中山大学公共卫生学院实验教学中心
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 相关机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- HPLC-MS/MS测定血浆中甜菜碱和游离胆碱及其稳定性研究被引量：6
- 2011年
- 【目的】建立高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定血浆甜菜碱和游离胆碱水平,并研究血浆中两种物质的稳定性。【方法】以d9-氯化胆碱、d9-甜菜碱为内标,血浆经乙腈除蛋白后,采用SiO2柱(2.1mm×100mm,5μm)乙腈-甲酸铵缓冲液(15mmol/L,pH=3.5)等度洗脱,经电喷雾电离,选择多反应监测模式(MRM)同时测定血浆中甜菜碱和游离胆碱。【结果】血浆中甜菜碱和游离胆碱得到良好分离,最低定量限均为0.62μmol/L,线性范围均为0.62～400μmol/L。对游离胆碱的测定,日内相对标准差(RSD)为5.10%～5.85%,日间RSD为4.54%～13.26%,回收率94.15%～103.70%;对甜菜碱的测定,日内RSD为3.60%～7.30%,日间RSD为2.70%～8.10%,回收率90.03%～103.88%。稳定性研究中,游离胆碱和甜菜碱浓度随保存时间及温度增加,游离胆碱在血浆分离48h内变化小于15%,甜菜碱超过3h后变化即大于15%。3个反复冻融循环内游离胆碱浓度稳定;甜菜碱变化明显,第一个冻融循环后即增加至原始浓度3倍。【结论】高效液相色谱串联质谱法同时检测血浆中甜菜碱和游离胆碱是一种快速、准确且灵敏的方法。血浆保存时应注意保存温度、时间及反复冻融对血浆中甜菜碱和游离胆碱浓度的影响。
- 张珍真王佳佳谭炳炎王娴郑琳常颖朱惠莲
- 关键词：血浆甜菜碱稳定性
- 高效液相色谱法测定人血清甜菜碱方法的建立被引量：4
- 2010年
- 目的 采用柱前衍生高效液相色谱法-紫外检测法建立一种测定人血清甜菜碱浓度的方法.方法 以对溴苯乙酰溴和18-冠醚-6溶于乙腈制成衍生液,将其与甜菜碱反应形成的衍生物用Supelcosil LC-SCX色谱柱进行分离.流动相为乙腈∶水体积比90∶10,含16 mmol/L的氯化胆碱,等度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长为259 nm,利用甜菜碱标准品绘制标准曲线,外标法定量检测20名健康大学生志愿者血清甜菜碱.结果 甜菜碱的测定线性范围为6.25～200.00 μmol/L,回归方程Y=1 568.1X-2 747.5,R2=0.999 8.最低检测限为3.0 μmol/L.批内不精密度为1.88%～3.79%（平均3.24%）,批间不精密度为3.14%～6.76%（平均4.39%）.方法 回收率为95.89%～102.86%（平均99.16%）.结论 成功建立一种检测人血清甜菜碱浓度的方法,适用于实验室及临床常规检测.
- 常颖谭炳炎郑琳吕史维朱惠莲
- 关键词：甜菜碱紫外线
- 广州市青春期女生血清邻苯二甲酸二丁酯水平与初潮年龄相关性研究的初步观察
- 2013年
- 目的：了解广州市发育正常青春期女生（12-15岁）血清中邻苯二甲酸二丁酯（DBP）暴露水平，并初步探讨其与初潮年龄的关系。方法2012年3月，选择广州市白云区某中学30名健康体检的女生作为研究对象，采集静脉血样本，利用气相色谱-质谱联用（GC-MS）分析方法检测其血清中DBP水平，以广东地区汉族女孩2005年初潮年龄的均值12.4岁为准，将调查对象分为初潮年龄〈12.4岁组和初潮年龄≥12.4岁组，比较不同初潮年龄组女生血清DBP检出率及浓度分布的差异。结果30例女生的血样中，19例可检出DBP，检出率为63.3%，DBP的浓度范围为0-740μg/L，浓度中位数为60μg/L，且无年龄差异，其中初潮年龄〈12.4岁组检出率为75.0%，初潮年龄≥12.4岁组检出率为86.4%，且前者血清DBP浓度分布的平均秩次高于后者，但两组检出率及浓度分布差异均无统计学意义。结论30名发育正常青春期女生血清DBP检出率和浓度中位数均处于较高水平，但无年龄差异，尚不能说明青春期女生血清DBP检出率及浓度分布与初潮年龄的相关性，但值得进一步加大样本量研究。
- 何展明马蒙蒙陈清谭炳炎
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯青春期女生血清气相色谱-质谱法
- PM_(2.5)中不同组分对人脐静脉内皮细胞的联合毒性作用研究被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨PM_(2.5)中各种组分单独以及联合暴露对于人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的毒性作用,并探讨不同组分之间是否存在交互作用。方法:以永生化的HUVECs细胞为研究对象,分别给予0、5、10、20、40、80、160μg/mL纳米炭黑颗粒(下称炭黑),0、2.5、5、10、20、40、80、160μg/mL尘土颗粒(下称尘土),0、6.25、12.5、25、50、100、200、400μmol/L醋酸铅,0、5、10、20、40、80、160μmol/L亚砷酸钠和氯化镉,染毒24 h,采用CCK-8法测定不同受试物对细胞存活率的影响,并计算不同受试物对HUVECs细胞的半数抑制浓度(IC50)。然后进行联合染毒实验,选用细胞存活率为80%时的剂量,炭黑(或尘土)分别与铅、砷、镉对HUVECs进行联合染毒24 h,用CCK-8测定细胞存活率;另外根据PM_(2.5)中各组分实际占比,按m铅∶m炭黑/尘土=1∶50,m砷∶m炭黑/尘土=1∶100,m镉∶m炭黑/尘土=1∶500的比例进行两两联合染毒,以及按m铅∶m砷∶m镉∶m炭黑/尘土=10∶5∶1∶500的比例进行四者联合染毒。染毒24 h后,用CCK-8法测定细胞存活率。结果:HUVEC细胞存活率随着炭黑、尘土、醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉染毒浓度的增加而下降(P<0.05),以上各受试物对HUVECs细胞的IC50分别为16μg/mL、110μg/mL、184μmol/L、15μmol/L、14μmol/L。炭黑与醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉联合染毒时,细胞存活率比炭黑单独染毒时分别下降了17.8%、43.8%、41.2%;尘土与醋酸铅、亚砷酸钠、氯化镉联合染毒时,细胞存活率比尘土单独染毒时分别下降了11.6%、27.8%、28.3%。联合染毒时细胞存活率比单独染毒时明显下降(P<0.05)。炭黑与亚砷酸钠、炭黑与氯化镉之间存在交互作用(均为P<0.05)。结论:PM_(2.5)中不同组分均可以对血管内皮细胞产生毒性作用,单独暴露时炭黑的细胞毒性作用比尘土大;但与3种金属联合暴露时,尘土比炭黑的联合暴露细胞毒性更大。铅、砷、镉对细胞的毒性作用�
- 刘洁仪张睿夏冬李镕李晓雯陈姿旭魏青赵志强何云
- 关键词：大气细颗粒物超细颗粒联合毒性作用
- 血清中游离胆碱和甜菜碱的高效液相色谱串联质谱法测定及稳定性研究被引量：6
- 2011年
- 目的建立一种高效液相色谱串联质谱法（HPLC—MS／MS）同时测定血清中游离胆碱和甜菜碱的方法，并观察血清中两种物质的稳定性。方法以乙腈为除蛋白剂，d9-氯化胆碱、d9-甜菜碱为内标，SiO2柱分离。流动相为乙腈一甲酸铵缓冲液（15mmol／L，pH=3．5），等度洗脱，质谱检测。结果血清中游离胆碱和甜菜碱得到良好分离，最低定量检测限均为0．62μmol／L，线性范围均为0．62-400μmol／L，日内变异系数为2．50％～7．23％，日间变异系数为4．49％-14．79％。游离胆碱和甜菜碱的回收率均在88．64％-98．23％。稳定性研究中，血清保存温度、时间对游离胆碱和甜菜碱浓度均有影响，反复冻融只对甜菜碱的影响明显。结论高效液相色谱串联质谱法同时检测血清中的游离胆碱和甜菜碱具有较好的准确度和精密性，为临床和科研提供了一种简单快速的检测方法。建议在血清分离后3h内完成测定或可在3h内经乙腈处理后放置于4℃，24h内测定完毕。
- 王佳佳张伟谭炳炎王娴郑琳朱惠莲
- 关键词：胆碱甜菜碱稳定性
