何奎芳
- 作品数:35 被引量:59H指数:5
- 供职机构:温州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省自然科学基金中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学轻工技术与工程机械工程更多>>
- 变形链球菌表面蛋白遗传多态性与黏附作用关系的初步研究被引量:1
- 2004年
- 庄姮刘天佳刘建国杨德琴何奎芳李颂
- 关键词:变形链球菌表面蛋白遗传多态性限制性片段长度多态性分析
- 变形链球菌自溶素真核载体质粒pcDNA3.1(+)-tPA/AtlA/IRES/eGFP的构建
- 目的:构建变链菌自溶素真核表达质粒pcDNA3.1 (+)-tPA/At lA/IRES/eGFP,为进一步研究变链菌自溶素(AtlA)的功能奠定基础.方法:(1)通过对变链菌UA159生物信息学分析,确定自溶素AtlA...
- 何奎芳潘乙怀邓辉武艳飞
- 关键词:变形链球菌
- 变形链球菌表面蛋白可变区真核载体质粒pEGFP-N1-SrV+的构建及在293T细胞的表达
- 何奎芳郑铁丽张大风朱金艳麻健丰生宏
- 大鼠牙髓组织中甲硫氨酸脑啡肽合成位点及其调控的实验研究
- 目的:检测大鼠牙髓组织甲硫氨酸脑啡肽(MEK)的细胞内生物合成位点及其凋控。方法:(1)将健康雄性大鼠随机分成 4组,第1组为对照组,第2组为牙髓炎组,第3组为FOY-305注射组,第4组为牙髓炎加FOY-305注射组,...
- 潘乙怀刘传通何奎芳
- 关键词:牙髓脑啡肽甲硫氨酸
- 变形链球菌表面蛋白可变区真核载体质粒pEGFP—N1-SrV+的构建及在293T细胞的表达被引量:2
- 2011年
- 目的构建变形链球菌(变链菌)表面蛋白可变区(extended-v)真核表达质粒pEGFP—N1-SrV+,并转架哺乳动物细胞293T,为进一步研究该区功能奠定基础。方法根据已报道变链菌OMZl75的srv+基因序列,化学合成SrV+的编码基因srv+,将真核载体质粒pEGFP—N1和srv+基因片段分别用KpnⅠ/XhoⅠ双酶切,连接获取重组质粒pEGFP-N1-Srv+,并对其进行PCR、酶切和测序鉴定。通过H旨质体法瞬时转染哺乳动物细胞293T。运用荧光显微镜观察、Westernblot及real-timePCR法橙。目的蛋白在293T细胞中的表达情况。结果通过基因化学合成技术,获得1136bp的目的基因srv+,经测序鉴定与模板目的基因序列一致;成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-SrV+;PCR扩增检测可获得1.33kb目的基因片段;KpnI/XhoI双酶切可见4.7kb和1.1kb两条电泳条带,证实重组质粒pEGFP-N1-SrV+携带目的基因;通过荧光显微镜观察到重组质粒pEGFP.N1-SrV+融合GFP后的表达,目的细胞的转染效率达到80%以上;Westernblot检测到相对分子质量(Mr)为72×10^3处有特征条带,其大小和Srv+融合蛋白(42×10^3+28×10^3=70×10^3)相吻合;real-timePCR数值分析显示:在293T细胞中,s邢+基因的过表达效果显著。结论成功构建了真核表达载体质粒pEGFP-N1-SrV+,并能够在哺乳动物细胞293T中表达。
- 何奎芳于晓光潘乙怀刘建国亓庆国
- 关键词:变形链球菌293T细胞
- 提高口腔医学生临床实习技能的探讨被引量:8
- 2010年
- 何奎芳王淑艳唐琳
- 关键词:口腔医学生
- 不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的同源性分析被引量:3
- 2006年
- 目的分析不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的基因及蛋白质的同源性,探讨该区在防龋疫苗研制中的作用。方法以变形链球菌血清型c、d、f、g参考株及部分c型临床株为模板,PCR扩增SrV+区片段,通过内切酶DdeⅠ进行限制性片段长度多态性分析并测序,将其测序结果在NCBI服务器上用blastn搜索软件进行同源性比较。结果在相同条件下血清c、f型菌株均扩增出约1.13kb左右的片段,酶切后出现5种基因型(A、B、C、D、E)。选取所占比例较多的A、B、C型代表株进行测序,经比较显示其基因型间的同源性达92%—98%。血清d、g型无扩增产物,将g型6715表面蛋白SpaA全片段基因同OMZ175的产物序列在blastn上进行比较,有3个大小不一的片段出现同源性;血清d型OMZ176的表面蛋白基因序列在GeneBank上未能查出,故无法比较,但其相应蛋白质的同源性也在77%—82%之间,显示出相当高的同源性。结论就c、f型菌株来说,可以将该区纳入疫苗的研究范畴;d、g型虽未能扩增出相应产物,但其基因还是存在部分区域的相似性,且其蛋白质同源性很高,也可以考虑利用d、g型上同c、f型共有的某些肽段进行疫苗的研制。
- 何奎芳刘建国刘天佳杨德琴庄姮李颂
- 关键词:变形链球菌血清型同源性分析
- 变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的遗传多态性分析被引量:1
- 2006年
- 目的:从分子水平探讨变形链球菌(血清c、f型)表面蛋白可变区(extended-V,V+)的遗传状况,分析其基因中存在的变异,为进一步研究其结构和功能提供遗传信息。方法:选择临床最常见的血清型c、f型菌株117株(包括7株参考株),提取DNA,行PCR扩增,获得SrV+区片段基因;利用限制性内切酶DdeI进行限制性片段长度多态性分析(RFLP),并与部分国际参考株进行比较归类。从所占比例较多的基因型中,各选一代表株的PCR产物分别测序,将测序结果用Clone3.1version软件比较各型酶切位点。结果:117株菌株共分出5种基因型(A、B、C、D、E型);血清f型OMZ175为其中的一种;A型48株,B型45株,C型20株,D、E型则分别只有1株和3株,显示出明显差异;以参考株基因型为准,分别将A、B、C型定为p1样、spaP样或sr样、pac样;D型只有1株临床株,不排除实验过程中突发变异的可能;E型的3株也为临床株,尚无参考株与其相对应。结论:变形链球菌(血清c、f型)表面蛋白可变区呈多态性分布,有5种基因型,分布较为集中者分别为p1样、spaP或sr样、pac样,且血清f型属于血清c型的spaP样。
- 何奎芳刘建国刘天佳庄姮杨德琴潘乙怀
- 放射性龋的研究现状被引量:4
- 2015年
- 头颈部肿瘤患者接受放疗以后,龋齿的发病率明显增加,这种由放射性治疗导致的牙体硬组织严重进行性破坏的疾病称为放射性龋。据报道[1]全球每年约有50万被诊断为头颈部肿瘤的新患者。在美国,头颈部肿瘤约占所有肿瘤的5%,在花费最高的肿瘤中排名第八位[2]。头颈部肿瘤对放疗较敏感,单独使用放疗或与手术和化疗联合,大大提高了恶性肿瘤的治愈率。
- 武艳飞何奎芳
- 关键词:放射性治疗变形链球菌免疫防龋窝沟封闭术玻璃离子材料
- 表没食子儿茶素没食子酸酯对人牙周韧带细胞增殖作用的研究
- 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对人牙周韧带细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)体外培养中是否存在增殖作用....
- 唐琳何奎芳曹金芳王惠宁
- 关键词:没食子儿茶素没食子酸酯牙周韧带细胞细胞增殖