西北农林科技大学动物医学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心
- 作品数：127 被引量：479H指数：10
- 相关作者：窦忠英徐小明杨炜峰李勇杨继建更多>>
- 相关机构：洛阳师范学院生命科学系榆林学院生命科学学院山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 不同浓度的EGF对山羊毛囊干细胞体外培养的影响被引量：8
- 2009年
- 采用2.4 U/mL Dispase酶消化和机械切割法分离毛囊隆突部,经胰酶(0.5 mg/mL胰酶+0.2 mg/mL EDTA)消化从山羊耳部皮肤分离得到毛囊干细胞,并检测4种不同浓度(0、10、15和20 ng/mL)的EGF对山羊毛囊干细胞体外培养的作用。结果表明,EGF对毛囊干细胞体外培养效果明显,最适EGF浓度为15ng/mL。
- 史明艳林峰杨学义窦忠英
- 关键词：毛囊干细胞克隆形成率EGF体外培养
- 胚胎干细胞与生殖细胞被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨生殖细胞的发生和细胞标记及胚胎干细胞向生殖细胞分化的进展及其关系。资料来源:检索Medline1950-01/2005-12相关胚胎干细胞和生殖细胞的文献,检索词“embryonicstemcells,germcells”,并限定文献语言种类为English。同时检索CNKI1990-01/2005-12相关胚胎干细胞与生殖细胞方面的文献,检索词为“胚胎干细胞,生殖细胞”,并限定语言种类为中文。资料选择:对资料初审,选取包括胚胎干细胞和生殖细胞方面的文献,开始查找文献。纳入标准:①胚胎干细胞。②生殖细胞。排除标准:综述、重复研究类文章。资料提炼:共收集到714篇关于胚胎干细胞和生殖细胞的文献,纳入23篇符合标准的文献。资料综合:胚胎干细胞是来源于着床前胚胎的一类未分化的全能性(多能性)干细胞。胚胎干细胞在一定条件下可以分化为包括生殖细胞在内的所有功能细胞。胚胎干细胞与各级生殖细胞及原始生殖细胞来源的胚胎生殖细胞具有一定的相似形。人类、小鼠和其它哺乳动物类胚胎干细胞的分离、建系和定向分化已经取得重要进展。而且胚胎干细胞可以诱导分化为包括生殖细胞在内的三个胚层的所有细胞类型。原始生殖细胞、胚胎干细胞和胚胎生殖细胞具有一些共同特性,可能共同来源于早期生殖细胞。结论:胚胎干细胞在一定条件下可以分化为包括生殖细胞在内的所有类型细胞。胚胎干细胞与各级生殖细胞有一定的相似形。
- 华进联杨炜峰窦忠英
- 关键词：胚胎干细胞生殖细胞
- 胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用被引量：10
- 2004年
- 胚胎工程技术研究的目的,是对哺乳动物的胚胎在体外进行人为控制操作,让其继续发育,进而获得优良或珍稀动物个体,并应用这类技术进行基础研究和应用开发性研究。文章主要叙述了胚胎移植、胚胎冷冻保存、胚胎分割、体外受精、性别鉴定及控制、转基因动物、细胞核移植、胚胎干细胞和胚胎嵌合等胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用前景。
- 李勇窦忠英杨炜峰
- 关键词：胚胎工程技术畜牧业胚胎移植胚胎冷冻胚胎分割
- 诱导胰腺干细胞再生胰岛治疗糖尿病的研究被引量：3
- 2007年
- 近年来,随着免疫抑制剂的改进及细胞移植技术的不断成熟,胰岛细胞移植已成为治愈Ⅰ型和部分Ⅱ型糖尿病的有效治疗方法,而胰岛供体短缺的矛盾亦更为突出．胰腺干细胞是一类存在于胎儿或成年胰腺组织中的成体干细胞．体外分离、克隆胰腺干细胞,并定向诱导其分化为功能性胰岛移植治疗糖尿病,是解决胰岛供体短缺的有效途径．目前,该研究已成为组织细胞工程研究的又一热点．文中综述了这一领域研究的最新进展．
- 效梅安立龙窦忠英
- 关键词：胰腺干细胞诱导分化胰岛移植
- 胎猪胰岛源胰腺干细胞分离培养与诱导分化试验被引量：6
- 2007年
- 目的分离培养胎猪胰腺干细胞对其进行功能检测。方法用先悬浮后贴壁的方法从胎猪胰岛获得胰腺干细胞,用免疫组化方法鉴定该细胞,以MTT法测定其不同代次的生长活性,诱导该细胞成为胰腺内分泌细胞并检测其功能。结果分离得到的细胞不表达nestin,而表达导管上皮细胞标志ck-19、平滑肌标志α-actin,其在体外的生长行为有类似胚胎干细胞样生长形态,细胞体外增殖活力很强,现已传至18代,细胞经诱导后分化为分泌胰岛素的胰腺内分泌细胞,并且伴随着细胞超微结构的改变。结论通过本方法可以分离到胎猪胰腺干/祖细胞,经诱导分化可形成有功能的胰岛样细胞团并释放胰岛素。
- 冯若鹏张慧茹窦忠英
- 关键词：胎猪胰岛胰腺干细胞诱导分化
- 粪尿类固醇激素检测在野生动物繁殖研究中的应用被引量：9
- 2003年
- 董武子窦忠英
- 关键词：粪样尿样类固醇激素繁殖研究
- 牛卵母细胞第一次减数分裂比第二次减数分裂对Cyclin B1表达量上升更敏感
- 卵子成熟过程中非整倍体的形成概率很高，因此了解减数分裂过程中的调控机制非常重要。细胞周期蛋白B在卵母细胞减数分裂的调控中起到重要作用。Cyclin B合成和降解的动态变化决定减数分裂的主要事件。本试验通过超表达Cycli...
- 刘文强雷安民
- 关键词：细胞周期蛋白B1成熟促进因子减数分裂牛卵母细胞
- 文献传递
- 小鼠Nanog基因原核表达载体的构建及表达被引量：12
- 2007年
- 【目的】构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白。【方法】根据Gene Bank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板,经PCR扩增出918 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化TGⅠ大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功。提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳鉴定,并优化其表达条件。【结果】在大肠杆菌中获得Nanog基因融合表达,主要以包涵体形式存在;融合蛋白的分子量为63 kD;以IPTG终浓度为0.8 mmol.L-1,诱导5 h后融合蛋白产量最高。【结论】小鼠Nanog基因在大肠杆菌中获得了高效表达,为今后Nanog蛋白的多克隆抗体制备奠定基础。
- 李军吕长荣窦琳窦忠英
- 关键词：NANOG基因原核表达GST融合蛋白小鼠
- 山羊原始生殖细胞的分离与培养被引量：7
- 2005年
- 从46例山羊胎儿中分离培养原始生殖细胞,发现胎龄在25～38d的胎儿原代培养时都可获得大量的细胞集落,适合做胚胎生殖细胞的分离培养,最高传至6代。以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)、山羊胎儿成纤维细胞(GEF)、牛胎儿成纤维细胞(BEF)为饲养层,在不添加细胞因子情况下,都可以培养出原代山羊的胚胎生殖细胞。传代结果表明,MEF的培养效果较好,但与GEF组差异不显著(P>0.05),BEF组培养效果较差(P<0.05)。以3个不同质量浓度LIF的培养液培养山羊原始生殖细胞(PGC)结果表明,在原代培养时,效果差异不显著(P>0.05);而在传代过程中,以含LIF10ng/mL组培养效果最好,但与含LIF5ng/mL组差异不显著(P>0.05),LIF1ng/mL组培养效果较差(P<0.05)。
- 葛秀国华进联杨继建徐小明窦忠英
- 关键词：山羊原始生殖细胞胚胎干细胞
- 山羊核移植胚胎干细胞的分离培养被引量：1
- 2011年
- 比较了不同发育阶段山羊核移植胚胎分离培养胚胎干细胞(NT-ESCs)的情况。结果表明,各阶段山羊核移植胚胎均可分离出NT-ESCs,其中孵化胚的NT-ESCs克隆形成率最高(38%),与囊胚(26%)差异显著,与桑葚胚(18%)差异极显著。所分离的NT-ESCs细胞形态与正常ESCs相似,均具有碱性磷酸酶活性,可表达多能性基因Oct-4和表面标志抗原SSEA-1。
- 葛秀国李吉霞窦忠英
- 关键词：山羊核移植胚胎干细胞
