刘冠兰
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化功能研究
- 已证实磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase ,PHGPx）可以通过降低磷脂过氧化程度来防止膜过氧化损伤。自1982年PHGPx被作为...
- 刘冠兰
- 关键词：活性氧萝卜谷胱甘肽过氧化物酶抗氧化
- 文献传递
- 原核表达的萝卜PHGPx和谷胱甘肽对NIH3T3细胞氧化损伤的联合保护作用被引量：1
- 2010年
- 将大肠杆菌中高效表达的萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)及其底物还原型谷胱甘肽(GSH)联合作用于H2O2、过氧化叔丁基(t-BHP)以及磷脂氢过氧化物(PLPCOOH)损伤的小鼠NIH3T3成纤维细胞,研究其对于细胞过氧化损伤的保护作用。发现单独加入10μg/ml RsPHGPx并不能明显保护细胞应对过氧化损伤,但是10μg/ml RsPHGPx与3mg/mlGSH共同作用,可显著提高GSH对细胞过氧化损伤的保护效果,提高细胞存活率,降低细胞膜脂质过氧化水平和胞内活性氧(ROS)水平,保护细胞维持形态完整和抑制细胞凋亡。这一联合作用结果说明RsPHGPx的催化作用可以快速清除细胞内多种过氧化物,高效地保护细胞免受过氧化损伤,为RsPHGPx的应用提供了实验依据。
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- 关键词：谷胱甘肽
- 原核表达的萝卜PHGPx对黑色素瘤B16细胞紫外辐射损伤的恢复作用被引量：3
- 2010年
- 将大肠杆菌中高效表达的萝卜PHGPx(RsPHGPx)和突变的RsPHGPx(mRsPHGPx)融合蛋白,经Glutathione Sepharose 4B柱亲和纯化和PreScission蛋白酶柱上酶切,获得了不含GST标签的RsPHGPx和mRsPHGPx重组蛋白,纯度在90%以上。酶活测定验证了活性中心Cys突变的mRsPHGPx的活性显著低于RsPHGPx。考察RsPHGPx和mRsPHGPx对紫外辐射损伤后的黑色素瘤B16细胞的恢复作用,发现活性较高的RsPHGPx能有效提高细胞存活率,降低细胞膜脂质过氧化水平,而活性极低的mRsPHGPx则几乎没有效果,提示由于RsPHGPx能快速清除多种脂类过氧化物,可能主要通过抑制紫外辐射造成的细胞膜脂质过氧化损伤起作用。
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- 关键词：定点突变紫外辐射
