南方医科大学公共卫生学院微生物学系 作品数:13 被引量:22 H指数:3 相关作者: 徐俊 更多>> 相关机构: 暨南大学药学院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 广东出入境检验检疫局科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
高表达CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移影响 被引量:2 2018年 目的趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)与乳腺癌的发生发展密切相关,但CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响并不十分清楚。本研究旨在探讨CXCR7对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。方法 PCR扩增CXCR7基因表达序列,构建重组质粒CXCR7/pMSCV-neo,与包装质粒PIK共转染HEK 293T细胞包装慢病毒,感染MCF-7细胞构建CXCR7高表达的MCF-7细胞。RT-qPCR及蛋白质印迹法检测感染后细胞株CXCR7基因和蛋白表达水平,流式细胞术检测MCF-7细胞表面受体CXCR7表达情况。MTT法检测细胞增殖情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果菌液PCR、双酶切及测序结果证实重组质粒CXCR7/pMSCV-neo构建成功,转染HEK293T细胞获得高滴度的慢病毒。RT-qPCR和蛋白质印迹法检测结果表明,相对于MCF-7^(Vector)细胞,MCF-7CXCR7细胞中CXCR7基因和蛋白的表达量分别增加约7.5和10倍。流式细胞术检测结果表明,转染后MCF-7细胞的CXCR7阳性率明显提高,t=22.946,P<0.001。而MCF-7^(Vector)细胞与未转染慢病毒的MCF-7细胞表面受体CXCR7的表达量,差异无统计学意义,t=0.386,P=0.706。MTT实验结果显示,相对于MCF-7和MCF-7^(Vector)细胞,MCF-7CXCR7细胞在24、48、72、96h的增殖率显著升高(n=5,P<0.05),表明MCF-7CXCR7细胞增殖速度明显高于MCF-7和MCF-7^(Vector)细胞,而MCF-7和MCF-7^(Vector)组各时间点细胞增殖率比较,差异无统计学意义,P>0.05。细胞划痕实验结果显示,相对于MCF-7和MCF-7^(Vector),MCF-7CXCR7细胞在24、48h的迁移率明显提高。结论成功构建CXCR7慢病毒表达载体,获得CXCR7受体高表达的乳腺癌细胞,同时证实CXCR7可促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力。 李雨静 黄闽辉 陈冰霞 马伟峰关键词:趋化因子受体 乳腺癌细胞 增殖 迁移 眼部蠕形螨感染影响睑酯菌群组成的相关分析 2023年 目的:探讨眼部蠕形螨感染影响睑酯菌群组成的相关分析。方法:采用非干预性、观察性研究的方法,选取2020-07/2021-02我院39例受试者,根据有无蠕形螨感染或有无睑板腺功能障碍(MGD)将受试者分为三组,对照组(14例)、睑板腺功能障碍组(MGD组,14组)、蠕形螨感染组(FM组,11组)。对三组受试者睑板腺睑酯样本进行16S rRNA基因V3~V4片段的高通量测序,测序数据进行生物信息学分析,以研究眼部蠕形螨受试者睑酯菌群的构成及差异。结果:蠕形螨感染组的假单胞菌属和丛毛单胞菌属丰度均显著高于健康对照组和MGD组(P<0.05),罗尔斯通氏菌属丰度显著低于对照组和MGD组(P<0.05)。MGD组和FM组睑酯菌群微生物丰富度、微生物群落多样性显著高于健康对照组(P<0.05)。结论:蠕形螨感染改变了睑酯菌群的构成,并提高了睑酯菌群的微生物丰富度和群落多样性。 朱佩燕 林少钦 林婉莹 李牧玲 范宏英 林琼希 冯裕涵 徐静 杨娟 刘琼关键词:蠕形螨 睑板腺功能障碍 干眼 呼吸道病毒核酸快速检测方案的建立与应用 被引量:1 2023年 本研究旨在建立一套便携、准确、操作简便的呼吸道病毒核酸快速检测方案。