乌伊罕
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划博士科研启动基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭肠炎病毒gB基因的分子特征被引量：3
- 2009年
- 鸭肠炎病毒是鸭病毒性肠炎的病原,被划分为疱疹病毒科成员。gB是疱疹病毒感染和复制所必需的糖蛋白,能刺激机体产生中和抗体和细胞免疫应答,在疱疹病毒家族中高度保守。通过PCR技术获得了DEV C-KCE株gB基因的核苷酸序列,首次对DEVgB基因及编码氨基酸进行了较为详尽的生物信息学分析。结果表明,DEVgB基因与α-疱疹病毒的马立克氏病毒属亲缘关系最近;DEV gB蛋白具有与其他疱疹病毒gB相同或相似的结构、N糖基化位点、半胱氨酸残基、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)结合位点、弗林蛋白酶水解位点和胞浆区PACS-1识别位点。
- 马波刘峰源张扬乌伊罕刘晓玫王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒鸭瘟GB基因糖蛋白
- 鸭肠炎病毒ul47基因的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 提取鸭肠炎病毒(DEV)基因组DNA,采用PCR方法扩增获得了DEVul47基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组质粒pET-30a-ul47,并转化受体菌Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析。结果显示,ul47基因在大肠杆菌Rosetta中获得与预期大小相符的表达蛋白。利用Ni-NTA纯化表达蛋白,制备了兔抗DEV UL47蛋白的多克隆抗体,经琼脂双扩散测定,该抗血清效价为1∶16。间接免疫荧光试验和蚀斑减数中和试验结果显示,DEV UL47蛋白主要定位于感染细胞的细胞质和细胞膜,制备的兔抗DEV UL47多克隆抗体对DEV有中和活性。
- 张杨刘峰源乌伊罕刘晓玫王君伟马波
- 关键词：鸭肠炎病毒原核表达间接免疫荧光试验
- 携带AIVHA基因鸭肠炎病毒转移载体的构建被引量：1
- 2011年
- 为了获得携带禽流感病毒(AIV)HA基因鸭肠炎病毒转移载体,试验采用基因工程方法构建了带有CMV启动子、多克隆位点(MCS)及牛生长因子转录终止信号和加poly(A)信号(BGHpA)等真核表达元件的载体pET-3.1,将H5N1亚型禽流感病毒HA基因插入pET-3.1,再将携带真核表达元件的HA基因插入鸭肠炎病毒通用转移载体pUC-TK-LacZ-2中TK基因的XhoⅠ位点。结果表明:获得了携带AIV HA基因的鸭肠炎病毒转移载体。
- 马波邢明伟刘晓玫乌伊罕韩先杰王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒HA基因
- 鸭肠炎病毒gB胞浆区基因片段的克隆及原核表达被引量：3
- 2011年
- 为了研究鸭肠炎病毒gB胞浆区的反应原性,以鸭肠炎病毒C-KCE株为模板,扩增了gB胞浆区基因片段,并构建了其原核表达载体pET-32a-gB-N,将其转化至大肠杆菌感受态细胞Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,用SDS-PAGE及Western-blot检测目的蛋白的表达情况及其反应原性。SDS-PAGE分析表明获得了30ku的融合蛋白,在Western-blot检测中,纯化的融合蛋白可与鸭肠炎病毒阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。
- 马波李洪涛刘峰源张扬刘晓玫乌伊罕王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒反应原性
- 鸭肠炎病毒gE基因部分功能研究与转移载体构建
- 鸭病毒性肠炎（Duck viral enteritis，DVE），又名鸭瘟（Duck plague，DP），是由鸭肠炎病毒（Duck enteritis virus，DEV）引起的鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性、热性、...
- 乌伊罕
- 关键词：鸭病毒性肠炎鸭肠炎病毒GE基因免疫功能
- 文献传递
- 表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE基因转移载体构建
- 2009年
- 本实验利用PCR方法扩增DEVC-KCE株gE基因片段(包含gI基因及其侧翼序列),扩增产物克隆入pGEM-T载体测序后亚克隆至pUC19 EcoRI、SalI位点间,获得pUC-gE。将增强型绿色荧光蛋白表达盒插入pUC-gE BamHI位点,构建转移载体pUC-gE-EGFP。该转移载体有7个单一酶切位点可供外源基因插入,上下游侧翼分别为1.57Kb和1Kb。将转移载体pUC-gE-EGFP转染鸭胚成纤维细胞(DEF),观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得有效表达,为开发以鸭肠炎病毒为载体的多价、多联基因工程疫苗提供了物质基础。
- 乌伊罕赵妍刘晓玫张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒绿色荧光蛋白
- 鸭肠炎病毒ul27基因编码产物B细胞线性表位优势区的初步鉴定
- 将DEVC-KCE株ul27基因9个片段插入原核表达载体pET-32a后转化宿主菌Rosetta(DE3)PlysS进行诱导表达,纯化后的产物以鸭抗DEV高免血清进行Western blot分析,结果表明UL27-1、U...
- 马波刘峰源张杨刘晓玫乌伊罕赵妍张智慧王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒GB
- 文献传递
- 鸭肠炎病毒gE基因胞外区的原核表达与抗原性分析
- 2010年
- 乌伊罕赵妍刘晓玫张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒抗原性分析原核表达GE基因胞外区病毒性肠炎
- 鸭肠炎病毒us2基因转移载体的构建
- 2009年
- 以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增得到us2全基因(包含s3、us3部分基因),将扩增产物克隆入pMD18-T载体,EcoRⅠ和HindⅢ双酶切连入pUC19载体,获得质粒pUC-us2。将完整的EGFP表达盒插入us2基因内BamHⅠ位点,得到转移载体质粒pUC-us2-EGFP。脂质体法将转移载体质粒pUC-us2-EGFP转染DEF细胞,观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得表达。
- 刘晓玫赵妍乌伊罕张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒
