川北医学院分子生物学研究所 作品数:19 被引量:36 H指数:3 相关作者: 唐恩洁 任碧轩 冯丽 更多>> 相关机构: 重庆医科大学神经科 更多>> 发文基金: 四川省教育厅重点项目 四川省卫生厅科研基金 四川省应用基础研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
学科教学知识对分子生物学教学的意义及构建途径 2014年 学科教学知识是学科专业知识和教学知识两者融合而来,是教师在教学过程中,逐步积累发展形成起来的;它体现教师个体的价值观,具有建构性、整合性和转化性等特点;它主要通过教师的自我构建和环境促成两种途径共同形成。文章介绍了学科教学知识的概念、特征及其在医学分子生物学教学中的意义和构建途径。 蒋振关键词:医学分子生物学 学科教学知识 教学改革 哺乳动物shRNA表达载体的构建及鉴定 被引量:3 2005年 目的:构建带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体。方法:用PCR方法从含有人U6启动子的载体PTZU6+1中扩增U6启动子,将其克隆到pEGFP-C1载体中,通过限制性内切酶、PCR及测序对构建的载体进行鉴定,以其转染HepG2细胞后,在倒置荧光显微镜下初步观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经限制性内切酶、PCR及测序证实,成功地构建哺乳动物shRNA表达载体。以其转染HepG2细胞后可以表达绿色荧光蛋白。结论:构建了带有绿色荧光蛋白报告基因的哺乳动物shRNA表达载体,为以后运用该载体进行RNAi相关研究奠定了一定的基础。 杨健 唐恩洁 朱道银关键词:SHRNA RNA 哺乳动物 不同种株利什曼原虫毒力基因表达谱的初步研究 利什曼原虫为一复杂的种团结构,不同种株的利什曼原虫引起皮肤局部损害、黏膜损害及致死性的内脏利什曼病。为了分析利什曼原虫毒力基因表达的种株期异质性,我们以含10%新生小牛血清的M199 复合培养液体外培养硕大利什曼原虫人株... 敬保迁 张仁刚 张洁关键词:利什曼原虫 毒力基因 文献传递 抗结核重组BCG疫苗研究进展 被引量:2 2015年 结核病仍是严重威胁人类健康的传染病之一,卡介苗(mycobacterium bovis bacillus calmette-guérin,BCG)是唯一被批准用于结核病预防的疫苗,但近年来的研究发现其免疫保护效果极不稳定,构建重组BCG成为目前新型抗结核疫苗研究的重要方向之一。本文概括性地介绍了抗结核重组BCG疫苗研究的必要性、抗结核重组BCG的研究策略与研究进展以及存在的问题和未来展望。 杨爱琼 谢勇恩关键词:结核疫苗 重组BCG 免疫原性 免疫保护性 研究生分子生物学实验教学模式的探索 被引量:2 2012年 分子生物学实验课程是医学研究生教学中一门应用性很强的基础课程,根据该院研究生实验课程的情况,就如何培养学生基本的实验技能、学生动手能力、科研创新能力、学生分析问题和解决问题的能力等方面的教学经验进行了总结。 王朝莉关键词:分子生物学 教学 实验教学 重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bc-l2及p53表达的关系 被引量:1 2004年 目的 :探讨重组人白血病抑制因子 (rh LIF)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用及其可能机制。方法 :不同剂量 (10~ 4 0 0 0U·ml-1)的rh LIF作用HL 6 0细胞 3d后 ,用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率 ,用TUNEL法检测原位细胞凋亡情况 ;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh LIF作用 2、4、6d后P5 3蛋白及p5 3mRNA、bcl 2mRNA表达水平的改变。结果 :rh LIF (10~ 4 0 0 0U·ml-1)作用d 3,细胞凋亡率较对照组显著增加 ,其中以10 0 0U·ml-1组的作用最强 ;rh LIF (80 0U·ml-1)作用 2~ 6d ,P5 3蛋白和p5 3mRNA表达也同步增高 ,而bcl 2mRNA表达显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :rh LIF能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,该作用与P5 3蛋白表达增加和bcl 杜冰 朱道银 唐恩洁关键词:凋亡 HL-60细胞 BEL-2 利用RNA干扰技术干扰HBeAg表达的研究 被引量:1 2008年 构建针对乙肝病毒HBeAg前c/c区(HBV prec/c)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(psiHBV),观察其在体内外对HBV复制的抑制作用。构建RNA干扰真核表达载体psiHBV,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染HeLa细胞,用微粒子化学发光分析仪(MEIA)分别检测细胞上清和细胞裂解液中HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/cmRNA的转录情况。随后用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型。采用此感染模型,将pHBV1.5与在体外实验筛选到有明显抑制作用的shRNA表达载体(psiHBV4)共注射,注射后第6天用同样方法检测其干扰效果。结果显示,成功构建了针对HBV前c/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC,筛选到在体外对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体;注射pHBV1.5的动物血清高表达HBsAg和HBeAg。而共注射干扰性psiHBV4明显抑制了HBeAg的表达,与单纯感染组相比有显著差异,RT-PCR显示肝内HBV C mRNA水平亦明显降低。上述结果表明,siRNA能特异抑制HBV的复制和表达,对乙型肝炎的治疗有潜在应用前景。 汪光蓉 张国元 杨健 唐中 唐恩洁 朱道银关键词:乙型肝炎 SHRNA RNA干扰 动物模型 幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501蛋白的原核表达与纯化 2011年 目的原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637株Hp1501蛋白。方法 PCR扩增H.pylori NCTC11637株Hp1501基因编码功能区序列Hp1501a,定向克隆至pQE30载体,构建重组原核表达质粒pQE30-Hp1501a,转化E.coli XL1-blue,IPTG诱导表达,并分析重组蛋白的表达形式。用Ni-NTA His柱对重组蛋白进行纯化。结果重组表达质粒pQE30-Hp1501a经双酶切鉴定构建正确,测序分析表明插入基因序列完全正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为37 000,表达量约占菌体总蛋白的21%,主要以包涵体形式存在,可与兔抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度达91%。结论成功原核表达并纯化了H.pylori NCTC11637株Hp1501蛋白,为H.pylori外膜蛋白的生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。 杨继文 杨致邦 敬保迁 于拽拽 熊玉霞 王朝丽 冯莉关键词:幽门螺杆菌 生物信息学 原核细胞 基因表达 纯化 小剂量阿糖胞苷与重组人白血病抑制因子联合诱导HL-60细胞凋亡的作用 被引量:1 2004年 杜冰 唐恩洁关键词:ARA-C 小剂量 凋亡 白血病抑制因子 阿糖胞苷 HL-60细胞 川北地区胃癌特异性表达基因的克隆 被引量:4 2011年 目的:构建胃低分化腺癌组织cDNA消减文库,筛选胃癌特异表达基因。方法:取胃低分化腺癌组织和癌旁正常黏膜组织,提取总RNA,逆转录cDNA,进行SSH构建消减文库获得序列标签,与载体连接、克隆、筛选、测序及同源性检索。结果:以癌旁正常黏膜组织为driver、胃低分化腺癌组织为tester成功构建cDNA消减文库,测序结果与公共数据库中已知基因和人类EST比较,获得5个特异性序列标签(NBPF1、FAM48A、RXFP2、ACTB和QDPR)。结论:应用SSH法成功构建胃低分化腺癌组织cDNA消减文库,初步筛选胃癌部分表达基因,为寻找川北地区胃癌发生发展的特异性基因奠定基础。 王朝莉 李丽 陈果 杨尚君 敬保迁 任碧轩 冯莉关键词:胃癌 SSH 特异基因