张渊
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学药学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人尿液中exosomes的分离及鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的分离人尿液中的exosomes,并对其超微形态学和免疫特性进行鉴定。方法以超速离心法分离健康志愿者混合尿液中的exosomes,通过负染电镜和免疫电镜技术对exosomes进行鉴定,运用1-D SDS-PAGE对其蛋白质组分进行分离。结果 4℃,17 000×g离心15 min后的上清液于4℃,200 000×g离心1 h可得到纯度较高的exosomes。负染电镜可见exosomes为扁平或球形小体,直径主要在60 nm左右;免疫电镜显示,黑色胶体金颗粒均匀分布在exosomes球形体表面,因其具有很高的电子密度而呈现为清晰可辨的黑点;1-D SDS-PAGE分析显示,exosomes高丰度条带主要分布于相对分子质量90 000～110 000之间,且出现了数条清晰的、相对分子质量在30 000～60 000之间的条带,小于30 000的条带明显减弱。结论已建立了从人尿液中分离exosomes的方法,为进一步研究潜在的疾病相关生物标志物奠定了基础。
- 李艳艳张渊代义邱峰秦霞邱宗荫
- 关键词：EXOSOMES电镜
- 尿蛋白质组双向电泳的样品制备被引量：1
- 2010年
- 目的建立与优化非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者尿液全蛋白双向凝胶电泳技术(2-DE)。方法采用4种不同的方法制备尿液蛋白质样品,以非线性预制胶条进行第一向等电聚焦,12%的SDS-PAGE进行第二向电泳,银染显色。结果以乙腈沉淀蛋白后经过超滤制备的蛋白质样品,在300μg上样量时,可获得图像清晰、分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。结论建立了较稳定的非小细胞肺癌患者尿蛋白质组双向凝胶电泳技术。
- 张渊代义邱峰李艳艳邱宗荫
- 关键词：非小细胞肺癌尿液双向电泳
- 2型糖尿病患者唾液双向电泳图谱的建立和分析被引量：4
- 2008年
- 目的:建立2型糖尿病患者唾液蛋白质双向电泳图谱,观察2型糖尿病患者与正常人唾液蛋白质差异表达情况。方法:以优化的双向电泳技术分离唾液蛋白质,银染后用专业软件进行分析,建立2型糖尿病患者与正常人唾液蛋白质双向电泳图谱,并采用二维电泳图谱专用软件对所得结果进行图谱分析。采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法对两组间比较所得目标蛋白质点进行质谱鉴定。结果:分别建立了正常人和2型糖尿病患者唾液蛋白质双向电泳图谱。结论:对比正常人和2型糖尿病患者唾液蛋白质图谱,鉴定出7种差异蛋白,为进一步研究其发病机制及治疗手段提供实验基础。
- 申琳琳张渊李惠芝邱宗荫
- 关键词：2型糖尿病双向电泳
- 非小细胞肺癌患者尿中Exosomes蛋白质组的差异表达分析被引量：9
- 2010年
- 除血浆之外,尿液是另一种寻找潜在生物标志物的重要生物材料。本研究以200000×g超速离心法分离正常人和非小细胞肺癌(NSCLC)患者尿液中的Exosomes,运用1DSDS-PAGE对Exosomes蛋白质组进行分组,从电泳胶上切取正常组和疾病组的20～31kDa条带,胰蛋白酶酶解后,进行HPLC-CHIP-MS/MS分析,并通过UniProtKB/SWISS-PORT数据库搜索鉴定了24种蛋白质,其中在NSCLC患者尿液Exosomes蛋白质组中发现了8种差异表达蛋白,包括免疫球蛋白κ的3个片段、2种Ras相关蛋白、谷胱甘肽S转移酶A2、血清淀粉样P成分前体和磷脂酰乙醇胺结合蛋白1。
- 代义张渊邱峰李艳艳邱宗荫
- 关键词：EXOSOME非小细胞肺癌
