方秀斌 作品数:166 被引量:583 H指数:12 供职机构: 中国医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 辽宁省教育厅基金资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
佐剂关节炎大鼠滑膜组织中核因子κB表达的研究 被引量:3 2003年 目的 :研究核因子kappaB(NF κB)在佐剂关节炎 (AA)大鼠滑膜组织中的表达 ,探讨类风湿关节炎(RA)的发病机制。方法 :分别用免疫组织化学法及原位杂交法检测AA大鼠滑膜组织中NF κB蛋白及NF κBmRNA的表达。用显微图像分析系统对结果进行定量分析。结果 :AA大鼠滑膜中NF κB的蛋白及mRNA水平均较正常组明显升高 (P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,NF κB蛋白主要分布于滑膜衬里细胞、巨噬细胞、成纤维细胞及淋巴细胞中。胞浆及胞核内均有染色 ,但胞核染色较深 ,多呈团块状分布 ,而胞浆染色较浅。NF κBmRNA阳性细胞与蛋白阳性的细胞种类相同 ,主要分布于胞浆中。结论 :滑膜组织的NF 沈晖 方秀斌 刘有世关键词:佐剂关节炎 核因子KAPPA 人海马区血管显微解剖 被引量:4 2003年 目的:探讨人海马血供的形态学特征,为海马区血管介入或外科手术的入路提供理论依据。方法:对固定的成人尸体海马区进行显微解剖,追踪动脉来源和分布,并测量各动脉的口径。结果:海马血供具有多源性。海马前区、海马头、海马体、海马尾、海马后区分别由多种来源动脉供应,但动脉主要来自大脑后动脉及其分支(83.85%)和脉络膜前动脉(16.15%)。口径自0.31 mm到0.77 mm不等。结论:海马血供具有多源性。主要来自大脑后动脉及其分支和脉络膜前动脉。介入时要到达脉络膜前动脉或大脑后动脉才能有效地改善海马血供。海马内侧有许多大血管和重要的脑结构,经颞叶切除海马才是安全可靠的入路。 刘文瑞 方秀斌关键词:血管 显微解剖 形态学特征 心脏的降钙素基因相关肽免疫反应纤维 被引量:4 1991年 应用ABC免疫酶组织化学方法,研究了豚鼠和大白鼠心脏降钙素基因相关肽(CGRP)免疫反应神经纤维的分布。CGRP阳性反应纤维主要分布于左、右心房,左、右心室,房间隔和室间隔的肌层,以及外膜层,阳性纤维在腱索、乳头肌和冠状血管壁及其周围较丰富,本文对实验结果的功能意义进行了讨论。 方秀斌 王铁民 赵斌 金自弼关键词:心脏 CGRP 免疫组织化学 哮喘动物模型免疫炎症反应发生验证的要点 被引量:22 2007年 目的:了解哮喘免疫炎症反应发生和验证要点,为确保实验的成功打下基础。方法:就哮喘模型制备的动物选择,模型制备的时间,模型制备的方法以及如何评定动物哮喘模型成功作经验性的总结及对国内外对哮喘模型比较经典的认同的方法加以阐述。结果:①选用豚鼠制备哮喘模型,可以很好的观察哮喘发作症状,接受致敏物质后反应程度与其他动物相比较强,能产生I型变态反应。②哮喘模型的制备时间应避开冬天,春夏时节最为合适,制备的哮喘模型炎症反应明显。③1%卵蛋白雾化吸入激发哮喘比较科学。④通过哮喘症状,动物肺功能仪测定肺功能,苏木精伊红病理染色,酶联免疫吸附测定血清IgE水平4种方法做哮喘免疫炎症反应的定性分析。结论:根据不同的研究目的选用相应的动物、恰当的致敏时间,制定稳妥的方法和良好检验手段是确保实验成功的关键。 刘素芝 刘玉丽 曹国龙 方秀斌关键词:哮喘 动物模型 降钙素基因相关肽减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质tau磷酸化 2007年 目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质tau蛋白过度磷酸化的影响。方法:用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学SABC法、Western Blotting和图像分析方法检测大鼠顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化程度和总tau蛋白表达、以及CGRP对缺血神经元tau蛋白过度磷酸化的影响。结果:缺血再灌注顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平和总tau蛋白显著升高(P<0.05);CGRP组大鼠顶叶皮质tau蛋白在Ser199/202位点磷酸化水平显著低于缺血再灌注组,总tau也降低(P<0.05)。结论:CGRP明显减轻局灶性脑缺血再灌注大鼠顶叶皮质tau蛋白磷酸化程度,降低tau蛋白磷酸化水平可能对缺血神经元起保护作用。 张正洪 曲鹏 邓兆宏 方秀斌关键词:降钙素基因相关肽 脑缺血 TAU蛋白 磷酸化 神经生长因子对实验性哮喘豚鼠降钙素基因相关肽的调节作用 被引量:7 2004年 目的探讨实验性哮喘时神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对降钙素基因相关肽(calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)的调节机制。方法应用放射免疫分析方法检测卵蛋白致敏致喘豚鼠下呼吸道和内脏感觉传入部位CGRP含量的变化。结果哮喘组豚鼠气管、支气管、肺、C7~T5段脊神经节和相应节段脊髓后角、结状神经节及孤束核区CGRP含量(pg/g)分别为71.72±17.82,75.56±19.23,82.85±23.33,83.83±21.29,74.47±22.25,77.65±20.21和69.95±12.27,显著高于生理盐水对照组(48.06±12.32,53.36±15.22,62.39±20.25,67.76±20.29,60.63±14.45,65.54±17.27,59.33±21.22),差异有显著性意义(P<0.01)。