张立坚
- 作品数：56 被引量：260H指数：9
- 供职机构：广东医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学轻工技术与工程更多>>
- 液相色谱-串联质谱分析组织中基因组脱氧核糖核酸羟甲基胞嘧啶水平被引量：3
- 2012年
- 5-羟甲基胞嘧啶通过阻止脱氧核糖核酸(DNA)甲基化转移酶1(DMNT1)甲基化胞嘧啶来影响DNA甲基化的程度。本文建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定组织中全基因组5-羟甲基胞嘧啶水平的方法。采用苯酚-氯仿提取组织DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,DNA裂解液加入同位素胞嘧啶作内标,经N2吹干后,加乙腈-水(9∶1,v/v)溶解,用LC-MS/MS检测5-羟甲基胞嘧啶的含量,并计算全基因组中5-羟甲基胞嘧啶的水平。结果表明,5-羟甲基胞嘧啶的线性范围为0.1～30 ng/mL,相关系数为0.996 9,检出限(信噪比为3计)和定量限(信噪比为10计)分别为0.057 ng/mL和0.090 ng/mL;日内相对标准偏差和日间相对标准偏差分别为5.13%和6.24%;加标回收率为90.24%～97.53%。用该方法检测了大鼠大脑组织DNA羟甲基化水平,平均结果为0.66%。该方法简便,重现性好,灵敏度较高,能满足全基因组5-羟甲基胞嘧啶定量检测的要求。
- 陈丽宇张立坚张良滔蔡春
- 关键词：液相色谱-串联质谱
- 橘红珠、橘红及化橘红挥发油成分的比较被引量：4
- 2006年
- 目的:比较柑橘属3种中药材橘红、化橘红及橘红珠挥发油的化学组成。方法:提取橘红、橘红珠挥发油,用气相色谱-质谱分析其化学成分组成及挥发油含量,并与程荷凤分析化橘红的结果进行比较。结果:橘红、化橘红及橘红珠的挥发油含量分别为1.5%、1.8%和0.3%,主要成分有柠檬烯、β-香叶烯、γ-萜品烯、橙花叔醇、α-蒎烯、β-蒎烯等。橘红珠挥发油的大根香叶烯D含量较高,达到14.73%,而且分离出的组分数目较橘红和化橘红多。结论:橘红珠挥发油中的组分更丰富。
- 张立坚蔡春王秀季
- 关键词：橘红挥发油气相色谱质谱分析
- 蛇床子素β-环糊精包合物的制备被引量：3
- 2004年
- 目的 研究蛇床子素 β-环糊精包合物的制备工艺。方法 紫外分光光度法测定包合物中蛇床子素的含量 ,以包合物的包合率为考察指标优选蛇床子素β-环糊精包合物的制备工艺。结果 主、客分子投料最佳配比1 :1 ,搅拌 6h,包合温度为 5 0℃为最佳包合条件 ,包合率为 71 .1 6%。结论 β-环糊精包合蛇床子素可以显著提高蛇床子素在水中的溶解度。
- 李宝红张立坚
- 关键词：蛇床子素Β-环糊精包合物溶解度
- 组织中全基因组DNA甲基化的液相色谱-串联质谱分析被引量：6
- 2010年
- 建立液相色谱-串联质谱测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚氯仿提取组织DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,DNA裂解液加入同位素胞嘧啶作内标,经N2吹干后,用甲醇溶解,以液相色谱-串联质谱检测胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,并计算全基因组中DNA甲基化的水平。结果表明,胞嘧啶的线性范围为1～100μg·L^-1相关系数为0.997 4,相对标准偏差为0.70%～4.09%;5-甲基胞嘧啶的线性范围为1～50μg·L^-1相关系数为0.994 8,相对标准偏差为0.60%～4.81%。胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为1 pg,日内相对标准偏差为1.86%～4.67%,日间相对标准偏差为3.72%～4.68%,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的加样回收率为86.52%～105.14%。本研究所建立的方法检测组织中DNA甲基化程度,具有专一性强、操作简便的优点,能较好的满足全基因组DNA甲基化检测的要求。