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证免提取的呼吸道病毒处理试剂(extraction-free respiratory virus treatment reagent,RTU)对病毒核酸处理的效果以及超快速荧光定量PCR仪(FQ-8A)对核酸扩增的效果;将RTU和FQ-8A结合构建呼吸道病毒核酸快速检测方案,通过荧光定量PCR仪中Ct值判断阳性检出率,以验证该方案检测临床样本时的准确性。结果表明,RTU与全自动核酸提取仪在提取效果上灵敏度相当;RTU在提取不同病毒类型样本时,与其他3种提取方法效果相当,但RTU提取时间少于5 min;FQ-8A检测呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)及腺病毒(adenovirus,ADV)与对照仪器ABI-7500具有良好一致性,kappa系数分别为0.938(P<0.001)和0.887(P<0.001),但FQ-8A耗时更短,扩增时间仅在0.5 h左右;RTU和FQ-8A相结合的快检方案与常规检测方案具有高度一致的检出率,其灵敏度为91.70%,特异度为100%,kappa系数为0.944(P<0.001)。总之,通过RTU与FQ-8A的结合构建了一套可在35 min内完成全部流程的呼吸道病毒核酸快速检测方案。该方案准确性高、操作简便,可为呼吸道病毒快速诊断和治疗提供重要支持。 黄媛媛 王宇 周承星 周志超 周炳亮 刘文宽 周荣 曹虹关键词:呼吸道病毒 以gp120、CD4和CXCR4为靶点的HIV小分子进入抑制剂研究进展 被引量:3 2017年 艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的一种烈性传染病,危害极大。病毒的包膜蛋白gp120及其受体CD4、辅助受体CXCR4在病毒感染中起着重要的作用。其中,gp120的Phe43口袋结构和Arg59是其与CD4分子相互作用的重要部位。HIV小分子进入抑制剂因能在HIV感染细胞前即发挥抑制病毒的作用,成为近年来抗HIV药物研究的热点。Phe43口袋结构是小分子进入抑制剂的重要靶点,目前研究热点化合物主要有BMS-378806、BMS-488043及其类似物、NBD-556及其类似物。靶向CXCR4也是研究HIV小分子进入抑制剂的一个重要方向。 陈冰霞 徐俊 马伟峰关键词:包膜糖蛋白 辅助受体 病毒感染致血脑屏障和中枢神经损伤及早期诊断的进展 中枢神经系统(central nervous system,CNS)的病毒感染,是一类严重危害人类健康的急性疾病,一般在数小时至数日内便造成严重的神经系统功能障碍,以致危及生命,既使患者幸存,也可能会留下严重的后遗症[1... 肖汉森 曹虹文献传递 NLRP3炎症小体在小鼠热应激损伤中的作用 被引量:3 2020年 [背景]热应激(HS)可导致机体重要脏器损伤甚至引起死亡,全身性炎症反应是其主要原因之一。NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在介导组织损伤引起的无菌性炎症中起重要作用,但其在HS损伤中的作用及机制尚不清楚。[目的]探讨NLRP3炎症小体在HS小鼠系统性炎症反应和多器官损伤中的作用。[方法]设立野生型C57BL/6雄性小鼠对照组、HS组,以及NLRP3敲除HS组(Nlrp3^(-/-)HS组),每组8只。利用温度(41.0±0.5)℃、湿度(65±5)%的高温环境模拟舱对HS组和Nlrp3^(-/-)HS组小鼠进行HS。每隔15~20 min监测肛温以及记录一般精神身体状况。当HS组小鼠肛温均超过42.0℃,立即将两组小鼠移至正常室温环境,于室温恢复4 h,解剖三组小鼠。HE染色观察小鼠肝、肾、脾、脑和肠组织的病理改变;采用ELISA试剂盒检测各组的血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平;采用内毒素检测试剂盒检测血清内毒素水平;采用免疫印记法检测肠闭锁蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达水平,以及脑、肝脏和肠道组织NLRP3、半胱天冬酶(caspase)-1、IL-1β的蛋白表达水平。[结果]受热90 min时,HS组小鼠的肛温[(42.1±0.2)℃]高于对照组[(36.6±0.2)℃],Nlrp3^(-/-)HS组小鼠肛温[(40.1±0.7)℃]和体重减轻量[(1.3±0.2)g]低于HS组(P <0.05)。HE染色显示HS组小鼠的肝、肾、脾、脑和肠组织有不同程度的损伤,而Nlrp3^(-/-)HS组小鼠的各个组织病理损伤程度减轻。