在哮喘+NGF抗体组,上述部位内CGRP含量(pg/g)分别为35.25±8.76,42.26±10.96,58.89±18.83,62.67±22.24,56.55±16.69,60.34±17.97和54.46±16.62,明显低于哮喘组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论实验性哮喘时NGF可上调下呼吸道和感觉神经节等内脏感觉传入部位的CGRP水平,两者可能参与支气管哮喘的发病过程。 刘晓湘 方秀斌关键词:神经生长因子 哮喘 降钙素基因相关肽 降钙素基因相关肽和神经生长因子对局灶性脑缺血再灌注大鼠空间学习记忆能力的影响 被引量:1 2006年 目的:观察外源性降钙素基因相关肽和神经生长因子对局灶性脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力的影响。方法:实验于2005-02/07在中国医科大学基础医学院神经生物实验室进行,取清洁级8周龄雄性SD大鼠30只,抽签法随机分为假手术组、缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组,每组10只。用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型。2h后再次麻醉大鼠,直视下轻轻拔出栓线约10mm以实现再灌注。缺血再灌注组缺血2h后经腹腔注入生理盐水1mL;降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组缺血2h后经腹腔注入2mg/L降钙素基因相关肽0.5mL和1000U/mL神经生长因子0.5mL,1次/d,连续10d,第一次给药均在缺血再灌注后15min内完成。假手术组分离血管,不插栓线、不注射药物外,其余皆同于两组动物。按照ZeaLonga5级评分法进行神经功能评分。选取评分为1,2和3分的动物进行Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力变化,比较假手术组、缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组间大鼠的空间学习记忆能力的差异。结果:实验过程中缺血再灌注组、降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组分别有3只和2只大鼠缺血再灌注后不符合模型判断标准,其余均进入结果分析。①造模10d后缺血再灌注组大鼠Morris水迷宫的隐匿平台逃避潜伏期明显比假手术组大鼠长(P<0.01);降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组大鼠隐匿平台逃避潜伏期明显比缺血再灌注组缩短(P<0.01)。②缺血再灌注组大鼠穿越原平台位置水域的次数明显比假手术组大鼠少[(1.79±0.39),(4.30±0.73)次/min,P<0.01];降钙素基因相关肽和神经生长因子治疗组大鼠穿越原平台位置水域的次数明显比缺血再灌注组大鼠多[(3.16±1.03),(1.79±0.39)次/min,P<0.01]。结论:降钙素基因相关肽和神经生长因子能显著改善大鼠大脑中动� 郑广顺 杨涌杰 方秀斌关键词:脑缺血 降钙素基因相关肽 神经生长因子 颈动脉负压分流制作大鼠全脑缺血/再灌注模型 被引量:15 2001年 目的 根据解剖学和血流动力学原理建立新型大鼠全脑缺血 再灌注模型。方法 夹闭大鼠双侧颈总动脉 ,同时经右颈外动脉持续抽吸颈总动脉内血液 ,造成大鼠全脑缺血 ,抽出的血液从左股静脉回输 ;停止抽吸血液 ,去除微动脉夹 ,开始再灌注。应用脑电图、光镜和电镜等评定脑缺血的效果。结果 实验组大鼠脑电图、光镜和电镜检查均显示明显的缺血改变。结论 本模型具有全脑缺血效果可靠、再灌注充分、制备简便、成功率高并可经颈动脉注入药物等优点 ,适用于全脑缺血 花放 丁晓慧 刘文瑞 方秀斌关键词:全脑缺血 再灌注模型 颈动脉 血液 颈总动脉 光镜 TLR4与TNF-α在脑缺血再灌注小鼠海马CA1区神经元中的表达 被引量:8 2010年 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)在脑缺血再灌注损伤炎症反应中的作用。方法:采用抗TLR4抗体封闭阻断TLR4,应用HE染色观察小鼠海马CA1区组织病理学改变、Western Blot和RT-PCR检测海马TLR4蛋白和mRNA表达量,免疫组化方法检查TNF-α表达。小鼠随机分为3组,即假手术组(S组)、缺血再灌注组(I组)和TLR4阻断组(T组),各组又分12,24,48和72h4个时间点组。结果:缺血再灌注组TLR4蛋白、TLR4 mRNA和TNF-α表达水平明显高于假手术组表达水平(P<0.05),而TLR4阻断组TLR4蛋白、TLR4 mRNA和TNF-α表达水平明显少于缺血再灌注组(P<0.05)。相关分析表明,TLR4 mRNA表达水平与TNF-α含量呈显著正相关(P<0.01)。结论:本结果提示缺血再灌注可激活TLR4,TLR4在脑缺血再灌注损伤中起重要作用;炎性因子TNF-α的产生、分泌可能与TLR4 mRNA表达存在密切联系。 高音 王玉 张翠香 方秀斌关键词:脑缺血再灌注 TNF-Α 大鼠血管性痴呆模型制作 被引量:56 2002年 目的 :制作大鼠血管性痴呆 (VD)模型。方法 :2 VO法 (双侧颈总动脉永久性结扎 )对 30只Wistar大鼠进行处理 ,通过Morris迷宫实验检测其定位航行和空间探索行为功能 ,判断实验组模型学习记忆和空间记忆的认知能力 ,并与正常对照组进行对比。结果 :实验组与正常对照组定位航行实验和空间探索实验均有十分显著差异 (P <0 .0 1) ,痴呆率为 83% ,轻度痴呆占 40 % ,中度痴呆占 5 6 %和重度痴呆占 4%。结论 :2 VO法制作的血管性痴呆模型具有制作简单、成功率高、重复性好、痴呆症状稳定等优点 ,可以作为血管性痴呆模型用于基础实验研究。 赵宪林 方秀斌 李东培关键词:血管性痴呆