浙江中医药大学中医药科学院
- 作品数：124 被引量：531H指数：12
- 相关机构：浙江科技学院生物与化学工程学院中国计量大学生命科学学院浙江大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省中医药科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学文化科学生物学更多>>
- 玄胡索散通过下调粒细胞集落刺激因子抑制脾脏髓源抑制细胞分化发挥抗乳腺癌作用
- 2023年
- 目的:探讨玄胡索散抑制乳腺癌小鼠脾脏髓源抑制细胞(MDSC)分化的作用机制。方法:4~5周龄BALB/c雌性小鼠48只,其中6只为正常对照组,其他42只采用小鼠左侧第二对乳腺皮下脂肪垫接种4T1细胞构建乳腺癌荷瘤小鼠模型,分为粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对照组、G-CSF敲减组、模型对照组、玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组和环磷酰胺组,每组6只。其中G-CSF对照组和G-CSF敲减组分别采用shRNA慢病毒转染联合嘌呤霉素构建相应4T1稳转细胞模型。各组造模48 h后,玄胡索散小剂量组、玄胡索散中剂量组、玄胡索散大剂量组分别按2、4、8 g·kg^(-1)·d^(-1)玄胡索散灌胃,每天一次;环磷酰胺组按30 mg/kg腹腔注射环磷酰胺,隔天一次;其他组给予等体积0.5%羟甲基纤维素纳。各组连续给药25 d。苏木精-伊红染色观察脾脏组织病理学改变,流式细胞术测定脾脏MDSC亚群比例,免疫荧光法检测脾脏CD11b、Ly6G共表达,酶联免疫吸附测定外周血G-CSF浓度。在体外,建立荷瘤小鼠脾脏与4T1稳转株共培养体系,玄胡索散(30μg/mL)处理24 h,免疫荧光检测脾脏CD11b、Ly6G共表达;不同浓度的玄胡索散(10、30、100μg/mL)处理4T1细胞12 h,实时逆转录PCR检测G-CSF mRNA水平。结果:与正常对照组比较,模型鼠脾脏红髓增宽伴巨核细胞浸润,脾脏多形核细胞样MDSC(PMN-MDSC)比例增加(P<0.01),脾脏CD11b、Ly6G共表达增多,外周血G-CSF浓度上升(P<0.01)。玄胡索散干预后脾脏PMNMDSC比例减小(P<0.05),脾脏CD11b、Ly6G共表达减少,4T1细胞G-CSF mRNA水平下调(P<0.01),模型鼠外周血G-CSF浓度减少(P<0.05),肿瘤体积缩小,脾脏增大情况改善(均P<0.05)。结论:玄胡索散可能通过下调G-CSF,阻碍MDSC向PMN-MDSC分化,重建脾脏髓系微环境,从而发挥抗乳腺癌作用。
- 毛幼儿刘曦刘曦贺凯林晨高建莉
- 关键词：乳腺癌脾脏粒细胞集落刺激因子
- 载雷公藤红素的人参皂苷Rg3脂质体制备及其靶向治疗三阴性乳腺癌实验研究
- 2024年
- 目的根据三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞过度表达葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter type 1,Glut1),而人参皂苷Rg_(3)(ginsenoside Rg_(3),Rg_(3))的葡萄糖基可与Glut1底物高度结合的特点,以Rg_(3)为脂质体膜材,制备包载雷公藤红素(celastrol,Cel)的靶向治疗TNBC的脂质体(Cel/Rg_(3)-LPs),并对其靶向行为及抗TNBC疗效进行考察。方法采用薄膜分散法制备Cel/Rg_(3)-LPs并采用单因素考察法优化处方,对优化处方的Cel/Rg_(3)-LPs进行形态、粒径、ζ电位、体外释放和稳定性的考察;通过Cel/Rg_(3)-LPs在体外鼠源4T1细胞的摄取实验、及对BALB/c原位荷4T1瘤株小鼠的治疗效果综合评价其靶向性。结果Cel/Rg_(3)-LPs优化处方为水化温度50℃,Cel为1.5 mg,Rg_(3)为3.0 mg,大豆磷脂为21.0 mg,制备得到的脂质体外观呈圆球形,分布均匀,其粒径和PDI分别为(148.4±0.23)nm和0.19±0.01,ζ电位为(-29.70±0.34)mV,Cel在脂质体中包封率为(96.69±0.03)%,载药量为(5.62±0.01)%。Cel/Rg_(3)-LPs在4T1细胞中的摄取作用显著增强,且显著抑制4T1细胞增殖;原位荷瘤小鼠体内实验表明,Cel/Rg_(3)-LPs能降低肿瘤组织脂质,并明显抑制肿瘤生长,具有良好的肿瘤靶向性,无明显肝肾毒性和组织毒性。结论利用Rg_(3)替代胆固醇作为脂质体膜材可使雷公藤红素具有较好的TNBC靶向性,其药效相比胆固醇作为膜材显著增强,值得进一步研究。
- 孔昱欢张晓萍施经斌黄靖怡丁烨陈姝桦熊阳
- 关键词：雷公藤红素脂质体三阴性乳腺癌葡萄糖转运蛋白1薄膜分散法
- 肉桂酸合成实验的改进被引量：4
- 2019年
- 肉桂酸合成实验是有机化学实验教学中的重要实验。对肉桂酸的合成进行了改进,以苯甲醛与乙酸酐为反应物,氯化胆碱-尿素低共熔溶剂为反应溶剂和催化剂,Perkin反应制备肉桂酸。简化了后处理步骤,加水、过滤即可直接得到产物。滤液用乙酸乙酯萃取除杂后,可回收氯化胆碱-尿素,重复使用。改进的方法避免高温,减少了副反应的发生,改善了操作环境,操作简单、收率高、实用性强、值得推广。
- 蒋成君程桂林
- 关键词：肉桂酸PERKIN反应
- HPLC法测定荷叶中荷叶碱含量的不确定度评定被引量：2
- 2020年
- 目的:评定HPLC法测定荷叶中荷叶碱含量的测量不确定度,分析影响不确定度的主要因素。方法:参照《中华人民共和国药典》(2015版)一部荷叶含量测定方法,建立数学模型,对各因素进行量化分析与评定。结果:荷叶中荷叶碱含量的扩展不确定度为0.01%,测量结果表示为0.23%±0.01%,k=2。结论:测量不确定度的主要来源为对照品的称量。因此对照品称量过程需严格把控以确保测量结果准确可靠。
- 应佳妮王兴飞
- 关键词：荷叶荷叶碱不确定度
- 乳痈方对4T1乳腺癌小鼠胸腺上皮细胞表型变化的作用及机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨乳痈方对4T1乳腺癌小鼠胸腺上皮细胞表型变化的作用及机制。方法:①选用BALB/c小鼠,建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型。模型动物随机分为模型组、环磷酰胺(CTX,30 mg/kg)组和乳痈方低、中、高剂量(0.145,0.29,0.58 g/kg)组,每组4只。各组给予相应干预,连续20 d。末次给药后,采集小鼠胸腺、肺、脾、肿瘤、淋巴结组织,计算脏器指数和抑瘤率;观察肺表面结节情况,计算肺转移率。HE染色后光镜下观察胸腺形态学变化,免疫组化检测胸腺组织钙黏附蛋白E(E-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达。②体外分离小鼠原代胸腺上皮细胞(TECs),通过转染SV40T基因构建永生化TECs(iTECs)并验证。采用不同浓度(0、25、50、100、200、400μg/ml)乳痈方提取液处理iTECs。细胞培养48 h后,MTT法检测细胞增殖率,结晶紫染色观察细胞增殖情况。将iTECs分为空白组、TGF-β1组(10 ng/ml TGF-β1)、乳痈方低剂量组(10 ng/ml TGF-β1+50μg/ml提取液)、乳痈方中剂量组(10 ng/ml TGF-β1+100μg/ml提取液)、乳痈方高剂量组(10 ng/ml TGF-β1+200μg/ml提取液)。先加入TGF-β1诱导48 h后,再给予相应浓度的乳痈方提取液干预24 h。免疫荧光和PCR检测细胞表型标志物E-cadherin、Vimentin、α-微管蛋白(α-tubulin)及相关转录因子Zeb 1、Snail 1的表达水平。建立Smad转染的iTECs,荧光素酶报告基因检测乳痈方对TGF-β1诱导的转染iTECs细胞Smad通路活化的影响。结果:①与模型组相比,乳痈方低、中、高剂量组的肿瘤指数均显著降低(P<0.05),抑瘤率分别为33.45%、31.43%和6.49%;肺转移总数以及直径>2 mm转移灶数均明显减少(P<0.05,P<0.01),肺转移率分别为75%、75%和100%。HE染色观察显示,模型组小鼠胸腺组织皮质和髄质交界模糊,细胞排列紊乱,皮质萎缩;乳痈方各剂量组小鼠的胸腺组织皮质区和髄质边界较明显,皮质区细胞总数较模型组显著增多(P<0.05,P<0.01),髄质区细�
- 石荣珍沈佳曼张进宇贺凯邵锦晖高建莉
- 关键词：乳腺癌上皮-间质转化TGF-Β1表型
- 姜黄素共晶研究进展被引量：1
- 2017年
- 姜黄素是一种天然多酚类化合物,具有降血脂、抗肿瘤、抗炎、利胆、抗氧化等多种药理活性。然而,姜黄素水溶性差(8.7 mg/L)的缺点限制了其临床应用。姜黄素可以与多种共晶形成物形成共晶,从而改变其理化性质。本文对姜黄素的共晶制备方法及其熔点、溶解度和稳定性等性质进行了综述,为姜黄素在药物中的应用提供借鉴与参考。
- 程桂林邓彩赟蒋成君
- 关键词：姜黄素共晶溶解度
- 葡萄柚精油协同紫外线灭活果蔬表面诺如病毒和大肠杆菌的研究
- 2023年
- 【目的】果蔬中大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)和诺如病毒(norovirus)常导致食源性疾病暴发。紫外照射(UV-C)是灭活病原微生物的常用手段,但由于果蔬表面的特殊构造,UV-C对微生物的灭活效果受到一定的限制,同时也影响食品的颜色、质地和组织稳定性。葡萄柚精油(GEO)具有较强的抗菌和抗病毒活性且使用安全,但单独使用成本太高。试验旨在探究GEO协同UV-C作用对果蔬表面病原微生物的灭活效果,为提升食源性疾病暴发的防控技术提供科学依据。【方法】使用特定浓度的大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)(6.07×108 CFU/mL),鼠诺如病毒(MNV-1)(5.29×105 PFU/mL)和杜兰病毒(TV)(5.67×105 PFU/mL)在无菌环境下人工污染樱桃番茄、生菜和蓝莓表面,利用不同质量浓度GEO(1.0,4.0,8.0,16.0,32.0,64.0 mg/mL)和不同照射剂量UV-C(20,40,60,80,100,200 mJ/cm^(2))协同处理樱桃番茄、生菜和蓝莓表面的病原体,分析GEO与UV-C对病原体的协同灭活功效及其机理,并评估该灭活方法对果蔬组织损伤的影响。【结果】观察到UV-C的照射剂量80,100,200 mJ/cm^(2)对3种病原体均具有显著的灭活作用,GEO的抗病原作用具有剂量和时间相关性。在8 mg/mL GEO处理12 min后再与UV-C(100 mJ/cm^(2))协同作用下3种病原体的含量显著减少(2.42 log10~3.22 log10,P=0.017~0.029)。采用同样的协同方式处理樱桃番茄、生菜和蓝莓表面的病原体,发现同样具有显著的灭活效果(1.9 log10~3.68 log10,P=0.012~0.035)。透射电子显微镜结果表明,GEO引起病毒衣壳蛋白变性,这解释了GEO的抗病原作用及其在紫外线照射下的增强作用。最后,果蔬质构分析和感官评价表明,GEO的添加对测试食品的味道和品质影响较小。【结论】GEO协同UV-C处理是一种高效灭活果蔬表面病原体的方法,同时对测试产品的品质影响较小,将为食源性疾病防控提供新的技术支持。
- 王月霞陈欣芸唐梦璇杨鹏飞廖宁波
- 关键词：果蔬大肠杆菌O157:H7
- 基于网络药理学及体外实验探究温下方正丁醇部位联合吉非替尼治疗非小细胞肺癌的作用机制被引量：2
- 2024年
