张朝山
- 作品数：11 被引量：190H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 完整细胞打点杂交技术的建立
- 1992年
- 介绍一些将完整细胞收集在硝酸纤维素膜上裂解释放DNA,并在此基础上进行点杂交的新方法。结果可达到相对定量。此技术较传统打点杂交更为简便、快速且适于批量检测和筛选,易于推广。
- 张朝山陆应麟
- 关键词：DNA
- 人、大鼠、鸡等胚胎脑细胞的分离培养及生长分化被引量：4
- 1985年
- 为进行神经生物学和神经药理学的研究,我们建立了胚胎脑细胞分离培养的方法。人、大鼠和鸡的胚胎组织分别取自3-4月人胎儿,13-15天胎鼠、6-8天鸡胚。培养液采用伊格尔培养基加20%马血清,培养在玻璃方瓶中,应用尼龙网将脑细胞分散。人、大鼠和鸡胚脑神经细胞连续培养活存各达3个月、2个月和4个月以上。在培养过程中观察并比较胚胎脑的神经细胞和胶质细胞的生长分化。
- 赵林普肖定华陈士英张朝山
- 关键词：鸡胚脑神经颅神经周围神经脑细胞生长分化
- 电穿孔导入的LacZ基因在人肺癌细胞中的表达
- 1998年
- 选用LacZ基因作为报告基因，用电穿孔法与pSV2neo质位共转化导入人肺巨细胞癌高转移细胞株，经G418及X－gal组化法双重筛检，获得LacZ基因表达阳性的细胞克隆。经X－gal组化染色，该克隆70％细胞蓝染，再经软琼脂培养后，形成的集落蓝染率约为65％，单个集落中的细胞蓝染率可达100％，在裸小鼠皮下或尾静脉接种这一LacZ基因表达阳性的克隆细胞后，在形成的肿瘤及肺内转移灶的冰冻切片中，X－gal染色可观察到蓝染的癌细胞。但由于细胞周期不同步、遗传稳定性以及表达调控因素的影响，则可能是本实验中部分细胞染色阴性的原因。我们的实验表明，LacZ基因有可能在肿瘤转移的研究中作为一种理想标志基因。
- 陆应麟付生法陈坤张朝山屈伸尤颍健
- 关键词：LACZ基因基因转移电穿孔
- 胎鼠脊髓腹侧神经细胞的体外培养和某些神经营养因子的作用被引量：2
- 1989年
- 本文报道了胚胎大鼠脊髓腹侧神经细胞体外培养方法,应用相差显微镜、电子显微镜以及细胞化学染色等观察神经细胞的生长分化,并以神经细胞数、神经突起数及其长度为指标比较某些神经营养因子对神经细胞生长分化的作用.结果表明,培养的神经细胞中多数为运动神经元.大鼠脊髓的条件培养液、小鼠骨胳肌的条件培养液、孕酮和胰岛素等对培养的胎鼠脊髓腹侧神经细胞的生长分化具有促进作用.
- 姚晓光张朝山赵林普
- 关键词：神经细胞脊髓腹侧细胞培养
- 蛙皮素制备的抗人小细胞肺癌单克隆抗体
- 1998年
- 蛙皮素制备的抗人小细胞肺癌单克隆抗体付生法张朝山赵林普郭文君＊军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０文献报道肺癌的发生率有逐年增高的趋势，尤其是小细胞肺癌，其瘤细胞增殖快、易转移，因而对其早期诊断十分重要〔１〕。瘤细胞单克隆抗体是肿瘤的标志物，...