与对照组相比,HS组小鼠血清的TNF-α、IL-1β和内毒素水平均升高,肠道Occludin、ZO-1表达量降低,Nlrp3^(-/-)HS组小鼠的IL-1β分泌量较HS组减少,肠道Occludin、ZO-1表达量增多(P <0.05);HS组小鼠脑、肝脏和肠道组织的NLRP3、caspase-1、IL-1β蛋白水平与对照组相比升高(P <0.05),Nlrp3^(-/-)HS组小鼠的NLRP3、caspase-1和IL-1β表达量较HS组降低(P <0.05)。[结论]NLRP3炎症小体活化参与了 张宏男 陈振辉 范宏英 朱嘉伟 郭进强 覃旻 王致 孟晓静关键词:热应激 体温 炎症因子 炎症反应 炎症小体在中枢神经系统感染中的作用 <正>1.前言炎症是由免疫细胞浸润受影响组织引起的宿主反应,它在调节宿主防御病原体,组织修复和恢复体内平衡方面发挥着重要作用。随着人们对神经系统炎症研究的不断深入,人们发现炎症小体可在神经胶质细胞中被激活,从而参与中枢系... 龚泽龙 张汉运 肖汉森 曹虹文献传递 靶向新型冠状病毒细胞因子风暴信号通路的治疗药物 2023年 细胞因子风暴(cytokine storm,CS)是导致新型冠状病毒感染(coronavirus disease 2019,COVID-19)急性呼吸窘迫综合征和多器官衰竭的机制之一。细胞因子作为病情转归的一种重要影响因素,逐渐成为近年COVID-19治疗方法的研究热点之一。在查阅和分析近年相关文献的基础上,本文以COVID-CS的关键细胞因子、相关信号通路、现有治疗药物为线索,总结了阻断细胞因子风暴信号通路的COVID-19治疗药物。未来新型冠状病毒治疗药物的研究可集中于研发靶向性更强的治疗药物,针对不同患者采用差异性的治疗方案。 李培然 高丽霞 王佳美 马炜森 马伟峰关键词:信号传导 基于GSEA和WGCNA分析幽门螺杆菌感染机制 被引量:2 2020年 背景幽门螺杆菌在世界范围内感染率高,参与胃溃疡、胃恶性肿瘤等多种疾病的发生发展,亟需对其感染及致癌机制进行研究。目的通过基因集富集分析(GSEA)、加权基因共表达网络分析(WGCNA)预测幽门螺杆菌感染的可能分子机制及枢纽基因。方法从基因表达综合数据库(GEO数据库)下载GSE27411数据集,通过GSEA分析与幽门螺杆菌感染相关的通路。利用WGCNA分析与幽门螺杆菌感染相关模块及枢纽基因,并对模块内的基因进行GO和KEGG富集分析。使用GEPIA对枢纽基因表达水平与胃癌的生存预后进行探索。结果通过GSEA分析挑选出10条hallmark通路和13条KEGG通路。通过构建WGCNA共表达网络,确定brown模块与幽门螺杆菌感染密切相关,该模块内的基因富集得到16个生物学过程及19条KEGG相关通路。GSEA和WGCNA交集得到4条KEGG通路。对模块基因筛选得到TNF、KIF2C、RRM2、CHEK1、PLK1、RAD51、CENPA、ASF1B共8个枢纽基因。利用GEPIA探索发现,KIF2C、RRM2、CHEK1、PLK1、RAD51、CENPA、ASF1B在胃癌组织中高表达,其中ASF1B与胃癌患者较差的总生存期及无疾病生存期相关。结论本研究通过GSEA和WGCNA分析方法,筛选出与幽门螺杆感染相关的4条核心KEGG通路,1个枢纽模块及8个枢纽基因。 陈振辉 陈慧娟 俞露 白杨 范宏英关键词:幽门螺杆菌 RNA-SEQ 数据挖掘 广东省两个地区2021-2022年百日咳鲍特菌分离株的抗菌药物敏感性和抗原基因型 2023年 目的了解广东省两个地区百日咳鲍特菌(Bordetella pertussis,Bp)抗菌药物敏感性和抗原基因型。方法通过MALDI-TOF-MS微生物质谱、荧光定量PCR和血清凝集试验对广州市和佛山市2021-2022年Bp分离株进行鉴定,采用E-test法进行10种抗菌药物的敏感性检测,利用二代测序平台和生物信息学分析软件进行全基因组测序和拼接,采用BLASTn软件分析抗原基因型和23 S rRNA基因突变。结果在15株Bp分离株中,12株(80.0%)对大环内酯类抗菌药物(红霉素、阿奇霉素和克拉霉素)耐药,且与Bp疫苗株相比存在23 S rRNA A2047 G突变,所有菌株对磺胺类、β-内酰胺类和喹诺酮类抗菌药物敏感;13株和2株分离株的抗原基因型分别为prn2/ptxA1/ptxC2/ptxP3/fim2-1/fim3-1/tcfA2和prn1/ptxA1/ptxC1/ptxP1/fim2-1/fim3-1/tcfA2。结论研究地区Bp分离株对大环内酯类抗菌药物的耐药率高,抗原基因型与疫苗株存在差异;需持续加强Bp流行株抗原基因型和药物敏感性监测。 李振翠 马炜森 王安娜 张昌 余青紫 马伟峰 刘美真关键词:百日咳 百日咳鲍特菌 抗菌药物敏感性