- 运用网络药理学、分子对接和体外实验探究温下方正丁醇部位(n-butanol fraction of Wenxia Formula,NWXF)联合吉非替尼(gefitinib,GEF)治疗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的潜在作用机制。超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap MS)检测NWXF的主要化学成分,利用SwissADME数据库筛选NWXF的活性成分,SwissTargetPrediction数据库获取NWXF活性成分的潜在作用靶点,OMIM和GeneCards数据库搜集NSCLC相关疾病靶点。运用Cytoscape 3.9.0软件和STRING数据库对共同靶点进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络构建和关键靶点筛选,利用DAVID数据库进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,预测其可能的作用机制。运用SYBYL-X 2.0软件对核心成分与关键靶点进行分子对接验证。MTT法检测NWXF和GEF单用及联用对人非小细胞肺癌细胞(A549、PC-9)增殖的抑制作用以及NWXF对人胚肺成纤维细胞MRC-5的作用,运用Q值评价两药联用的效果,TUNEL法检测NWXF和GEF单用及联用对A549、PC-9细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测NWXF和GEF单用及联用对A549、PC-9细胞EGFR、JNK、Bax mRNA表达的影响,蛋白印迹(Western blot,WB)法检测NWXF和GEF单用及联用对A549和PC-9细胞EGFR、p-EGFR、JNK、p-JNK、Bax蛋白表达的影响。结果共获取NWXF治疗NSCLC的77种活性成分、488个潜在靶点及49个关键靶点。GO富集分析结果显示,NWXF干预NSCLC可能与调控细胞增殖、凋亡过程及蛋白质磷酸化等生物学过程相关,KEGG富集分析结果显示,NWXF干预NSCLC可能与调控MAPK信号通路、PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路及肿瘤中的microRNA等信号通路相关。NWXF中核心成分与关键靶点分子对接结果显示,91.9%的对接分值>5,表明核心成分与关键靶点有较好的结合能力。�
- 陈瑞杰毕倩宇施杰民钟婧韩晋涛季旭明
- 关键词：吉非替尼非小细胞肺癌分子对接
- 不同来源白及中3个主要化学成分的含量比较被引量：10
- 2019年
- 为了了解相同种植条件下60个不同来源白及中贝母兰宁、山药素Ⅲ和3’-O-甲基山药素Ⅲ的含量差异。该研究采用UPLC进行测定,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm)色谱柱,以乙腈-0. 1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0. 208 m L·min-1,检测波长270 nm,柱温35℃,进样量为4μL。结果表明,在上述色谱条件下3个成分分离度良好,在0. 156~5. 000 mg·L-1线性良好,测得贝母兰宁、山药素Ⅲ和3’-O-甲基山药素Ⅲ平均质量分数分别达(0. 116±0. 071)%,(0. 386±0. 185)%,(0. 086±0. 034)%。不同来源、不同品种白及在相同条件下种植2年后,化学组成差异不大,但3个成分含量具有一定的地域性差异,表现为西部地区高于东部地区的趋势;而华白及中贝母兰宁、山药素Ⅲ含量稍高于白及。该色谱方法简单,稳定性、重复性好,可用于3个成分的定量分析;不同来源白及成分含量分析可为今后白及优良品种选育和质量标准制定提供参考。
- 蒋福升沈徐婷姚玥丁滨李美芽丁志山吕圭源
- 关键词：白及超高效液相色谱
- 肿瘤微环境与乳腺癌细胞互作导致肿瘤转移的研究进展被引量：4
- 2022年
- 乳腺癌是一种侵袭性强、转移性强、复发率高的恶性肿瘤,能够通过多种途径实现乳腺癌细胞向其他组织的转移。肿瘤与其他细胞相互作用形成的肿瘤微环境为乳腺癌细胞的转移提供条件。本文综述了近年来肿瘤微环境对乳腺癌细胞转移的作用及机制,包括脂肪细胞、成纤维细胞、神经内分泌细胞、免疫和炎症细胞、血液和淋巴管网络及细胞外基质,并讨论如何为预防乳腺癌转移提供治疗方案。
- 施经斌熊阳
- 关键词：肿瘤微环境乳腺癌