- 付生法张朝山赵林普郭文君
- 关键词：肺肿瘤小细胞肺癌单克隆抗体蛙皮素
- 前列腺特异性抗原单克隆抗体的研制及其初步鉴定被引量：1
- 1997年
- 本研究利用从正常男性精液中提取纯化的前列腺特异性抗原免疫小鼠，建立了２株可持续稳定分泌抗前列腺特异性抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为Ｐ１３和Ｐ２６。此２株杂交瘤细胞在体外连续传代培养半年以上，冻存后复苏仍可保持抗体分泌能力。利用所制备的单克隆抗体对良性前列腺肥大、前列腺癌、乳腺癌、胃癌、食道癌和卵巢癌病人的病理切片标本进行了免疫组化测定，证明其有一定的前列腺特异性。
- 徐元基凌世淦刘荷中张朝山张贺秋王国华宋晓国孙英勋夏芳李春海
- 关键词：前列腺特异性抗原单克隆抗体
- 检测血管生长因子作用的鸡胚绒毛尿囊膜技术被引量：154
- 1993年
- 采用改良的鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)技术,探讨血管生长因子在肿瘤发生发展过程中的作用。方法是将肿瘤细胞培养上清液或某些细胞因子,置于孵育9d鸡胚的CAM膜上,继续孵育3d后取膜,观察新生毛细血管的数量、长度与粗细,发现恶性程度高的肿瘤培养上清液促血管生长作用较强。
- 付生法陆应麟张朝山陈坤
- 关键词：绒毛尿囊膜肿瘤血管生长因子
- 前列腺特异性抗原EIA试剂盒的研制及应用被引量：4
- 2000年
- 目的建立可定量测定人血清中前列腺特异性抗原(PSA)含量的夹心ELISA法,研制PSA EIA检测试剂盒.方法从健康男性精液中提取并纯化PSA,分别免疫Balb/c小鼠和山羊制备特异性单克隆抗体和多克隆抗体 ,并以纯化的PSA为标准品 ,建立可定量测定血清中PSA含量的夹心ELISA法。在此基础上组装PSA EIA试剂盒 ,对该试剂盒的特异性、灵敏度、精密度、正确性和稳定性等多项指标进行评价。应用该试剂盒检测了615份临床标本和部分血清样品 ,并与美国Hybritech公司经FDA批准的Tandem EPSA检测试剂盒进行了比较。结果我们研制的试剂盒的特异性、灵敏度、精密度、正确性和稳定性等多项指标 ,均已达到临床应用要求 ,与国外进口试剂盒的相关性良好 (r=0.983)。结论研制的PSA EIA试剂盒为临床早期诊断前列腺癌提供了有用的工具 ,适合在国内推广应用。
- 徐元基凌世淦刘荷中夏芳王国华张贺秋张朝山陈坤艾桂萍何美懿
- 关键词：前列腺特异性抗原ELISA前列腺癌
- 金属蛋白酶抑制剂TIMP-2基因转染对胃癌细胞体内外生长侵袭与细胞外基质的相关性被引量：8
- 1998年
- 目的探讨金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰ２）基因转染后胃癌细胞的体内外侵袭能力的改变及胶原与胶原酶的变化规律．方法将人全长ＴＩＭＰ２ｃＤＮＡ基因构建于改构的逆转录病毒载体ｐＬＭＴ，经基因转染法导入人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，Ｇ４１８筛选获阳性细胞．利用裸鼠肾包膜下移植模型，采用免疫组化和原位杂交方法，观察肿瘤发展过程中的不同时期ＴＩＭＰｓ／ＭＭＰｓ（基质金属蛋白酶）ｍＲＮＡ，Ⅳ型胶原表达的情况．结果随着肿瘤移植后时间的延长，瘤细胞侵袭基底膜处Ⅳ型胶原缺失，瘤巢周围ＭＭＰｓ含量丰富．通过体外实验，观察到ＳＧＣ７９０１Ｔ２细胞ＴＩＭＰ２ｍＲＮＡ及蛋白活性均高于母系ＳＧＣ７９０１细胞，ＴＩＭＰ２可抑制基质金属蛋白酶的活性，减弱肿瘤细胞的侵袭体内外移动速度．结论ＭＭＰｓ的高表达是肿瘤细胞侵袭的关键因素，而ＴＩＭＰ２基因是恶性肿瘤侵袭和转移的负调控因子．
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- 关键词：金属蛋白酶类TIMP-2
- 培养细胞盖玻片原位杂交方法被引量：1
- 1994年
- 介绍一种简便易行的培养细胞盖玻片原位杂交方法。用光敏生物素标记的抑癌基因Ｐ＿（５３）和表皮生长因子受体基因的ｃＤＮＡ片段为探针及胶体金标记链亲和素检测系统，把人乳腺癌细胞直接培养在盖玻片上进行原位杂交。杂交结果显示人乳腺癌细胞株ＭＤＡ和ＭＣＦ－７ｍＲＮＡ的表达。该方法具有杂交材异性强、敏感度高、杂交时间短、操作简单等特点。
- 陈陆应麟张朝山付生法
- 关键词：原位杂交光敏生物素细胞培养
