南京市卫生局资助项目(ZKM06043)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：沙玉根张爱华赵非黄松明陈荣华更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：南京市卫生局资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
- 2011年
- 目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin。结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin。结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用。
- 沙玉根赵非张爱华黄松明
- 关键词：足细胞HEK293细胞NPHS2基因重组
- 荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响。方法:PCR扩增NPHS2cDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆入pEGFP-C2。将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况。结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。
- 沙玉根黄松明张爱华赵非陈荣华
- 关键词：PODOCINCD2AP
