喻麟
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 供职机构:四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:四川省应用基础研究计划项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 牛蛙生长激素基因cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达被引量:1
- 2007年
- 以成体牛蛙脑垂体总RNA为模板进行RT-PCR,克隆到牛蛙生长激素基因(bullfroggrowth hormone,bfGH)cDNA编码序列,其长度为651 bp,编码的前体GH蛋白序列经BLAST分析,与已报道的牛蛙GH蛋白质序列AAB24792、AAB19428、CAA31038的同源性分别为98.1%、96.3%、95.3%,其在Genbank的登录号为AY251538;将bfGH亚克隆到原核表达载体pGEX1-λt构建成牛蛙GH原核表达载体VGBfGH,转化BL21(DE3)E.coli得到重组菌,0.01 mol/L的IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE分析,bfGH表达率达到29.3%,融合蛋白的分子量为51 kDa.回收BfGH融合蛋白注射免疫家兔获得兔抗血清,以其为一抗,经ELISA-RA检测分析表明回收的重组蛋白能与牛蛙肝膜受体蛋白结合.
- 张海英喻麟刘海华刘崑刘世贵龙章富
- 关键词:牛蛙生长激素克隆原核表达
- 矮牵牛花香基因BSMT3的cDNA克隆与表达特征分析被引量:3
- 2007年
- 以矮牵牛花瓣总RNA为模板,RT-PCR方法克隆得到其BSMTcDNA,全长1100bp,编码357aa,与已有报道phBSMT1(GenBank No.AA0501)和phBSMT2(AAO45013)的同源性分别达到97.76%和98.6%,该序列在Gen-Bank登录号为DQ494491,命名为phBSMT3.构建的BSMT3 cDNA的原核表达质粒pGBSMT转化BL21(DE3)E.coli,获得的重组菌株经0.01mol/LIPTG诱导后得到正确表达的GST-BSMT融合蛋白带,以纯化的重组表达蛋白免疫家兔获得其兔抗免疫血清.免疫组化研究结果证实,矮牵牛花香基因BSMT在花瓣、花管中的表达量较其它组织的表达量高.
- 喻麟淳泽张海英杨涛王立洪刘世贵龙章富
- 关键词:矮牵牛CDNA克隆花香基因花瓣
- 牛蛙生长激素基因在COS_7细胞中的转染表达
- 2007年
- 应用RT-PCR技术克隆牛蛙生长激素(BfGH)的cDNA,T-A克隆法构建反向插入的pMD18-T/BfGH重组质粒,回收BamHⅠ酶切的BfGH cDNA片段,并与去磷酸化处理的真核表达载体VR1020/BamHⅠ,酶切鉴定方法筛选BfGH正向插入的重组真核表达质粒VBfGH.脂质体法介导质粒VBfGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实BfGH基因在COS7细胞中得到了正确的转染表达.
- 尉研喻麟崔佳杨土凤刘燕飞刘世贵龙章富
- 关键词:真核表达质粒转染COS7细胞
- 猪生长激素基因cDNA克隆与表达效应研究
- 以猪脑垂体总RNA为模板, 5'-CTAGGATCC CCG GCT GTG ATG GCTGCA-3'(BamHI)和5'-CA GAATTC GCA.ACA GAG ATG CCC AG-3'(EcoRI)为引物,通...
- 喻麟
- 关键词:生长激素基因CDNA基因基因克隆抗体制备