丁红梅
- 作品数:83 被引量:122H指数:6
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- miR-1273g-3p通过靶向CNR1调节A549细胞迁移能力被引量:1
- 2014年
- 目的寻找hsa-miR-1273g-3p在人肺腺癌细胞A549中的特异性靶标并探索其生物学功能。方法定量PCR(qPCR)检测miR-1273g-3p在人肺癌细胞A549、H460和H1299中表达情况,利用生物信息学方法预测miR-1273g-3p靶基因,qPCR、免疫印迹(Western Blot)和荧光素酶实验确证靶标,划痕实验和MTS实验验证miR-1273g-3p的生物学功能。结果miR-1273g-3p在非小细胞肺癌细胞系A549、I-1460和H1299中高表达:qPCR、Western印迹和荧光素酶实验证实miR-1273g-3p能够靶向CNR1,可以在mRNA与蛋白水平上调控CNR1的表达;miR-1273g-3p能够通过改变CNR1的表达水平影响A549的细胞迁移能力,对细胞增殖影响不明显。结论研究证明CNR1是miR-1273g-3p的靶基因,揭示miR-1273g-3p通过靶向CNR1影响A549细胞迁移的新功能。
- 侯绿滨苏雪婷秦性良丁红梅黄皑雪李慧葛兴枫赵强李洁邵宁生
- 关键词:细胞迁移
- 小鼠sidt2基因的可变剪接验证
- 2008年
- 目的:验证小鼠基因sidt2中sidt2(l)和sidt2(s)为同一基因经可变剪接所得的结果。方法:对小鼠sidt2基因进行生物信息学分析及基因组PCR,确定其基因组定位情况;通过提取总RNA、RT-PCR,了解sidt2在小鼠多种组织中的表达情况;构建可变剪接报告载体,转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,并提取细胞总RNA、RT-PCR,检测其在细胞中的剪接行为,验证该基因存在可变剪接。结果及结论:证实小鼠sidt2存在可变剪接,其两条序列sidt2(l)和sidt2(s)为可变剪接的产物。
- 刘舒云李洁陈留存曹国军李少华赵强丁红梅高亚萍刘农乐王芳杨光邵宁生
- 关键词:可变剪接组织表达谱
- 一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因鉴定方法和应用
- 本发明属于生物技术领域,涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法;涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现:首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件,如Targetsc...
- 邵宁生李洁黄宝春夏伟陈留存李少华苏雪婷王芳丁红梅
- 文献传递
- 一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用
- 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用。本发明设计V4-2特异性的序列,采用5’端或3’端修饰、标记(如FITC、生物素或者地高辛)的方法检测V...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁黄皑雪赵强
- 人vasorin蛋白的基因克隆、表达及纯化被引量:3
- 2014年
- 目的:克隆、表达人vasorin(VASN)蛋白。方法:利用PCR方法从HepG2细胞的cDNA中扩增获得目的基因,并插入带有6×His标签的原核高效可溶性表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-VASN,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后目的基因获得表达,对融合目的蛋白进行Ni2+金属螯合柱纯化。结果:内切酶鉴定及基因序列测定证实重组表达质粒构建成功;对目的蛋白进行了原核表达,SDS-PAGE显示相对分子质量为61×103的特异表达条带;Western印迹证实目的蛋白为VASN,且主要以包涵体形式存在;对经尿素变性的表达产物进行了亲和层析纯化,有利于以后的变性、复性过程。结论:获得了人VASN融合蛋白,为其进一步的生物学功能研究奠定了基础。
- 丁红梅赵强王玮李慧刘农乐李洁苏雪婷黄皑雪房涛李少华邵宁生
- 关键词:原核表达纯化
- 一种肝癌药物治疗的靶标及其应用
- 本发明公开了属于医学肿瘤学技术领域的一种肝癌药物治疗的靶标Vasorin蛋白及其应用。本发明通过液相差异SELEX的方法,以伴肝外转移的AFP阴性HCC患者血清为靶标,以正常人血清为消减靶标,获得特异识别肝癌患者血清的富...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁夏伟刘农乐赵强王芳
- 肿瘤坏死因子-α体外RNA伴侣分子活性研究
- RNA伴侣分子的定义是辅助RNA正确折叠的蛋白分子。RNA伴侣分子在所有生物中都是普遍而丰富存在的,但是现在尚未有细胞因子具有RNA伴侣分子活性的研究和报道。肿瘤坏死因子TNF-α是一种常见的炎症相关的细胞因子,我们首次...
- 曹国军杨光刘朝晖刘雪梅张洁张达矜刘农乐丁红梅范明沈倍奋邵宁生
- 关键词:细胞因子肿瘤坏死因子-Α活性研究RNA
- 文献传递
- TRAP蛋白的抗体制备和初步应用
- 2004年
- 金黄色葡萄球菌分泌的RAP蛋白通过其靶分子TRAP蛋白的磷酸化来激活RNAⅢ的转录。用TRAP蛋白免疫家兔得到效价为1∶128000的多抗血清。纯化后的抗体可以特异识别不同菌株的TRAP蛋白,并抑制TRAP蛋白磷酸化,降低金黄色葡萄球菌外毒素的分泌。
- 高亚萍杨光丁红梅柳川沈倍奋邵宁生
- 关键词:TRAP抗体制备靶分子外毒素多抗抗血清
- 以临床肿瘤病理组织切片为靶的SELEX技术方法和应用
- 本发明为临床肿瘤病理组织切片-SELEX技术方法的建立和应用,属于生物技术领域,涉及病理组织切片消减SELEX筛选方法,以及其在疾病分子探针的制备和生物标志物的筛选方面的应用。本发明通过建立的石蜡包埋病理组织切片的消减S...
- 邵宁生李少华丁红梅黄艳萍徐华曹晓晓杨光赵强沈倍奋
- 文献传递
- 重组人骨形态发生蛋白-2的基础与应用基础研究
- 王会信刘农乐邵宁生赵明丁红梅王芳薛沿宁杨光
- 该项目研究了重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的基因表达、表达产物的复性、纯化、单克隆抗体的制备、中试规模的生产工艺以及作为国家1类新药申报所需要的各项技术数据,其中包括药学、药理学、毒理学、药代动力学等方面的实...
- 关键词:
- 关键词:重组人骨形态发生蛋白-2骨缺损