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张志坚: 作品数：189 被引量：714H指数：13; 供职机构：无锡市人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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促进内皮祖细胞生长的细胞外基质组织工程血管支架的研究: 2009年; 目的研究鼠骨髓来源内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）在不同类型细胞外基质支架上的生长特性，为EPCs生长寻找新的生物组织工程血管支架。方法EPCs种植于细胞外基质支架（extracellular matrix，ECM）上。培养不同时间点用免疫荧光技术鉴定并细胞记数；电镜观察支架表面结构及EPCs的生长情况；Western blotting法、real-time PCR法检测VWF（von Willebrand factor）蛋白及mRNA表达变化。结果在1、3、5h3个检测点的压缩组细胞贴壁率明显高于未压缩组（P〈0．01）。在1、3、7d压缩组的细胞数明显高于未压缩组（P〈0．05），10d后差异无统计学意义，且压缩组细胞形态较成熟，与内皮细胞相似，有一个较平整的细胞平面。Western blotting检测表明3、7、10dVWF蛋白在压缩支架上表达比未压缩支架上强，14d后两组表达相当。real-time PCR结果示3、7、10d压缩组VWF基因表达量明显高于未压缩组（P〈0．01），14d后两组表达无差异。结论压缩ECM更能促进EPCs黏附、增殖和分化，可作为一种新的合成人工血管的生物组织工程支架。; 步雪峰严玉兰张志坚吴浩荣; 关键词：细胞外基质内皮祖细胞血管支架

组蛋白去甲基化酶LSD1及其生物学功能被引量：11: 2010年; 赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(Lysine specific demethylase1,LSD1)的发现,表明组蛋白的甲基化修饰是一个动态可调节的过程。结构分析显示,LSD1是一个黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin adenine dinulcleotide,FAD)依赖性胺氧化酶,它能够特异性脱去单甲基化和二甲基化组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)和H3K9位点上的甲基基团。功能研究显示,LSD1定位于细胞核内,调控着基因转录的激活和抑制,被誉为细胞深处的基因"开关",在胚胎发育和肿瘤发生过程中起着重要的作用。文章主要综述了LSD1的结构、作用机制及其调控作用研究的新进展。; 邵根宝黄晓佳龚爱华张志坚陆荣柱桑建荣; 关键词：组蛋白去甲基化酶基因转录调控肿瘤抑制胚胎发育

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义被引量：8: 2017年; 目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P<0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均<0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P>0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。; 李阳潘磊梁炜张鹏钱晖许文荣张志坚蒋鹏程张徐; 关键词：胃癌外泌体血清

组织型转谷氨酰胺酶2在鼻黏膜间充质干细胞分化过程中的表达被引量：2: 2020年; 背景:外胚层间充质干细胞可在特定的外环境中定向分化为其他类型细胞,分化过程中一些特殊蛋白的表达可能直接影响其命运的方向。目的:探讨大鼠鼻黏膜间充质干细胞在成骨细胞分化和成神经样细胞分化过程中组织型转谷氨酰胺酶2的表达。方法:组织贴壁法分离培养并鉴定大鼠鼻黏膜间充质干细胞,分别进行成神经样细胞、成骨细胞诱导分化。在诱导不同时间点,采用免疫荧光检测神经相关蛋白GAP-43、TUBB3和骨相关蛋白OCN、COLⅠ的表达,免疫印迹法检测神经相关蛋白GAP-43、TUBB3,骨相关蛋白OCN、COLⅠ,神经营养因子NT-3、BDNF,细胞外基质FN、LN以及组织型转谷氨酰胺酶2的表达水平。结果与结论:①成神经诱导3 d,免疫荧光法观察可见神经元细胞特征性蛋白GAP-43和TUBB3呈阳性表达;成骨诱导7 d,免疫荧光法观察可见成骨细胞特征性蛋白COLⅠ和OCN呈阳性表达;②成神经诱导培养3,5,7 d,免疫印迹法检测神经细胞相关蛋白GAP-43、TUBB3和组织型转谷氨酰胺酶2表达水平随诱导时间延长而增高;成骨诱导7,14 d,免疫印迹法检测成骨细胞相关蛋白COLⅠ、OCN以及组织型转谷氨酰胺酶2水平随诱导时间延长而增高;③成神经诱导7 d,免疫印迹法检测神经营养因子NT-3、BDNF和组织型转谷氨酰胺酶2水平高于未诱导对照组;成骨诱导14 d,免疫印迹法检测细胞外基质FN、LN和组织型转谷氨酰胺酶2水平高于未诱导对照组;④结果表明,组织型转谷氨酰胺酶2可能参与和调控鼻黏膜间充质干细胞向神经样细胞和成骨细胞分化过程。; 吕德民史文涛陆浩毕士奇杨开元崔学文张志坚; 关键词：成骨细胞神经样细胞

骨形态发生蛋白-聚乙烯砒洛啉酮-纳米晶胶原基骨缓释系统与骨髓间充质干细胞的生物相容性被引量：2: 2012年; 背景:骨形态发生蛋白在骨组织工程中很易降解,聚乙烯吡咯啉酮理论上存在与骨形态发生蛋白结合并对其缓释的作用。目的:观察聚乙稀吡咯啉酮修饰的纳米晶胶原基骨复合骨形态发生蛋白的体外缓释效果,并与成骨细胞复合培养,以期得到一种生物相容性较为理想的缓释支架系统。方法:实验分为3组,即聚乙烯吡咯啉酮修饰的骨形态发生蛋白复合纳米晶胶原基骨组、骨形态发生蛋白复合纳米晶胶原基骨组及聚乙烯吡咯啉酮修饰的骨形态发生蛋白复合大鼠松质骨组。以ELISA法检测3种复合物的骨形态发生蛋白体外释放活性。将SD大鼠骨髓间充质干细胞分离后定向诱导为成骨细胞并种于支架上,3,7,10,14d时检测支架中的细胞计数;细胞培养14d后采用扫描电镜观察细胞生长情况。结果与结论:骨形态发生蛋白体外释放曲线可见14d后实验组上清液中骨形态发生蛋白仍保持较高的浓度。培养14d后,大鼠骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原免疫荧光染色阳性,支架中脱落细胞计数均高于对照组(P<0.05)。扫描电镜结果发现实验组支架上的细胞生长情况明显好于对照组。提示聚乙烯吡咯烷酮修饰的纳米晶胶原基骨支架具有良好的缓释骨形态发生蛋白的作用,与大鼠骨髓间充质干细胞有很好的生物相容性。; 徐晓峰陈静家狄东华刘小平王明伟张志坚; 关键词：纳米晶胶原基骨骨形态发生蛋白组织工程骨生物相容性

健康教育对血液透析患者疾病认知水平及营养状况的影响: 目的：探讨健康教育对血液透析患者疾病认知水平及营养状况的影响。方法：按照随机数字法将180例血液透析患者随机分为干预组和对照组，每组90例，对照组给予常规治疗，干预组在对照组基础上实施健康教育，干预6个月后对患者进行疾病...; 陈涵枝祁真刘斌单炜薇张志坚; 关键词：健康教育血液透析知识营养状况

胶质瘤U251细胞中CD133表达及干细胞特性分析被引量：1: 2012年; 目的:探讨CD133+细胞的生物学特性,分析CD133作为胶质瘤干细胞标记的可行性。方法:利用免疫荧光染色检测U251细胞中CD133、巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达,分析CD133+细胞与CD133-细胞中巢蛋白、NSE、GFAP阳性细胞存在的差异。结果:U251中CD133+细胞比例为0.060±0.003,在CD133+细胞中,巢蛋白阳性细胞,NSE和GFAP阴性细胞比CD133-中明显增多;在CD133-细胞中,也存在巢蛋白阳性细胞,数目较CD133+中明显减少,相反巢蛋白阴性细胞,NSE和GFAP阳性细胞明显增多。结论:胶质瘤U251细胞存在CD133+细胞,在CD133阳性和阴性细胞中,均存在干细胞样细胞,但是在CD133+细胞中此类细胞更多。; 杨伟现欧阳琦周月鹏王存祖张志坚向定朝许慧中陆晓峰; 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞

HV-CVVH在脓毒血症致不同程度急性肾损伤患者中的应用被引量：2: 2009年; 目的探讨高容量连续性静脉-静脉血液滤过(HV-CVVH)治疗脓毒血症致不同程度急性肾损伤(AKI)患者的疗效及对血浆细胞因子的影响。方法选择65例脓毒血症致AKI患者行HV-CVVH治疗,按分级诊断标准分为早期AKI组35例和非早期AKI组30例,动态观察肾功能、急性生理和慢性健康状况评分(APACHEⅡ)及细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的变化,比较两组的转归及对炎症因子的影响。结果和非早期AKI组比较,早期AKI组存活率明显增高,肾功能恢复时间明显缩短,APACHEⅡ评分下降早且幅度大,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组治疗后TNF-α、IL-6、IL-10与治疗前相比均有不同程度下降,但早期AKI组各种细胞因子浓度下降早且显著,差异均有统计学意义(均P<0.05),尤其是IL-10。结论HV-CVVH技术在脓毒血症致早期AKI患者中的应用能更好地清除炎症细胞因子,降低病死率,促进肾功能恢复。; 王凉孙铸兴刘斌严正吴锡平刘晓斌张志坚尤宇望祁真张悦; 关键词：脓毒血症急性肾损伤细胞因子

神经生长因子在NCI-H466细胞中的表达及其生物学意义: 2012年; 目的:探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在小细胞肺癌细胞株NCI-H466中的表达及肺癌脑转移的可能机制。方法:采用免疫荧光标记技术观察人小细胞肺癌NCI-H466细胞中NGF的亚细胞定位表达,并采用MTT试验及Transwell试验观察NGF对NCI-H466细胞增殖及侵袭能力的影响。结果:NGF在NCI-H466细胞中亚细胞定位表达存在细胞周期特异性,在分裂间期,NGF主要呈颗粒状分布于细胞核内;在分裂中期,NGF分布于纺锤丝上。加入外源性NGF的NCI-H466细胞增殖明显加速,侵袭能力增强。结论:NGF可以促进NCI-H466细胞增殖和迁移,中枢神经系统内高NGF水平可能是肺癌易于发生脑转移的原因之一。NGF在肺癌细胞内具有亚细胞定位表达的特点,有可能作为一种新的治疗靶点。; 樊玉龙袁志诚杨勇封云张志坚李巧玉; 关键词：神经生长因子小细胞肺癌脑转移癌

神经生长因子受体TrkA在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓表达差异的研究被引量：5: 2002年; 为了探讨神经生长因子 ( NGF)受体 Trk A在新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓的分布状况、进而分析 NGF的作用机制 ,用免疫组化技术检测了新生鼠、幼鼠及成鼠脊髓 NGF受体 Trk A的表达。结果显示 ,新生鼠脊髓前角运动神经元只有胞核 Trk A表达明显 ,胞浆及胞膜无表达 ,中间带、背角均无表达。幼鼠前角运动神经元胞浆 Trk A表达明显 ,胞核少量表达 ,胞膜无表达 ;部分中间带、背角神经元胞浆有表达。成鼠前角运动神经元胞浆及部分胞膜都有 Trk A表达 ,胞核无表达 ,中间带、背角神经元胞浆以及胶质细胞也明显表达。推论 ,新生鼠时胞核中 Trk A可与配体结合引起神经元的生物效应 ;成鼠 Trk; 王永忠张志坚刘锦波姜平查小英; 关键词：新生鼠幼鼠成鼠脊髓

张志坚

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