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肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网形成被引量：4: 2016年; 目的初步探究肺炎链球菌诱导中性粒细胞胞外捕获网(NETs)形成的作用及调节机制,为进一步研究奠定基础。方法采用免疫磁珠法分选C57BL/6小鼠骨髓中性粒细胞,肺炎链球菌刺激中性粒细胞,分别采用脱氧核糖核酸酶(DNase)降解NETs和NADPH氧化酶抑制剂二苯基氯化碘盐(DPI)预处理中性粒细胞阻断活性氧簇(ROS)生成,免疫荧光染色观察NETs结构,检测游离DNA定量观察NETs的生成。结果肺炎链球菌刺激中性粒细胞释放NETs,DNase降解NETs结构,阻断ROS生成后NETs形成受抑。结论肺炎链球菌能够诱导NETs形成,DNase直接降解NETs或DPI抑制NETs形成可以成为调节NETs生成的有效途径。; 金春芳黄益飞王子萌项云何於娟; 关键词：肺炎链球菌中性粒细胞活性氧簇

555例慢性化脓性中耳炎的病原学及药物敏感性分析被引量：13: 2016年; 目的了解慢性化脓性中耳炎耳分泌物病原微生物类型及致病菌的药物敏感性,指导临床合理用药。方法收集2013年1月至2015年3月慢性化脓性中耳炎住院患者(纳入患者555例,共计571耳,其中男性272耳,女性299耳)耳分泌物,经细菌培养和药敏试验,进行病原微生物分离率的排序,检测致病菌的药物敏感度。结果 571耳中培养有微生物生长379耳(占66.37%),其中细菌334耳(占88.13%)、真菌47耳(占12.40%)。细菌检出率依次为凝固酶阴性葡萄球菌191耳(占57.19%)、金黄色葡萄球菌58耳(占17.37%)、铜绿假单胞菌31耳(占9.28%)。药物敏感性因菌种而异。结论慢性化脓性中耳炎活动期患者耳分泌物以凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌为主。药敏试验对临床用药有指导作用。; 刘佳丽王维王子萌金春芳范芳梅马毓蓉何於娟余林; 关键词：慢性化脓性中耳炎细菌培养药敏试验

听泡穿刺注射法构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型被引量：3: 2015年; 目的探讨听泡穿刺注射法建立小鼠急性中耳炎模型的可行性和实用性.方法采用听泡穿刺注射的方法建立C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,造模组注射5μl肺炎链球菌19F悬液（1×10^7 CFU/ml）,对照组注射等量无菌磷酸盐缓冲液.观察注射后小鼠行为变化,分别于建模后12h、1d、2d、3d、5d、7d处死小鼠,分离中耳组织HE染色观察病理改变,同时收集中耳灌洗液检测炎性细胞数量、细菌载量及相关炎性因子含量.结果接种1d后,中耳腔内细菌迅速增殖,产生大量肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）,中耳黏膜基质内血管扩张充血,以中性粒细胞为主的炎性细胞逐渐渗出;接种2～3d后细菌载量开始降低,炎性因子表达水平下降,但中耳腔内炎性细胞浸润及黏膜增厚达最高水平;接种5～7d后,细菌基本被清除,中耳炎性反应逐渐消退.结论听泡穿刺注射方法可成功构建C57BL/6小鼠急性中耳炎模型,具有较好的可行性和实用性。; 黄益飞金春芳项云王磊王子萌王维何於娟

两种不同血清型肺炎链球菌致C57BL/6小鼠急性中耳炎的敏感性差异被引量：1: 2013年; 目的比较两种不同血清型肺炎链球菌致C57BL/6小鼠急性中耳炎的敏感性.方法实验组C57BL/6小鼠经鼓膜穿刺分别接种血清型为TIGR4和6B的肺炎链球菌,对照组采用相同方法接种等体积磷酸盐缓冲液（PBS）.观察小鼠发病情况,分别于感染后第1、3、5、7天制备中耳组织切片,HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化,同时收集中耳灌洗液,检测灌洗液中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量.结果 6B组小鼠生存率明显低于TIGR4组和PBS对照组,差异具有统计学意义（P＜0.01）.接种肺炎链球菌后,小鼠中耳灌洗液中以中性粒细胞为主,TIGR4组募集的炎性细胞数量明显多于6B组;中耳灌洗液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量明显升高,其中TIGR4组细胞因子水平均明显高于6B组;6B组小鼠中耳内的细菌清除更慢.结论在C57 BL/6小鼠急性中耳炎模型中,6B型肺炎链球菌比TIGR4型致病性更强.; 王维周爱娥黄益飞项云何於娟; 关键词：肺炎球菌感染中耳炎

流感病毒感染后接种肺炎链球菌继发中耳炎小鼠模型的建立被引量：2: 2018年; 目的建立甲型流感病毒(influenza A viruses,IAV)感染后继发肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn)感染性中耳炎小鼠模型。方法经鼻感染不同剂量甲型H1N1型流感病毒PR8,感染后第5天听泡穿刺接种Spn建立C57BL/6小鼠继发感染中耳炎模型,观察小鼠体质量变化和生存率;于建模后不同时间点处死小鼠,制备中耳组织切片HE染色,收集中耳灌洗液进行细胞及细菌计数,ELISA检测灌洗液中炎症因子。结果 PR8预感染可导致Spn感染性中耳炎小鼠死亡,而单纯Spn感染小鼠无死亡,小鼠体质量变化及生存率与病毒剂量呈剂量依赖方式;PR8感染后继发Spn感染小鼠中耳腔炎症细胞浸润明显多于单纯Spn感染小鼠,且细菌载量明显增加;PR8继发Spn感染小鼠中耳腔炎症因子IL-6、IFN-γ与单独Spn感染小鼠差异无统计学意义(P>0.05),而TNF-α明显增高(P<0.05)。结论成功建立了IAV感染后继发Spn感染性中耳炎C57BL/6小鼠模型。; 范芳梅马毓蓉王子萌王维董益麟何纤张欣欣何於娟; 关键词：继发感染中耳炎

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国家自然科学基金(81373151)