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刘敬梅: 作品数：18 被引量：133H指数：7; 供职机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

利用GFP／RFP双荧光指示载体鉴定特异性启动子功能被引量：6: 2008年; 在基因表达定位或启动子调控模式的研究中,多以gusA作为报告基因。但由于部分组织中高内源GUS背景活性或转化手段的限制,使判断基因表达定位或调控时存在很大误差。为了解决上述问题,本实验将报告基因绿色荧光蛋白(GFP)和红色荧光蛋白(RFP)融合构建双荧光标记瞬时表达载体pBI221-RFP/GFP。该载体以CaMV35S启动子驱动GFP确定转化效率,通过鉴定阳性个体的红色荧光活性分析目的基因或启动子的表达模式。并通过番茄E8和西瓜AGPL1果实特异启动子验证了该载体在启动子调控模式研究中的应用可行性。结果表明pBI221-RFP/GFP是一个可以在基因和启动子功能验证中应用的高效瞬时表达载体。; 尹涛秦巧平张上隆刘敬梅陈大明; 关键词：绿色荧光蛋白红色荧光蛋白特异性启动子

甜蛋白基因MBLII对莴苣的遗传转化被引量：23: 2001年; 以 4日龄莴苣 (LactuasativaL .)无菌苗子叶为外植体 ,通过根癌农杆菌介导 ,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因MBLII对莴苣的遗传转化。抗生素浓度和子叶外植体与农杆菌的共培养时间是影响转化的重要因素。附加卡那霉素 (Kan) 50mg/L的诱芽培养基MSI(MS +NAA 0 .1mg/L +6 BA 0 .1mg/L +羧卞青霉素 50 0mg/L)最适于侵染后子叶外植体的诱芽培养。在外植体与农杆菌共培养 0～ 7d的范围内 ,以共培养 3d最佳 (生芽率 58.3% ,白化率 2 9% )。 1～ 2cm再生芽移入诱根培养基MSII (MS +NAA 0 .0 5mg/L +Kan 50mg/L +羧苄青霉素 30 0mg/L)中 ,诱根率可达 10 0 %。获得的抗性植株经组织化学及PCR特异扩增鉴定和统计 ,7.6%阳性。Southernblot结果证明MBLII基因已整合到莴苣基因组中。; 刘敬梅陈大明陈杭; 关键词：甜蛋白莴苣

一种高羊茅干旱应答元件结合蛋白及其编码基因与应用: 本发明公开了一种高羊茅干旱应答元件结合蛋白及其编码基因与应用。该结合蛋白为具有序列表中SEQ ID №：1的氨基酸残基序列的蛋白质或为将序列表中SEQ ID №：1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加...; 刘敬梅阳文龙周海梦; 文献传递

甜蛋白Brazzein基因在番茄果实中的特异表达被引量：5: 2009年; 西瓜(Citrullus vulgaris S.)来源的AGPL1启动子在番茄(Lycopersicon esculentum L.)果实中具有较强的特异性驱动功能。将该启动子与甜味蛋白基因Brazzein融合构建植物表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法成功地进行了对番茄的遗传转化,获得转化植株。组织化学法、PCR特异扩增、Southern杂交分析及RT-PCR检测,表明Brazzein基因已整合到转基因番茄植株基因组中并且稳定表达。通过AGPL1果实特异启动子的调控,在不改变果实其他性状的前提下提高了番茄果实甜味品质,并为甜蛋白的生产提供经验。; 尹涛卢虹玉张上隆刘敬梅陈大明; 关键词：番茄

高羊茅DREB类转录因子基因的分离及鉴定分析被引量：23: 2006年; DREB转录因子是植物中特有的与低温、高盐和干旱胁迫相关的反式作用因子。为了分离和鉴定高羊茅(Festuca arundinaceaSchreb.)DREB转录因子基因,我们构建了冷诱导(4℃)的高羊茅cDNA文库,用拟南芥DREB1A基因作探针筛选该文库得到一个DREB类基因FaDREB1。序列分析表明,FaDREB1具有一个651bp的开放阅读框和229bp的3’非编码区,推测的氨基酸序列中含有一个高度保守的EREBP/AP2结构域。酵母单杂交结果表明FaDREB1蛋白能在体外特异结合DRE元件,并具有转录激活功能。Northern杂交结果发现FaDREB1基因受低温的诱导表达,对高盐、干旱和ABA没有反应,说明FaDREB1基因在高羊茅植株对低温的应答反应中起重要作用。; 阳文龙刘敬梅刘强公衍道赵南明; 关键词：高羊茅 DRE元件转录因子胁迫