- 张俊杰张立坚刘春安张良滔蔡春
- 关键词：DNA甲基化胞嘧啶
- 正交实验法制备5F-β-环糊精包合物被引量：4
- 2004年
- 目的 制备 5F - β -环糊精以提高 5F的水溶性。 方法 采用正交实验法研究 β -环糊精对 5F的包合作用 ,并用紫外分光光度法、红外分光光度法、溶解度法验证包合物的形成。结果 以包合物的收率和包合物中 5F的含量为指标优选出最佳包合条件为主、客分子摩尔比为 1∶1,包合温度 2 5℃ ,搅拌时间 3h ,搅拌速度 30 0r·min-1。结论 包合物的溶解度显著增加。
- 张立坚李宝红东野广智邓亦峰梁念慈
- 关键词：正交实验法溶解度
- 鱼类干货中过氧化氢(H_2O_2)残留的测定被引量：2
- 2007年
- 利用过氧化氢与高锰酸钾发生定量氧化还原反应引起高锰酸钾溶液的吸光度下降，建立了用紫外一可见分光光度计测定鱼类干货（鱼鳞、鱼皮）中微量过氧化氢的方法。结果表明，回收率在87．7％～105．4％之间，该法可测定鱼类干货中的微量过氧化氢，方法简单、快速、准确度高。
- 王秀季蔡春张立坚
- 关键词：过氧化氢吸光度鱼类
- 水菖蒲根状茎与根挥发油化学成分研究被引量：11
- 2007年
- 目的分析比较水菖蒲根状茎和根挥发油化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法分别提取水菖蒲根状茎和根挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术进行分析鉴定。结果水菖蒲根状茎的主要成分是β-细辛脑(47.43%)、L-去氢白菖烯(9.75%)、异菖蒲烯二醇(5.41%)、前-异菖蒲烯二醇(3.53%);水菖蒲根的主要成分是白菖蒲烯(20.00%)、马兜铃烯(15.71%)、菖蒲二烯(14.19%)、反式-异榄香素(9.51%)。结论水菖蒲根状茎和根挥发油化学成分差异较大,在实际利用中应加以重视。
- 龚先玲典灵辉张立坚蔡春
- 关键词：水菖蒲根状茎挥发油气相色谱质谱
- 婴儿奶粉脂肪酸含量的GC-MS分析
- 为探讨市售婴儿奶粉所含多不饱和脂肪酸的差异，本文建立了奶粉中脂肪酸含量的分析方法，并分析了市面常见的18种品牌婴儿奶粉多不饱和脂肪酸的含量，重点考察DHA, AA和EPA的含量，为婴幼儿奶粉质量评价提供依据。
- 张立坚蔡春宏苹苹林美姬杨珊
- 关键词：婴儿奶粉脂肪酸不饱和脂肪酸奶粉质量
- 文献传递
- 高效液相色谱—质谱法测定对虾组织中磺胺类药物残留被引量：2
- 2010年
- 利用高效液相色谱-质谱联用技术,建立了对虾组织中磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧嘧啶、磺胺喹恶啉残留的分析方法。样品加入无水硫酸钠和乙腈后,进行匀质和提取,再用乙腈饱和的正己烷脱脂净化。通过优化色谱条件,以选择离子方式进行定量。选择离子分别为m/z 300.9,280.8,278.8,250.8。磺胺检测的线性范围是0.05～0.50mg/Kg,检测限为5μg/Kg,回收率为74.2～99.8%,RSD小于6.1%。
- 张立坚肖英蔡春
- 关键词：磺胺对虾药物残留高效液相色谱-质谱
- ent-11α-羟基-15-氧代-16-贝壳杉烯-19-酸滴眼剂含量的UV测定被引量：2
- 2004年
- 建立了半边旗提取物中活性成分ent-11a-羟基-15-氧代-16-贝壳杉烯-19-酸(5F)-聚维酮固体分散体滴眼剂中5F的UV测定法,检测波长242nm。结果表明,5F在10～50mg/ml范围内,线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为98.7%,RSD为0.80%。
- 张立坚李宝红邓亦峰梁念慈
- 关键词：固体分散体紫外分光光度法
