自身代偿和修复在PD的病理生理过程中发挥了重要的角色。 王刚 潘静 曾洁 任汝静 陈生弟关键词:ATP敏感性钾通道 蛋白免疫印迹 帕金森病 ATP-sensitive potassium channels:novel potential roles in Parkinson's disease 被引量:2 2007年 The ATP-sensitive potassium(KATP)channels which extensively distribute in diverse tissues(e.g.vascular smooth muscle,cardiac cells,and pancreas)are well-established for characteristics like vasodilatation,myocardial protection against ischemia,and insulin secretion.The aim of this review is to get insight into the novel roles of KATPchannels in Parkinson's disease(PD),with consideration of the specificities KATPchannels in the central nervous system(CNS), such as the control of neuronal excitability,action potential,mitochondrial function and neurotransmitter release. 曾洁 王刚 陈生弟帕金森病患者视幻觉发生率及危险因素的调查 被引量:4 2009年 目的研究原发性帕金森病(PD)患者的视幻觉发生率和相关特征,分析潜在的诱发因素。方法采用自制的调查表调查128例原发性PD患者的视幻觉发生情况;比较有视幻觉与无视幻觉的患者在性别、年龄、病程、简易智能量表(MMSE)评分、Hoehn&Yahr分级、药物使用种类、左旋多巴等效剂量(LDE)等方面的差异;调查有视幻觉的PD患者快速眼动期睡眠行为障碍(RBD)的发生情况。结果128例患者中,18例(14.06%)发生过视幻觉。其中10例(55.56%)视幻觉的出现频率≥1次/d;11例(61.11%)视幻觉图像为人影;15例(83.33%)伴随RBD。女性患者比例、MMSE评分、Hoehn&Yahr分级、多巴胺激动剂的使用率在有视幻觉和无视幻觉的患者间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论视幻觉是PD患者常见的一种非运动性症状,认知功能、病情严重程度、多巴胺激动剂的使用可能与视幻觉的发生有关。 万赢 王刚 曾洁 肖勤 王瑛 马建芳 汪锡金 周海燕 陈生弟关键词:帕金森病 简易智能量表 多巴胺激动剂