江苏大学基础医学与医学技术学院生物学系
- 作品数:7 被引量:30H指数:3
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- 外源一氧化氮对胃癌SGC-7901细胞增殖及细胞周期的影响被引量:8
- 2010年
- 目的:探讨外源一氧化氮(nitric oxide,NO)对胃癌细胞生长和增殖的影响。方法:应用MTT法评价NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(N-nitro-L-argininemethylester,L-NAME)对胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用,RT-PCR和Western印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cellnuclear antigen,PCNA)和Caspase-3 mRNA和蛋白的表达,FCM法检测细胞周期的变化。结果:SNP使细胞周期发生变化,与对照组比较,S期细胞减少,G0/G1期细胞增多,细胞由G0/G1期进入S期延缓;SNP抑制SGC-7901细胞的生长,PCNA mRNA、PCNA蛋白和Caspase-3蛋白表达降低。而NOS抑制剂L-NAME预处理逆转了SNP的这种作用。结论:NO可抑制胃癌细胞生长和增殖,加速细胞凋亡。
- 桑建荣陈永昌邵根宝黄晓佳
- 关键词:一氧化氮供体一氧化氮合酶增殖细胞核抗原细胞周期
- Tet-off诱导表达Egr-1HEK293稳定细胞株的建立和鉴定被引量:1
- 2014年
- 目的:利用大肠埃希菌Tet-off诱导表达调控系统构建多西环素调控的稳定细胞株。方法:以pEGFPEgr-1质粒为模板,扩增含早期生长反应蛋白(early growth response-1,Egr-1)完整开放阅读框的DNA序列,经酶切后插入含四环素反应元件(tetracycline responsive element,TRE)序列的表达载体pTRE2hyg,获得重组质粒pTRE2hyg-Egr-1,将其转染293Tet-off细胞株,并用G418和多西环素筛选稳定表达Egr-1的细胞株。蛋白质印迹法检测多西环素诱导表达Egr-1情况;流式细胞术检测细胞增殖能力。结果:蛋白质印迹结果显示,外源性Egr-1蛋白表达受细胞培养液中多西环素调控,当从细胞培养液中去除多西环素后,Egr-1表达量明显升高。流式细胞检测结果显示Egr-1高表达细胞的增殖能力明显高于Egr-1低表达细胞。结论:利用Tet-off体系成功构建Egr-1诱导表达的细胞株,细胞的增殖能力受Egr-1表达水平的影响。
- 彭琬昕孟凡力金洁龚爱华
- 关键词:多西环素
- 医学遗传学教学模式的改革与实践被引量:2
- 2010年
- 医学遗传学是一门横跨基础医学和临床医学的桥梁课程,是医学科学领域中十分活跃的前沿学科。但由于其涵盖的范围较广泛,不仅涉及经典遗传学的基本原理、分子生物学的基本研究方法.
- 金洁龚爱华邵根宝程建军
- 关键词:医学遗传学教学模式分子生物学
- 丙烯腈对鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响被引量:3
- 2006年
- 目的研究丙烯腈(ACN)对大鼠胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响。方法16 d的大鼠胚胎脊髓组织经取材、分离、消化后作原代细胞培养,加入不同浓度的ACN 0.01,0.1,1.0,10.0,50.0,100.0,200.0μg/ml,从细胞形态学及细胞计数角度观察细胞生长与分化过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性并与对照组进行比较。结果各组ACN明显抑制胚胎脊髓神经细胞的增殖和分化,集落形成率明显减少,细胞体积小;其半数分化抑制剂量(ICD50)为29μg/ml,半数存活抑制剂量(ICV50)为42μg/ml,均显示剂量-效应关系。结论ACN能抑制胚胎脊髓神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关。
- 端礼荣邢光伟王卉芳
- 关键词:丙烯腈细胞增殖分化脂质过氧化
- NO对胃癌细胞系AGS增殖的影响被引量:5
- 2010年
- 背景与目的:一氧化氮(nitric oxide,NO)参与机体内的多种生理和病理反应,它作为重要的生物介质在肿瘤发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤研究的热点。本实验通过研究NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对胃癌细胞系AGS的作用,探讨NO对胃癌细胞生长增殖的影响。方法:应用MTT法评价SNP对细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期的变化,RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的mRNA基因表达,Westernblot检测PCNA和caspase-3蛋白的表达。结果:SNP可剂量依赖性地抑制AGS细胞的生长,100、500、1000、1500、2000μmol/L SNP处理24h,细胞生长抑制率分别为(2.02±2.96)%、(10.82±2.21)%、(18.95±3.35)%、(26.88±2.54)%、(42.57±1.27)%;SNP可以使细胞周期发生变化,与对照组比较100、500、1000、1500、2000μmol/LSNP处理24h,S期细胞分别减少2.29%、7.8%、11.34%、20.49%、23.6%,G0/G1期细胞分别增加3.33%、9.3%、13.46%、21.37%、24.73%(P<0.05);随着SNP剂量增加和作用时间延长,PCNAmRNA和蛋白表达逐渐降低;caspase-3mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化。结论:NO能抑制AGS细胞的生长和增殖,诱导细胞的凋亡,其作用呈显著的浓度依赖性。
- 桑建荣陈永昌邵根宝黄晓佳
- 关键词:胃肿瘤一氧化氮AGS细胞增殖
- 一氧化氮抑制胃癌细胞系SGC-7901增殖及C-FOS和C-JUN表达
- 2010年
- 目的探讨一氧化氮(NO)对胃癌细胞系SGC-7901增殖的影响及其机制。方法MTT法测定细胞的生长,RT-PCR和W estern印迹法检测C-FOS和C-JUN的mRNA和蛋白表达。结果硝普钠(SNP)抑制SGC-7901细胞的生长(P<0.05),并呈剂量和时间性降低C-FOS和C-JUNmRNA及蛋白表达。结论NO可能通过下调C-FOS和C-JUN的表达而抑制胃癌细胞的增殖。
- 桑建荣陈永昌邵根宝黄晓佳
- 关键词:胃肿瘤一氧化氮
- 姜黄素联合顺铂对人肝癌细胞HepG2增殖、自噬和凋亡的影响被引量:11
- 2014年
- 目的探讨姜黄素联合顺铂对人肝癌细胞HepG2增殖、自噬和凋亡的影响。方法将不同浓度的姜黄素、顺铂单独或联合处理体外培养的人肝癌细胞HepG2。24h后,MTT法检测细胞活性,免疫荧光观察细胞内自噬泡形成情况,Western blot检测自噬、凋亡相关蛋白表达。结果与姜黄素或顺铂单药给药组相比,姜黄素联合顺铂更能明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05),促进微管相关蛋白LC3的点状分布,提高自噬相关蛋白Beclin1的表达和LC3Ⅱ/Ⅰ的比值(P<0.05),降低凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的比值(P<0.05),并激活半胱天冬氨酸蛋白酶3(P<0.05)。结论姜黄素联合顺铂可诱导HepG2细胞的自噬和凋亡,显著提高HepG2细胞对顺铂的敏感性。
- 熊二梦龚爱华金洁邵根宝彭琬昕
- 关键词:姜黄素顺铂肝细胞肝癌细胞自噬