高羊茅MAPK基因的克隆与表达分析(英文)被引量：2: 2006年; 丝裂原活化蛋白激酶(M APK)是生物体内信号转导的重要组分,与生长、发育和逆境胁迫反应密切相关.为了研究草坪草对非生物逆境胁迫反应的分子机理,利用同源基因克隆法从4℃低温诱导的草坪草高羊茅(F estu-ca arund inacea Schreb.)幼苗cDNA文库中分离得到一个M APK的cDNA即F aMAPK 1,F aMAPK 1编码369个氨基酸残基的蛋白激酶,该蛋白激酶具有TEY的磷酸化基序.据推测的氨基酸序列的BLA ST同源性分析表明,F aM APK 1蛋白与水稻O sM APK 4蛋白的一致性为91.1%.N orthern杂交检测F aMAPK 1基因对逆境胁迫反应的结果表明冷(4℃)处理对根中F aMAPK 1基因的表达没有明显影响,但诱导叶中F aMAPK 1上调表达.而且低温(4℃)、高盐(250 mm o l/L N aC l)、干旱和100μm o l/L ABA都诱导叶中F aMAPK 1上调表达,表明F aM APK 1蛋白可能在高羊茅对非生物逆境胁迫的反应中起重要作用.; 阳文龙刘敬梅刘强公衍道赵南明; 关键词：丝裂原活化蛋白激酶高羊茅

甜蛋白基因MBLII对西瓜的遗传转化研究: 以4日龄黑崩筋西瓜子叶为外植体,根癌农杆菌LBA4404/pLX10介导,进行了马槟榔甜蛋白基因MBLII的遗传转化研究.在子叶外植体预培养0、2、4、6、8天的研究中,预培养4天最佳,GUS阳性芽得率26.3℅.超声波...; 刘敬梅陈大明唐晓伟陈杭; 关键词：甜蛋白西瓜转基因植株; 文献传递

胡萝卜茄红素β-环化酶cDNA的分离及其在肉质根中的差异表达被引量：7: 2001年; 利用 5′和 3′RACE技术从胡萝卜 (DaucuscarotaL .)肉质根中分离了茄红素 β_环化酶基因的全长cDNA。该cDNA长 2 0 89bp ,包含一个 15 15bp的开放阅读框架 ,所编码的肽链长 5 0 5个氨基酸 ,其一级结构与番茄 (Lycoper sicumesculentumMill.)、烟草 (NicotianarusticaL .)和辣椒 (CapsicumfrutescensL .)等植物的茄红素 β_环化酶高度同源。茄红素 β_环化酶在胡萝卜肉质根中的表达受品种特异性的调控 ,在CA2 0 1胡萝卜肉质根中表达十分活跃 ,而在“齐头红”胡萝卜肉质根中该基因的表达受到了强烈的抑制。; 陈大明薛颖刘敬梅王永健陈杭; 关键词：胡萝卜类胡萝卜素生物合成基因表达 CDNA 肉质根

西瓜wml15’端启动子区域对番茄的遗传转化及其转录调控功能研究被引量：2: 2003年; 根据wml1 5’端启动子区域内部的限制性酶切位点,分离得到长度分别为1573bp、1197bp、896bp、795bp的片段,并与GUS基因融合构成转录融合体。用农杆菌介导法将这些片段转入番茄中,对转基因植株进行GUS活性分析,发现1573bp、1197bp、896bp的片段都能诱导GUS在授粉后15天、30天、45天的番茄果实中表达,且表达强度随果实发育而增强,而在叶片、茎、根中未检测到GUS基因表达。而795bp的片段转化的植株中则未检测到GUS基因表达。推定857bp至957bp之间的序列中包含了启动子行使正常功能必需的元件。; 吴韩英刘敬梅朱祝军杨信廷陈大明; 关键词：转录调控启动子果实特异性番茄西瓜