东北农业大学生命中心
- 作品数：36 被引量：155H指数：8
- 相关作者：李英刘洪梅吕薇王知非宋军更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学动物科学与医学学院南京农业大学生命科学学院杂草研究室南京农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 新型抗IL-1β和IL-17A双特异抗体的构建及特性鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的双特异性抗体（bispecific antibody，BsAb）具有双重的生物学功能。本实验旨在设计并原核表达抗人IL-1β和抗人IL-17A的双特异性抗体（BsAb1／17），获得具有生物活性的BsAb1／17，为深入研究和利用双特异性抗体奠定基础。方法利用重叠PCR方法构建VH1VL17-CL和VL1VH17-CH1基因片段，并且在所用引物的5’和3’端附加NcoI和BamHI的酶切位点。将重叠PCR产物进行胶回收后用NcoI／BamHI进行双酶切，酶切产物再次胶回收，将其连接到用NcoI／BamHI消化的pET-27b载体上。将重组质粒pET-27b—VH1VL17-CL（petA）和pET-27b—VLIVH17-CH1（petB）转化到Eco1iRosetta中。SDS—PAGE和Westernb1ot进行鉴定，用rea1—timePCR检测其阻断IL-1β刺激人T细胞表达细胞因子IL-1β的活性，人IL-6定量酶联检测试剂盒检测其阻断IL-17A刺激HeLa细胞表达人IL-6的活性。结果DNA测序结果证明成功构建了pET-27b-VHIVL17-CL（petA）和pET-27b-VL1VH17-CH1（petB）表达质粒。petA、petB诱导产物主要以包涵体形式存在，成熟蛋白纯化产物纯度超过90％以上，经SDS-PAGE分析表明表达产物的相对分子质量约为38×10^3，与理论值相符。Western b1ot和ELISA结果证实双特异抗体BsAb1／17对IL-1β和IL-17A均具有很好的亲和力。通过RT-PCR检测证明其具有阻断IL-1β刺激人T细胞大量表达细胞因子IL-1β的活性，并且具有阻断IL-17A刺激HeLa细胞产生IL-6的活性。结论成功构建了同时抗IL-1β和IL-17A的双特异抗体，并利用大肠杆菌表达系统高效表达较高纯度的具有生物活性的双特异抗体。
- 王秋颖徐黎明任桂萍彭中宜丁良君孙阳陈睿李德山
- 关键词：双特异性抗体原核表达
- 植物样品电镜制样方法的改进
- 崔琳刘岩王学东
- 文献传递
- 草甘膦对大豆超微结构及光合指标影响的研究被引量：13
- 2008年
- 利用透射电镜和扫描电镜,研究转基因抗草甘膦大豆和非抗草甘膦大豆东农42喷施草甘膦后大豆光合器官叶片的超微结构变化,并结合叶绿素含量、光合速率的测定,对比分析了抗草甘膦大豆和东农42在结构及生理功能上对草甘膦的表现及结构与功能变化的关系。研究结果表明抗草甘膦大豆对草甘膦的胁迫可以看作是一种适应。它首先经过一个损伤期,然后进入修复期,最终到基本恢复,表现出对草甘膦的抗性。而东农42的光合系统及光合功能则被草甘膦所彻底破坏。本文对其原因进行探究,以期为转基因作物育种尤其是超微结构方面的研究及草甘膦作用机理的研究有一定帮助。
- 卜贵军刘洪梅李英崔琳王学东
- 关键词：抗草甘膦大豆超微结构光合作用
- 链格孢菌毒素对紫茎泽兰叶组织超微结构的影响被引量：10
- 2004年
- 用导致世界恶性杂草紫茎泽兰自然致病的链格孢菌(Alternariaalternata(Fr.)Keissler)强致病菌株所产生的毒素处理紫茎泽兰顶端第2对真叶,研究该毒素对紫茎泽兰叶肉细胞超微结构的影响。结果表明毒素处理4h后,细胞出现质壁分离,叶绿体变形;24h后叶肉细胞的细胞壁变形甚至断裂,质膜断裂;叶绿体变形严重,类囊体片层解体,叶绿体膜膨胀、断裂。叶肉细胞的叶绿体受损伤程度大,暗示了毒素的作用方式很可能是抑制光合作用。
- 常缨王学东强胜
- 关键词：紫茎泽兰兰叶链格孢菌叶肉细胞超微结构
- 香菇子实体不同生长发育期细胞超微结构的研究
- 香菇是著名的大型食用菌,营养丰富,味道鲜美,自古以来被推崇为'山珍'.其蛋白质含量高达20﹪,人体必需的8种氨基酸,尤其我国人民膳食结构中普遍缺乏的赖氨酸在香菇中含量丰富.为了开发真菌的资源和探讨真菌学中的理论问题，我们...
- 华秋东孙嫒丽崔琳王学东
- 关键词：香菇生长发育细胞超微结构
- 文献传递
- 生物样品制备中铅染色方法的改进
- 崔琳王学东
- 文献传递
- 加热对胡萝卜超微结构和所含营养物质的影响
- 2005年
- 杨健王知非崔琳王学东
- 关键词：类胡萝卜素营养物质超微结构Β-胡萝卜素脂溶性维生素细胞壁
- 栽培大豆与野生大豆联会复合体的电镜研究
- 1999年
- 以改进的去污剂微铺展技术制备大豆减数分裂联会复合体标本，并对联会复合体发育的过程进行了电镜观察。结果表明：大豆ＳＣ以多点或起始方式于偶线期开始形成；随着ＳＣ的发育新的ＳＣ形成和已有ＳＣ片断的延伸并存；ＳＣ成熟于粗线期，而以破碎方式解体消失于双线期。本文列出了栽培大豆和野生大豆的ＳＣ核型，并对联会复合体侧轴加厚的数目、分布形式作了描述。
- 弭忠祥
- 关键词：联会复合体大豆电子显微镜栽培野生大豆
- 草甘膦对大豆超微结构及光合指标影响的研究
- 利用透射电镜和扫描电镜,研究转基因抗草甘膦大豆和非抗草甘膦大豆东农42喷施草甘膦后大豆光合器官叶片的超微结构变化,并结合叶绿素含量、光合速率的测定,对比分析了抗草甘膦大豆和东农42在结构及生理功能上对草甘膦的表现及结构与...
- 卜贵军刘洪梅李英崔琳王学东
- 关键词：抗草甘膦大豆超微结构透射电镜转基因大豆
- 文献传递
- 大豆种子发育阶段种皮细胞壁表面糖蛋白的变化被引量：4
- 1999年
- 利用电镜细胞化学的方法，对大豆种子在发展的不同阶段，种皮细胞壁表面糖蛋白的变化进行了定位观察。经红标记染色，在种皮外层细胞壁的表面，糖蛋白呈现出较高电子密度，紧贴于细胞壁的表面，形成均匀的糖蛋白层。在种子发育的不同阶段，该糖蛋白层的厚度，随着种子的发育而不断增加，在开花后的第２５－３０天时，糖蛋白层的厚度达到最大，一般在５０－６０ｎｍ。种子在以后的发育过程中，糖蛋白层的厚度基本维持在这一水平。
- 弭忠祥赵小钒胡宝忠胡宝忠
- 关键词：大豆种子发育糖蛋白电镜细胞化学
